结果：PCNA在实验组和对照组的角膜缘干细胞中均有表达，位于角膜缘上皮细胞基底层的细胞核内，但羊膜移植组显著高于对照组，两者比较有统计学意义(P<0.05)； 羊膜移植术后1，2，3，4wk时PCNA蛋白在角膜缘干细胞的表达不一致，呈线性趋势，1wk达到高峰，以后逐渐降低。

结论：眼碱烧伤后行羊膜移植术可促进角膜缘干细胞的增殖表达，利于角膜上皮的修复。]]> 221true 2O₂处理的HLEC内磷酸化ERK(p-ERK)的表达，从而探讨雌二醇(β-Estradiol，E₂)，ECR和ISR是否通过启动或干预ERK/MAPK信号转导途径来发挥抗氧化损伤作用，以揭示E₂和ECR及ISR抗氧化损伤的信号转导机制。

方法：本研究采用ECR和ISR与人晶状体上皮细胞(HLEC)共同孵育，以E₂作为阳性对照，再用H₂O₂对HLEC造成氧化损伤后，采用流式细胞术(flow cytometer， FCM)检测不同时段的p-ERK蛋白表达。

结果：正常HLEC内存在p-ERK表达； H₂O₂组p-ERK表达量随时间的延长而减少； E₂和ECR与ISR各组p-ERK表达量分别在1，6，12h达到高峰。

结论：E₂和ECR与ISR的抗氧化损伤作用可能是与ERK/MAPK信号通路有关。]]> 220true 方法：健康14日龄SD大鼠20只，随机分为两组，实验组及对照组各10只。实验组大鼠缝合封闭单侧眼，制作单眼形觉剥夺动物模型。与对照组在同等自然光照环境下饲养至45日龄。分别对两组鼠进行电生理检测，并使用透射电镜观察两组大鼠视皮质的超微结构。

结果：正常大鼠F-VEP呈现典型的NPN波形，P₁波峰潜时短，波峰陡直。形觉剥夺大鼠F-VEP检测结果：P₁波峰潜时明显延长，波峰显著降低。电镜观察单眼形觉剥夺动物视皮质神经元的超微结构发现：形觉剥夺动物视皮质中神经元的超微结构受到破坏。

结论：单眼形觉剥夺可以影响大鼠视觉电生理的变化，使P波峰的潜时延长，振幅降低，这一改变是形觉剥夺性弱视视觉生理功能改变的体现； 单眼形觉剥夺可以引起大鼠视皮质神经元超微结构破坏，这一改变是形觉剥夺性弱视的形态学基础。]]> 219true 方法：新西兰兔20只随机分为两组，进行超声乳化晶状体摘除术后，实验组植入CTR 和Crane OV-55C 人工晶状体(intraocular lens，IOL)，对照组只植入Crane OV-55C IOL。观察术后并发症和PCO情况。术后3mo行光镜和透射电镜检查，观察晶状体后囊膜的形态学变化。

结果：术后3mo实验组和对照组都发生了明显的PCO(P>0.05)，各组Soemmering环形成程度无统计学差异(P>0.05)。病理学检查发现，两组兔赤道部晶状体上皮细胞增生形成了巨大的Soemmering环，大量晶状体上皮细胞移行至后囊膜。

结论：直角边缘CTR未能预防兔PCO的发生，有必要对其进一步改进。]]> 2013/8/26 15:29:05 218true 99Tc-MDP对碱烧伤性大鼠角膜新生血管生成的抑制作用。

方法：采用碱烧伤法制备角膜新生血管模型，24只健康SD大鼠随机分成两组，实验组予以腹腔注射⁹⁹Tc-MDP，每天1次，至模型建立后14d。对照组以等体积的生理盐水腹腔注射。观察新生血管形成时间、第21d时角膜新生血管长度和新生血管面积。

结果：实验组新生血管长入的时间为6.25±1.93d，对照组长入时间为5.83±1.86d，差异无统计学意义(P=0.30)。新生血管长度实验组为1.74±0.33mm，对照组为2.82±0.25mm； 新生血管的面积实验组为17.3±3.26mm²，对照组为24.8±5.10mm²，两者之间差异均有统计学意义(P<0.01)。

结论：使用⁹⁹Tc-MDP可以有效抑制碱烧伤引起的角膜新生血管的生成。]]> 2013/7/29 14:34:25 217true 方法：链脲佐菌素诱导SD大鼠DM模型，实验分4组，对照组； DM组； siNgR组：DM大鼠玻璃体内给予NgR反义核苷酸序列； siRNA空白组：DM大鼠玻璃体内给予阴性核苷酸序列。1mo后TUNEL染色检测视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell，RGC)凋亡，试剂盒检测视网膜丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量，Western-blot检测视网膜NgR及caspase-3含量。

结果：对照组、DM组、siRNA空白组及siNgR组MDA含量分别为3.74±0.49，7.21±0.96，6.41±1.34及4.02±0.53nmol/mg prot。与对照组相比，DM组及siRNA空白组视网膜RGC凋亡增加，NgR及caspase-3表达上调，MDA含量升高(P<0.05)，而siNgR组视网膜RGC数量、NgR及caspase-3表达、MDA含量较对照组均无明显变化(P>0.05)。

结论：NgR表达增加是糖尿病RGC凋亡的重要原因之一，其机制可能与NgR诱导视网膜氧化应激、上调caspase-3表达有关。]]> 2013/7/1 11:07:54 216true 方法：收集汉族病理性近视患者及正常人外周静脉血，提取全基因组DNA，采用聚合酶链反应-单链构象多态性方法，对标本中LAMA1基因第27外显子、第36外显子的基因序列进行扩增及直接测序分析，应用 SHEsis 软件检验两组样本是否符合哈迪-温伯格平衡(Hardy Weinberg Equilibrium，HWE)，通过 Fisher 确切概率检验病理性近视与 LAMA1 基因的相关性。

结果：本研究中LAMA1基因第27外显子、第36外显子未发现有意义的突变。

结论：LAMAl是否可被确认为病理性近视的致病基因尚需更深入的探究。]]> 2013/7/1 11:07:54 215true 方法：健康SD大鼠32只，随机分为对照组、多西环素组，每组16只大鼠。建立角膜碱烧伤模型后，多西环素组予3g/L多西环素眼液点眼，对照组予眼液溶媒点眼。分别于碱烧伤后第3，7，14，21d观察计算炎症指数，角膜取材后进行病理切片及炎症细胞计数，行ICAM-1的ELISA检测。

结果：多西环素组各时间点结膜充血、角膜水肿较对照组轻，炎症指数均明显低于对照组，差异有统计学意义(P< 0.05)。多西环素组各时间点炎症细胞计数少于对照组(P< 0.05)。多西环素组各时间点大鼠角膜的ICAM-1表达低于对照组(P<0.05)。

结论：多西环素可以抑制碱烧伤大鼠角膜的炎症细胞浸润，其机制可能是抑制ICAM-1的表达。]]> 2013/6/3 10:33:26 214true 方法：将87只SD大鼠分为角膜缘碱烧伤20s组(A组，34只)，角膜缘碱烧伤40s组(B组，23只)，角膜中央碱烧伤40s组(C组，30只)，用浸润1mol/L氢氧化钠的滤纸片，分别烧灼大鼠角膜缘和角膜中央，术后7d裂隙灯显微镜观察角膜透明度、角膜溃疡及角膜新生血管情况，并记录上述指标。

结果：角膜缘碱烧伤(B组)较角膜中央烧伤(C组)溃疡发生率、角膜穿孔率和角膜上皮荧光素钠染色阳性率高，且有统计学差异(P<0.05)； 角膜缘烧灼时间长组(B组)溃疡发生率及角膜穿孔率高于角膜缘烧灼时间短组(A组)，且有统计学差异(P<0.05)； 烧灼角膜缘和角膜中央(A，B，C组)均能诱导出角膜新生血管。

结论：对于研究角膜新生血管的动物模型，以选择3mm圆形滤纸片角膜中央烧伤为佳； 对于研究角膜缘干细胞缺乏所致角膜病变的实验，以选择环形滤纸片放置于角膜缘20s为佳。]]> 2013/6/3 10:33:26 213true 方法：采用MTT比色法研究相同浓度Avastin与Lucentis 对HUVEC增殖作用的差异； Transwell小室检测相同浓度Avastin与Lucentis对HUVEC迁移作用的差异。

结果：MTT比色法显示，各浓度Avastin组、Lucentis组与对照组相比，吸光度值具有统计学差异(P<0.05)，相同浓度Avastin组与Lucentis组吸光度值无统计学差异(P>0.05)； Transwell分析方法显示，各浓度Avastin组、Lucentis组与对照组相比，HUVEC迁移率具有统计学差异(P<0.05)，相同浓度Avastin组与Lucentis组HUVEC细胞迁移率无统计学差异(P>0.05)。

结论：Avastin与Lucentis均可以抑制HUVEC增殖和迁移； 随着药物浓度增加，对HUVEC增殖和迁移的抑制作用增强； 相同浓度Avastin与Lucentis在体外实验中对HUVEC增殖和迁移的抑制作用无统计学差异(P>0.05)。]]> 2013/6/3 10:33:26 212true 方法：健康家猫18只，于4周龄时随机建立正常、形觉剥夺性弱视及光学性斜视模型3组，每组动物各6只，分别在6周龄、10周龄和16周龄时记录各组动物的P波振幅和潜时。

结果：随年龄增长，正常组P波潜时缩短，振幅增大，双眼振幅大于单眼反应之和； 弱视组在10周龄时右眼振幅低于左眼，差异有统计学意义(P<0.05)，潜时无统计学差异； 16周龄时右眼(即弱视眼)振幅和潜时均低于左眼，双眼振幅表现为部分总和； 光学性斜视组单眼间的P波潜时和振幅相比较以及与正常组相比无明显差异，双眼总和在10周龄和16周龄时小于单眼反应之和。

结论：图形视觉诱发电位是评价动物双眼视觉的一种有效手段。]]> 2013/5/6 14:25:10 211true 方法：体外培养翼状胬肉患者成纤维细胞； 将不同浓度的ATRA作用于成纤维细胞分别达24，48h和72h后，MTT法检测ATRA对HPF的影响，免疫组织化学染色增生细胞核抗原(PCNA)检测细胞生长活性。

结果： MTT法显示10^-8mmol/L ATRA作用24h后能抑制HPF的增殖(P<0.05)，呈剂量和时间依赖性。ATRA能浓度依赖性地抑制细胞表达PCNA(P<0.05)。

结论：ATRA能够显著抑制HPF的增殖。]]> 2013/5/6 14:25:10 210true 方法：采用组织病理学技术(光、电镜)和原位末端转移酶标记(TUNEL)方法观察脑苷肌肽腹腔给药干预后视网膜组织形态、超微结构、感光细胞凋亡的变化。

结果：生后14d(P14)是rds鼠视网膜发育最完善阶段，随后28～56d，视网膜外核层及内核层细胞层数逐渐减少，感光细胞凋亡细胞数逐渐增多，电镜观察有凋亡核变化以及内节和纤毛崩解。给予CEGI治疗后28d和56d，视网膜细胞层数较同日龄对照组增厚，凋亡细胞数减少，有统计学差异(P<0.05)。神经生长因子(NGF)与CEGI作用相似。

结论：脑苷肌肽有促进视网膜细胞生长发育作用，对rds小鼠视网膜变性过程有一定的缓解作用。]]> 209true 方法：以鼠抗人CD1a单克隆抗体为一抗，采用免疫组化SP染色法检测31例Rb组织中树突状细胞的表达。

结果：在所有31例标本中，有23例经免疫组化染色后有CD1a⁺细胞的表达，即阳性率为74.2%。其中高分化为主型阳性率为77.8%(7/9)，未分化为主型阳性率为75%(15/20)，自发退变型为50%(1/2)。

结论： Rb组织中CD1a阳性细胞数量与肿瘤分型之间未见明显相关性，TIDC是否可看作一个良好的肿瘤预后指标，还有待进一步确证。]]> 208true PAX6基因沉默后人晶状体上皮细胞系(HLE-B3)增殖的改变。

方法：分别将4组PAX6 shRNA慢病毒载体及对照组慢病毒(pGCL-GFP-shRP1，2，3，4，NC)感染B3细胞； 感染96h后，利用Real-time PCR和Western-blot检测B3细胞PAX6表达以确定PAX6沉默； 选取有效沉默PAX6基因的pGCL-GFP-shRP4感染B3细胞，MOI=10，观察细胞数量变化。感染48h后采用流式细胞仪检测B3细胞凋亡情况。

结果：感染RNAi病毒组的B3细胞，随感染时间延长，细胞数量减少。流式细胞仪检测结果显示沉默PAX6 48h的B3细胞，G₁/G₀期前出现凋亡峰。

结论：慢病毒介导的RNA干扰能有效沉默B3细胞的PAX6表达； PAX6基因沉默后B3细胞凋亡。]]> 207true 方法：选择新鲜猪角膜，以13mm直径环钻制取角膜标本，依次放入4种冷冻保护液中冷平衡，“简化四步法”程序降温后放入液氮中保存，使用前40℃水浴复温。地塞米松作用组以同法制备植片，前三步冷平衡同前，最后分别放入含0.01，0.03，0.05mg/mL地塞米松保护液中4℃孵育18h，再程序降温液氮冻存。复温后用于锥兰-茜素红染色，观察内皮细胞存活情况。

结果：内皮细胞染色结果示：程序冻存组和地塞米松作用组的内皮细胞存活率均超过90%，差异比较无统计学意义(P>0.05)。

结论：在0.01～0.05mg/mL浓度范围内，未见地塞米松毒性作用，内皮细胞维持正常六角形形态，内皮细胞存活率超过90%。]]> 206true 方法：RF/6A细胞分4组培养(n=6/组)，对照组：DMEM培养基+100/L胎牛血清； 高糖组：对照组培养基添加40mmol/L葡萄糖； 姜黄素组：对照组培养基添加30μmol/L姜黄素； 姜黄素-高糖组：对照组培养基添加40mmol/L葡萄糖及30μmol/L姜黄素。分组培养5d后，显微镜观察各组细胞生长状态，噻唑蓝比色法(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)检测各组细胞活力，琼脂糖凝胶电泳检测DNA ladder判断凋亡，Western-blot检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)的表达。

结果：与对照组相比，高糖组RF/6A细胞生长状态较差，活力明显降低(P<0.01)，而姜黄素组及姜黄素-高糖组RF/6A活力无明显变化(P>0.05)。高糖组RF/6A出现明显的DNA ladder，对照组、姜黄素组以及姜黄素-高糖组未见明显DNA ladder。与对照组相比，高糖组TNF-α表达上调(P<0.01)，姜黄素组及姜黄素-高糖组TNF-α表达无明显变化(P>0.05)。

结论：姜黄素抑制高浓度葡萄糖诱导的RF/6A细胞凋亡、维持细胞活力，可能与姜黄素恢复高浓度葡萄糖诱导的TNF-α表达有关。]]> 205true 方法：采用ELISA和免疫组织化学法检测手机辐射后在MEM培养液培养28d晶状体中Bax的表达水平，裂隙灯下观察晶状体的混浊程度。

结果：手机辐射组Bax的表达量均显著高于对照组(P<0.05)，Bax的表达量随着手机辐射时间的增加而增加，且手机辐射组的晶状体混浊程度较对照组明显增加。

结论：手机微波辐射可增加体外大鼠晶状体中Bax的表达， 导致晶状体上皮细胞凋亡和白内障的发生。]]> 204true 方法：兔角膜组织匀浆经加热孵育和10%三氯乙酸去蛋白后离心，组织上清液经C₁₈-SPE柱固相萃取后检测。高效液相色谱柱选择ODS-BP色谱柱(5μm， 250mm×4.6mm ID)，以甲醇-纯水(体积比为2：3)为流动相，pH=7.0，流速：0.1mL/min； 荧光检测器激发波长425nm，发射波长525nm。

结果：核黄素在1.0×10^-6～1.0×10^-4mg/mL范围与峰面积呈现良好的线性关系(r²=0.999 584)，精密度结果显示：RSD=0.86%(n=10)，样品溶液在24h内稳定性RSD=0.51%，测得的角膜样品核黄素加标平均回收率为99.3%，RSD为3.7%。

结论：本实验中建立的样品前处理方法简单，HPLC方法专属性强、灵敏度高、准确性好，可作为紫外线A/核黄素角膜胶原交联法中角膜基质内核黄素含量测定的定量方法。]]> 203true 方法：应用5mm直径的加样器(末端附有棉片)吸入1mol/L NaOH接触新西兰兔右眼(20眼)中央角膜区烧灼30s，制作碱烧伤兔眼角膜NV模型。将实验兔随机分成2组，10眼(A组)碱烧伤后立即结膜下注射Avastin 2.5mg； 其余10眼为对照组(B组)，结膜下注射等量生理盐水。烧灼后次日每天裂隙灯观察角膜NV、角膜水肿情况，分别于3，7，14，21，28d裂隙灯照相并计算NV面积及NV抑制率。伤后7，28d各组随即处死5只实验兔，取角膜组织做石蜡切片行组织病理学检查及VEGF免疫组织化学检测。

结果：两组兔眼伤后第1d角膜缘血管网明显扩张充血，3d时血管开始侵入角膜，7～14d时NV达到高峰，14～21d后NV稳定并逐渐回退。两组角膜NV长度、NV面积及角膜水肿程度存在差异(P<0.05)； A组各时间点角膜NV抑制率为44.2%～55%。A组角膜上皮及实质层水肿较轻，NV较少，后弹力层基本完整，VEGF表达明显弱于B组。

结论：结膜下注射Avastin对碱烧伤诱导的兔眼角膜NV形成及生长具有明显的抑制作用，可能通过下调VEGF表达发挥作用。]]> 202true 方法：选择聚乳酸为原材料，经过加热塑形裁切得到泪道塞； 采取摘除主泪腺、摘除第三眼睑、摘除Harder氏腺，得到兔干眼动物模型； 观察植入泪道塞前后，泪液分泌试验、热原实验； 观察泪道塞组织相容性及降解时间。

结果：泪道塞植入后，能明显改善兔干眼模型泪液分泌试验观察指标，无热原反应，组织相容性佳，完全降解时间约为2mo。

结论：广泛用于生物医学领域的聚乳酸材料制备的可降解泪道塞对兔无毒害作用，具有极好的安全性及生物相容性，成本低，具有进一步研究价值及临床应用前景。]]> 2013/11/25 11:01:51 201true 方法： 取正常兔角膜、腋窝淋巴结组织； 鸵鸟-兔异种角膜移植术后1，2wk角膜组织，经甲醛固定，常规石蜡包埋切片脱蜡复水，胃酶消化法进行抗原修复，用鼠抗兔CD4，CD8单克隆抗体及荧光标记的羊抗鼠IgG进行免疫组化测定，荧光显微镜下观察角膜组织中CD4⁺，CD8⁺T淋巴细胞的表达。

结果： 鸵鸟-兔异种角膜移植后1wk角膜组织中CD4⁺，CD8⁺T淋巴细胞的表达为阴性，2wk时T淋巴细胞CD4呈强阳性表达，CD8呈阴性表达 。

结论：采用间接免疫荧光法测定动物异种角膜移植术后不同时间点局部角膜组织中CD4⁺，CD8⁺T淋巴细胞的表达，为异种角膜移植排斥反应机制研究及术后药物筛选奠定实验基础。]]> 2013/10/28 11:29:57 200true 方法：收集22例散发性RB患者新鲜肿瘤组织标本，应用PCR方法及引物MY09/11 检测肿瘤组织中HPV-DNA表达情况。

结果：选取22例RB肿瘤标本中7例HPV-DNA阳性(32%)，均为单眼散发患者(包括男4例，女3例)，2例双眼散发患者均为阴性。

结论： HPV可能是我国散发性RB发病因素之一，但其明确作用及机制尚待进一步研究。]]> 2013/10/28 11:29:57 199true +CD25⁺调节性T细胞在Graves眼病患者外周血中的表达，以观察该病患者外周血中CD4⁺CD25⁺调节性T细胞的变化规律。

方法：临床实验研究。采用流式细胞术检测对Graves病不伴有眼征患者组(53例)，Graves眼病患者组(51例)，正常对照组(51例)的外周静脉血CD4⁺CD25⁺Treg细胞比例进行检测。

结果：与正常对照组比较，Graves病不伴有眼征患者组Treg水平下降(P<0.01)； 与正常对照组比较，Graves眼病患者组外周血Treg水平显著下降(P<0.01)； Graves眼病患者组外周血Treg数量明显低于Graves病不伴有眼征患者组(P<0.01)。

结论：Graves眼病患者外周血中CD4⁺CD25⁺Treg在淋巴细胞中所占的比例降低，存在自身免疫调节紊乱。可能是其机体细胞免疫抑制受损的重要机制，为对该疾病进行免疫学治疗提供了新线索。]]> 2013/10/28 11:29:57 198true 方法：用培养的供体来源的imDC及IL-10-imDC预处理受体，建立Wistar-SD大鼠穿透性角膜移植模型。供体Wistar大鼠18只； 受体SD大鼠36只，受体鼠随机分为3组，每组均为12只。A组(对照组)：受体鼠不经任何预处理即行角膜移植术； B组：角膜移植前3d，每只受体鼠经尾静脉注射供体的imDC，细胞数为2×10⁶个； C组：角膜移植前3d，每只受体鼠经尾静脉注射用IL-10修饰的供体imDC，细胞数为2×10⁶个。观察术后各组受体角膜植片的存活时间； 术后第14d各组随机抽取4只鼠取术眼角膜行组织病理学检查及免疫组化法检测NF-κB的表达。

结果：三组植片存活时间分别为10.17±2.16，19.83±2.25，27.57±1.72d； 三组组间比较，差异均有显著性(P<0.01)。A组角膜植片显著水肿、增厚，出现大量的淋巴细胞和单核细胞浸润，角膜基质排列紊乱。B，C两组植片炎性细胞浸润均显著减少，角膜厚度及结构基本正常。NF-κB在A组即对照组中呈高表达(P<0.05)，B，C组间比较无显著性差异(P>0.05)。

结论：IL-10可有效抑制树突状细胞(dendritic cells，DC)成熟。摄取供体的imDC能显著延长角膜植片的存活时间。IL-10-imDC可抑制NF-κB的表达水平，从而抑制角膜排斥反应的发生。]]> 2013/9/23 14:08:04 197true 方法：采用电凝巩膜表面静脉法制作大鼠青光眼模型18眼，随机分为3组：A组分别隔日一次玻璃体腔注射1mg/0.1mL大麻素HU-211，B组隔日一次玻璃体腔注射0.1mL生理盐水，C组为高眼压组。随机选6只对侧眼为空白对照组，每日观察眼压变化情况，用药4wk后处死大鼠，视网膜冰冻切片，HE染色通过视网膜神经元的密度变化评估大鼠慢性高眼压模型视网膜神经元的损伤程度。

结果： B组的凋亡程度及RGC的损伤程度明显高于A组，差异有统计学意义(P<0.05)， B组与C组比较差异无统计学意义(P>0.05)。

结论： 玻璃体腔注射大麻素(HU-211)对大鼠青光眼模型视神经视网膜有明显的保护作用。]]> 2014/8/19 14:40:38 196true 方法：对13例16眼DR患者和15例15眼健康人，采用免疫组织化学法检测其玻璃体新生血管膜的VEGF及其受体(fms-样酪氨酸激酶， Flt-1和含激酶插入区受体， KDR)表达情况，同时采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测DR患者玻璃体中VEGF、Flt-1和KDR的浓度。

结果：免疫组织化学染色显示，DR患者玻璃体血管膜中VEGF、Flt-1和KDR高度表达，玻璃体中VEGF、Flt-1和KDR浓度明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)。

结论：VEGF及其受体Flt-1、KDR在DR患者玻璃体中高度表达，与DR患者的微血管生成关系密切，提示VEGF及其受体在DR的发生发展中起重要作用。]]> 2014/8/19 14:40:38 195true 方法：采用免疫组织化学法对52例儿童视神经胶质瘤手术切除标本中PDCD4和B7-H4的表达进行检测，评估PDCD4和B7-H4的表达与儿童视神经胶质瘤临床病理因素的关系。

结果：PDCD4在胶质瘤组织的阳性表达降低：52例胶质瘤组织中PDCD4表达阳性率随着肿瘤恶性程度增加呈降低趋势(P<0.01)； B7-H4在胶质瘤组织的阳性表达增高：B7-H4在52例胶质瘤组织中阳性率随着肿瘤恶性程度增加显著增高(P<0.01)； 脑胶质瘤中PDCD4与B7-H4表达负相关(P<0.01)。

结论：PDCD4和B7-H4与儿童视神经胶质瘤的恶性程度有关，对于儿童视神经胶质瘤的转移防治及预后具有一定的临床意义。]]> 2014/7/22 8:27:35 194true 方法：C57BL/6J小鼠30只，随机分为两组，每组15只，实验组每天下午4：00～5：00暗适应，5：00～6：00用LED白灯光照，光照强度为100lux，实验时间为1mo。 实验开始第1，3，7，14，30d测视网膜外核层(outer nuclear layer，ONL)厚度，内核层(inner nuclear layer，INL)厚度变化，组织学染色及视觉电生理变化。

结果：实验后1mo，实验组与对照组相比，Rod-R a波潜伏期延长，Cone-R b波振幅下降，b波潜伏期延长，与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。实验组与对照组在组织学染色上无明显差异，外核层厚度无明显变化，内核层厚度亦无明显变化。

结论：100lux低强度白光照射可引起暗适应后小鼠视网膜功能发生改变。]]> 2014/7/22 8:27:35 193true 方法：采用免疫组织化学SP法，检测VEGF、CD34、Ki-67和p21在62例翼状胬肉和对照组20例结膜组织中的表达情况，并分析其与胬肉临床病理特征的关系。

结果：(1)62例翼状胬肉组织中，VEGF、CD34、Ki-67和p21的阳性表达率分别为74.2%(46/62)，77.4%(48/62)，66.1%(41/62)，40.3%(25/62)，与对照组相比，差异均有统计学意义(P<0.05)；(2)在62例翼状胬肉组织中，VEGF、CD34的表达与临床分期及临床类型关系密切(P<0.05)，与患者性别、年龄、职业等无关(均为P>0.05)； Ki-67的表达与临床分期关系密切(P<0.05)，与其它临床病理指标无关(均为P>0.05)； p21的表达与临床分期、胬肉性质关系密切(P<0.05)，与其它临床病理指标无关(均为P>0.05)；(3)VEGF与Ki-67的表达呈正相关(r=0.279，P<0.05)； VEGF与CD34的表达呈正相关(r=0.299，P<0.05)； VEGF与p21表达呈负相关(r=-0.267，P<0.05)； Ki-67与CD34的表达无相关性(r=0.021，P>0.05)； Ki-67与p21的表达无相关性(r=-0.176，P>0.05)； CD34与p21的表达无相关性(r=-0.185，P>0.05)。

结论：(1)VEGF、CD34和Ki-67在翼状胬肉中高表达，p21在翼状胬肉中低表达，提示它们可能参与了翼状胬肉的发生发展过程；(2)VEGF、CD34在翼状胬肉中的阳性表达率随临床分期、临床类型的提高而上升，Ki-67在翼状胬肉中的阳性表达率随临床分期的提高而上升，p21在翼状胬肉的阳性表达率随临床分期、临床类型进展而降低，提示它们可能在翼状胬肉的发生发展及复发过程中发生了作用；(3)VEGF与Ki-67的表达呈正相关，VEGF与CD34的表达呈正相关，VEGF与p21的表达呈负相关，提示两两之间在翼状胬肉发生发展中具有协同作用。]]> 2014/6/19 9:55:00 192true 方法：采用免疫组化方法比较翼状胬肉和正常结膜组织中TGF-β1和HSP-47的表达差异。

结果：TGF-β1在翼状胬肉的鳞状上皮细胞中的表达水平明显高于正常结膜组织，在其基质层和内皮层有中等量表达，同时，在翼状胬肉纤维层的炎性细胞和血管内皮细胞中TGF-β1也有明显表达。与此相反，在正常结膜组织中TGF-β1表达较弱。HSP-47在翼状胬肉的固有层高表达，在上皮细胞表达较弱，在正常结膜组织中则未见明显表达。

结论：相比正常结膜组织，TGF-β1和HSP-47均在翼状胬肉组织中有较高水平的表达，因此推测二者在诱导翼状胬肉的发生、发展中起着重要的作用。]]> 2014/6/19 9:55:01 191true 方法：随机用Wistar大鼠30只作为供体，SD大鼠60只作为受体。建立角膜移植排斥反应动物模型。将SD大鼠随机分3组，各组分别使用不同保存方法的Wistar鼠眼为供体角膜。观察3组角膜移植术后排斥反应指数(RI)、植片存活时间(MST)和植片的病理变化。

结果： MST湿房保存组(Ⅰ组)为10.4±1.70d，中期保存液保存组(Ⅱ组)为12.9±1.81d，深低温保存组(Ⅲ组)为16.1±2.57d。Ⅲ组MST明显延长，与其他两组比较均有显著性(P<0.01)。角膜移植术后10d时HE 染色显示Ⅲ组炎性反应较Ⅰ组、Ⅱ组明显减轻。

结论：深低温保存的大鼠角膜移植术后排斥反应发生率降低，发生时间延迟。]]> 2014/5/22 9:13:01 190true 方法：新西兰白兔30只，随机分为3组，实验组、基质组和对照组，每组10只，术中去除角膜内皮细胞，建立角膜内皮衰竭动物模型，实验组和基质组行后板层角膜移植术，对照组仅去除角膜后板层组织，不进行移植。术后观察3mo，对三组角膜的水肿混浊程度和中央角膜厚度进行统计学分析。

结果：术后7d，实验组角膜水肿程度较基质组和对照组明显减轻，透明度增加。术后3mo时，实验组内皮细胞密度为2 026.4±129.3个/mm²，中央角膜厚度平均为505.2±25.4μm，基质组中央角膜厚度平均为1 535.6±114.5μm，而对照组为1 493.5±70.2μm。

结论：实验以异种脱细胞角膜基质为载体培养人脐静脉内皮细胞，行后板层角膜移植术，治疗角膜内皮衰竭取得了初步成功。移植的人脐静脉内皮细胞能够在活体上成活，并具有一定的角膜内皮细胞的生物学功能，维持角膜透明，为临床上治疗角膜内皮疾病提供了新的思路和方法。]]> 2014/5/22 9:13:01 189true 方法：采用14只新西兰大白兔，一侧鼻泪管制作成鼻泪管阻塞的模型，并行鼻泪道逆行置管术，常规光镜下观察术后2，4，6，8，10，12，14wk下段鼻泪管组织学变化。

结果：与对侧鼻泪道相比，泪道逆行置管术后的鼻泪管下段组织，在2，4wk可见炎性细胞，从术后12wk开始，鼻泪管组织切片中开始出现孤立性肉芽肿组织，术后12及14wk的切片中可观察到散在的肉芽肿样组织，从HE切片的对比发现，14wk肉芽肿的大小及其中类上皮细胞和成纤维细胞密度均较12wk要高。

结论：鼻泪道硅胶引流管可用于治疗鼻泪道阻塞，但如果留置时间过长(>12wk)会导致引流管留置区域肉芽肿的形成，进行性纤维化，并与周围组织产生粘连，可能引起鼻泪管的再次狭窄及阻塞，造成再次阻塞。]]> 2014/5/22 9:13:01 188true 方法：以pEGFP/Ang-1转染BMSCs，倒置荧光显微镜下观察增强型绿色荧光蛋白的表达，再利用Transwell模型，将转染的BMSCs与RF/6A共培养于高浓度葡萄糖培养基中。3d后MTT法检测RF/6A活力，Western blot检测磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B，P-PKB)的表达，从而探讨转染pEGFP/Ang-1的BMSCs对高浓度葡萄糖培养中的RF/6A的保护作用。

结果：成功转染pEGFP/Ang-1的BMSCs可见增强型绿色荧光蛋白表达，与转染pEGFP/Ang-1的BMSCs共培养的RF/6A细胞活力及P-PKB的表达均高于未转染组(均P<0.01)，与对照组无明显差别(均P>0.05)。

结论：质粒pEGFP/Ang-1转染的BMSCs对高糖环境中的RF/6A具有保护作用，其机制可能与P-PKB表达上调有关。]]> 2014/4/21 11:07:17 187true 方法：利用200μmol/L氯化钴(cobalt chloride， CoCl₂)建立体外RPE细胞的化学缺氧模型。不同浓度的Hsp90抑制剂17-AAG预处理RPE细胞1h后给予12h缺氧处理。实验分为缺氧对照组、二甲基亚砜(DMSO)对照组和17-AAG预处理组。其中17-AAG预处理组根据浓度不同又分为6组：0.01，0.10，0.50，1.00，5.00，10.00μmol/L。应用RT-PCR和Western blot 方法检测ILK表达变化情况。

结果：缺氧对照组、DMSO对照组和17-AAG预处理组ILK mRNA与内参β-actin mRNA光密度比值分别为1.32±0.04，1.29±0.03，0.93±0.06，0.70±0.05，0.53±0.03，0.44±0.04，0.32±0.04，0.30±0.03； ILK 蛋白与内参β-actin蛋白光密度比值分别为2.16±0.04，2.13±0.04，1.65±0.04，1.13±0.05，0.74±0.03，0.41±0.06，0.35±0.04，0.35±0.03。与缺氧对照组比较，17-AAG预处理组ILK mRNA和蛋白的表达明显降低(P<0.05)，呈浓度依赖性。

结论：Hsp90抑制剂17-AAG能够降低缺氧条件下RPE细胞ILK的表达。]]> 2014/4/21 11:07:17 186true 方法：将84只健康成年Wistar大鼠随即分为正常对照组和缺血再灌注后6，12，24，48h； 3，7d组，每组12只。采用升高眼内压的方法建立视网膜缺血再灌注模型，应用免疫组织化学法检测大鼠视网膜缺血再灌注损伤(retinal ischemia/reperfusion injury，RIRI)后视网膜组织VEGF和MMP-9表达的变化。

结果：正常对照组未见VEGF阳性表达，视网膜缺血再灌注后12h开始出现VEGF的表达，48h达到高峰，差异有统计学意义(P<0.01)。缺血再灌注后6h MMP-9的表达开始增加，24h后达到高峰。正常对照组几乎未检测到MMP-9的表达，差异有统计学意义(P<0.01)。经相关性分析发现，缺血组视网膜VEGF和MMP-9的表达呈正相关(r=0.834，P<0.05)。

结论：VEGF和MMP-9在视网膜缺血再灌注损伤中的表达呈正相关，两者可能协同作用，在视网膜缺血性病变的发生发展中起重要作用。]]> 2014/4/21 11:07:17 185true 7在体外培养大鼠视网膜毛细血管周细胞上的功能意义。

方法：利用显微镜下观察结合TUNEL计数法分别测定P2X₇激动剂BzATP和拮抗剂OxATP对体外培养的正常视网膜毛细血管周细胞以及糖尿病大鼠视网膜毛细血管周细胞存活率的影响。

结果：P2X₇受体激动后可介导视网膜毛细血管周细胞死亡，糖尿病大鼠视网膜毛细血管周细胞较正常视网膜毛细血管周细胞，在同等激动剂浓度下或在同样的时间点，能引起更多的细胞凋亡。而拮抗剂OxATP可以明显减轻BzATP对视网膜毛细血管周细胞的毒性作用，提高其存活率。

结论：P2X₇受体活性对视网膜毛细血管周细胞凋亡有一定调控作用。]]> 2014/3/24 14:01:48 184true 方法：成年雄性SD大鼠及RCD大鼠，各6只，分别进行红、白、绿及蓝色光的视网膜电图记录，刺激所用的红光波长为625nm，绿光波长为525nm，蓝光波长为470nm，白光为混合光。

结果：正常SD大鼠各颜色光ERG表现为短波长的绿光及蓝光刺激条件下波幅值较红光及白光高； 而RCD大鼠各颜色光暗适应ERG的b波波幅值无显著差别，但各颜色光的波幅值均小于SD大鼠； 而各颜色光明适应ERG均未记录到明显波形。

结论：大鼠对短波长的绿光及蓝光较为敏感，建议可使用蓝光或者绿光作为大鼠视网膜电图记录的刺激光源。RCD大鼠对各颜色光无特异性的反应，尚不能用颜色光视网膜电图作为其特异的诊断指标。]]> 2014/3/24 14:01:48 183true 方法：SD大鼠随机分为四组：正常对照组(NC)、正常波动组(NF)、糖尿病模型组(DM)和糖尿病波动组(DF)。首先腹腔注射STZ诱导糖尿病模型，成模后NF和DF两组大鼠每天3次腹腔注射一定量的葡萄糖造成血糖波动，每2wk进行一次全天血糖检测，根据血糖值绘制“时间-血糖浓度”曲线，观察血糖波动的情况。并计算平均血糖水平(MBG)、平均血糖水平标准差(SDBG)、最大血糖波动幅度(LAGE)和Sclichtkrull Mz值(M值)，从四个不同方面来评价血糖的稳定性。

结果： NC组大鼠全天血糖在正常范围内，平稳无波动，NF组大鼠血糖在5～10mmol/L范围内波动，DM和DF组大鼠血糖维持在较高水平(>20mmol/L)，DM组血糖波动不大，DF组血糖波动明显； NF和DF两组大鼠的血糖变化明显而且规律，波动曲线比较稳定。NF、DM与DF三组大鼠评价血糖稳定性的各项指标均较NC组有明显的增高，DF组升高更显著，多组及两组间比较差异均有统计学意义(P<0.01)。

结论：通过人为腹腔注射葡萄糖的方法能形成明显的血糖波动，可用来模拟糖尿病患者的血糖波动情形，此方法操作简单、损伤小、可重复性好，为在体研究血糖波动的损伤机制以及糖尿病并发症的发病机制提供了实验基础。]]> 2014/3/24 14:01:48 182true 方法：40只SD大鼠的40只角膜酸烧伤眼按随机数字法分成4组，每组10只，其中Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ组为治疗组，分别于角膜烧伤后0～3，3～7，7～21d使用地塞米松滴眼； Ⅳ组为空白对照组。于烧伤后使用裂隙灯显微镜动态观察角膜上皮缺损直径、角膜新生血管及角膜基质混浊程度并照相，并取角膜行HE染色观察角膜各层组织的形态学变化。

结果：最终角膜修复优良情况依次为Ⅲ组，Ⅰ组，Ⅳ组，Ⅱ组； 酸烧伤后各组角膜上皮愈合速度和新生血管面积不同，不同时期的实验组与对照组间的比较有统计学意义(P<0.01)。

结论：在酸烧伤后不同时期使用地塞米松，疗效存在差异。在急性期和修复晚期使用地塞米松能够促进角膜的修复，在修复早期使用地塞米松则会阻碍角膜的修复甚至可促使角膜溶解。]]> 2014/2/27 9:12:34 181true 方法：健康新西兰白兔13只26眼随机分组。9眼植入前表面乙烯基吡咯烷酮接枝修饰人工晶状体，8眼植入前表面二氧化钛修饰人工晶状体，9眼植入未修饰的疏水性丙烯酸酯人工晶状体。于术后90d摘除眼球并取出人工晶状体进行光镜分析。

结果：单面乙烯基吡咯烷酮接枝修饰后的人工晶状体表面黏附细胞数量和面积、蛋白膜的形成均低于对照组。

结论：疏水性人工晶状体经乙烯基吡咯烷酮接枝单面修饰后可明显提高人工晶状体的葡萄膜生物相容性。]]> 2014/2/27 9:12:34 180true 方法：将16只健康成年新西兰兔随机分成4组。1组为对照组，以空白溶剂作溶媒对照； 2，3，4组家兔左眼分别滴舒芬太尼注射液5μg(2滴，5min内)、7.5μg(3滴，10min内)、10μg(4滴，15min内)，同时各组右眼以9g/L NaCl溶液作为自身对照，滴速相同。滴药后的7d后进行局部毒性研究。

结果：肉眼及裂隙灯观察：各组角膜无混浊、结膜无明显充血和水肿、无分泌物、虹膜正常，无产生暂时闭目现象。内皮照相：各组的角膜内皮细胞计数无统计学差异； 光镜观察：结膜、角膜、角巩缘、虹膜、睫状体、视网膜及视神经均未发现有病理形态学损伤。

结论：单次使用5～10μg舒芬太尼眼部给药进行镇静、镇痛在短期内是安全的。]]> 2014/2/27 9:12:35 179true 方法：取第8代牛视网膜血管内皮细胞用于实验。实验组中加入含不同浓度葛根素的培养液，对照组加入不含药物、无生长因子及血清的培养液。培养48h后用Western blotting 法测各组细胞eNOS及ET-1的表达。

结果：与阴性对照组比较，葛根素组eNOS的相对表达量均升高(P<0.01)，且随着药物浓度的增加eNOS的表达也增加。葛根素组ET-1的相对表达量均降低(P<0.01)，且随着药物浓度的增加ET-1表达下降。

结论：葛根素通过上调 eNOS的表达，下调ET-1的表达，调节血管一氧化氮内皮素(NO/ET)的比值，从而发挥松弛视网膜血管平滑肌的作用。]]> 2014/1/20 9:29:54 178true 2O₃诱导ACC-2细胞凋亡中的作用。

方法：进行ACC-2细胞培养，将As₂O₃建立不同药物浓度梯度(0，1.0，2.0，4.0，8.0μmol/L)分别作用于ACC-2细胞，用Rh123染色，流式细胞仪检测8.0μmol/L As₂O₃作用前、后(24h)，ACC-2细胞的线粒体膜电位(△ψm)变化； 用多功能酶标仪进行Caspase 3活性检测。

结果：空白对照组ACC-2细胞内Rh123荧光强度最强，8.0μmol/L As₂O₃处理组ACC-2细胞内Rh123荧光强度减弱，其差异有显著性(P<0.05)； 随着As₂O₃药物浓度的增高(0， 1， 2， 4， 8μmol/L)，ACC-2细胞的Caspase 3酶活力单位逐渐增加。

结论：As₂O₃作用于ACC-2细胞，可通过降低线粒体膜电位从而引起细胞凋亡。随着As₂O₃药物浓度的增高，ACC-2细胞的Caspase 3酶活力单位逐渐增加，Caspase 3被激活，细胞可发生不可逆转的凋亡过程。]]> 2014/1/20 9:29:54 177true 方法：取3月龄及12月龄大鼠视网膜，制成半薄切片，透射电镜下观察视网膜色素上皮-光感受器细胞复合体超微结构的变化。

结果：12月龄大鼠视网膜中出现视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium， RPE)凋亡和RPE-光感受器细胞复合体的退行性改变。

结论：视网膜色素上皮-光感受器细胞复合体的退行性改变是视网膜衰老的早期表现。]]> 2014/1/20 9:29:54 176true 方法：设实验组10眼，对照组10眼，正常组20眼。实验组和对照组分别用浓度400μL/L(0.2mL)芥子气液和浓度200μL/L(0.2mL)芥子气液接触角膜4min，于1，2，3，4，5，6d； 1，2，3wk； 1，3mo行角膜白光及荧光照相，并测量角膜中央厚度。

结果：实验组的角膜上皮损伤面积1wk内由Ⅳ级减小为0级，第2，3wk； 1mo角膜上皮反复发生点片状剥脱。对照组的角膜上皮损伤面积3d内由Ⅲ级减小为0级，第2，3wk； 1mo角膜上皮仅发生针尖样的缺损。第3mo实验组和对照组角膜上皮均恢复光滑平面。角膜中央厚度第1～6d实验组明显高于对照组和正常组，差异有统计学意义(P<0.05)。第1wk～1mo实验组、对照组和正常组相比，差异无统计学意义。第3mo实验组、对照组高于正常组，但差异无统计学意义。

结论：不同浓度的芥子气液可致兔角膜上皮不同程度的损伤和角膜厚度变化，1wk内出现一过性角膜上皮层的重塑改变，1mo内完全恢复。3mo内角膜厚度基本恢复正常。]]> 2013/12/23 10:55:36 175true 方法：选择新西兰白兔10只，每只兔选取右眼进行超声乳化晶状体摘除术，对手术中的乳化功率、时间等参数进行统计。术后共随访3mo，观察术后并发症和后囊膜混浊的形成情况，按Odrich后囊膜混浊分级系统对术眼后囊膜混浊情况进行分级。

结果：10只兔中有1只术中发生后囊膜破裂，1只于术后1wk死亡，其余8例术后1mo开始出现后囊膜混浊，术后2mo，后囊膜混浊的范围扩大并快速发展，术后3mo，形成致密纤维化层。术后3mo表现为致密的纤维化层和较厚的纤维化层，可见明显的后囊膜混浊。

结论：利用兔眼透明晶状体行超声乳化手术可作为研究后囊膜混浊的理想动物模型，但要注意手术操作，防止并发症发生。]]> 2013/12/23 10:55:36 174true 方法：将80只Wistar大鼠分成3组：对照组(20只)，模型组(30只)，治疗组(30只)。模型组和治疗组用STZ诱导糖尿病，治疗组在大鼠饲料和饮水中添加2%丙酮酸。观察大鼠的血糖、体质量变化，并在造模后12wk观察3组大鼠视网膜组织中GSH-Px、MDA和Na⁺-K⁺-ATP酶水平及其超微结构改变。

结果：模型组和对照组相比，体质量显著下降，视网膜中GSH-Px和ATP酶活性显著下降，MDA水平显著升高，视网膜超微结构有显著改变； 治疗组和模型组相比，血糖没有显著改变，视网膜组织中GSH-Px和ATP水平升高，MDA水平下降，视网膜超微结构病变相对较轻。

结论：丙酮酸可以减轻氧化应激反应，改善视网膜的能量代谢，延缓视网膜病变的发展。]]> 2014/12/2 9:06:28 173true 方法：将新鲜人眼球提取的HRCECs进行体外培养，最终用于实验的为生长良好的第3～4代细胞，实验分为空白对照组、低糖对照组、高糖对照组，高糖+不同浓度(50μL/mL，100μL/mL，200μL/mL)薏苡仁油组。不同浓度的薏苡仁油对体外培养的HRCECs增殖的抑制作用是通过用噻唑蓝比色法(MTT)检测。各分组HRCECs中VEGF的表达由免疫细胞化学法检测。

结果：MTT比色法结果显示：不同浓度的薏苡仁油作用于体外培养的HRCECs 48h，其细胞增殖抑制与高糖对照组相比有显著性差异(P<0.05)。48h内呈浓度依赖性。而低糖对照组与高糖对照组差异无统计学差异(P>0.05)。免疫细胞化学检测法表明：用50，100，200μL/mL的薏苡仁油作用于高糖下HRCECs 48h，高糖+不同浓度薏苡仁油组与高糖对照组相比VEGF表达下降明显(P<0.05)，将高糖+不同浓度薏苡仁油组之间进行两两比较亦具有统计学意义(P<0.05)。且呈浓度依赖性。高糖对照组与低糖对照组相比，VEGF表达明显(P<0.05)。

结论：薏苡仁油可抑制高糖环境下HRCECs的增殖和VEGF的表达。]]> 2014/12/2 9:06:28 172true 方法：PCR扩增穿梭质粒PHMCMVTSHR289目的基因并连接于真核表达质粒pcDNA3.1+上，重组质粒pcDNA3.1+/ TSHR289采用酶切及测序法鉴定。阳离子脂质体包裹重组质粒pcDNA3.1+/TSHR289。

结果：重组质粒pcDNA3.1+/TSHR289用HindIII酶切后产物经0.8%琼脂糖凝胶电泳检测显示出现512bp条带。正向测序发现AAC突变为AAT，为同义突变。反向测序发现GCG突变为GCT，亦为同义突变。阳离子脂质体与重组质粒的体积质量比例为3：1。

结论：酶切及测序鉴定重组质粒pcDNA3.1+/TSHR289构建成功。]]> 2014/12/2 9:06:28 171true 方法：将双丹明目胶囊作用于DR大鼠，通过与正常组、模型对照组、阳性对照组的比较，观察双丹明目胶囊对DR大鼠视网膜和胰腺形态学的影响。

结果：经双丹明目胶囊治疗2mo后，双丹明目组大鼠血糖和糖化血红蛋白与模型对照组比较均明显降低，血糖差异有显著意义(P<0.01)。双丹明目组病变较模型对照组轻，光感受器细胞层排列基本整齐，各层组织细胞内、细胞外水肿现象较模型对照组轻，毛细血管管腔无闭塞，周细胞轻度水肿。

结论：双丹明目胶囊能有效降低DR大鼠血糖和糖化血红蛋白含量。双丹明目胶囊能有效改善DR大鼠视网膜和胰腺组织结构。]]> 2014/10/31 11:03:29 170true 方法：将30只3周龄的三色豚鼠用-10.00D硬性角膜接触镜(rigid gas permeable contact lens，RGP)对右眼进行离焦诱导，左眼不戴镜。3wk后散瞳检影观察屈光度变化； 电子透射显微镜观察视网膜超微结构特征； TUNEL免疫荧光染色检测视网膜细胞凋亡情况。

结果：右眼诱导前后屈光度差值为3.28±0.21D，左眼为1.55±0.23D，二者比较差异有显著统计学意义(P<0.01)； 电镜结果显示，3wk后诱导眼视网膜可见膜盘结构的水肿，部分脱落； 线粒体肿胀变形，部分空泡化； 内外核层细胞膜不规则收缩，核染色质不规则聚集等凋亡特征； TUNEL免疫荧光染色显示诱导眼视网膜细胞凋亡发生率为(2.42±1.24)%，对照眼为(0.29±0.08)%，二者比较差异有显著统计学意义(P<0.01)。

结论：在离焦诱导的豚鼠近视眼的形成过程中伴随着视网膜细胞的异常凋亡。]]> 2014/10/31 11:03:29 169true 2在视网膜中的表达，为阐明TGF-β₂在形觉剥夺性近视中的重要作用提供实验依据。

方法：用头套形觉剥夺右眼的方法诱导近视动物模型。实验前后检测豚鼠双眼屈光状态及眼轴长度。HE染色后观察后极部视网膜形态学改变，通过免疫组化对TGF-β₂在视网膜内表达进行定性及半定量测定。

结果：实验组视网膜变薄，且内核层的胞核层数较对照眼少，视网膜外核层细胞核变小、变圆，排列不均，视细胞层外节内节排列紊乱。免疫组化检查示实验组视网膜TGF-β₂表达明显下调。

结论：头套遮盖效果明显，是一种诱导形觉剥夺性近视简便、稳定的方法。形觉剥夺性近视眼的视网膜产生了一系列的退行性改变。TGF-β₂可能是最终导致形觉剥夺性近视形成的重要因素之一。]]> 2014/10/31 11:03:30 168true 方法：取青光眼滤过术中Tenon囊组织进行HTF体外培养。选取第3～6代细胞进行实验。设置空白对照组及TSA组(600nmol/L TSA加入培养液中)，分别于培养后1，2，3d应用 MTT法检测细胞活力变化； 以600nmol/L TSA处理HTF 2d后，Western blot法检测细胞中HDAC1和HDAC2蛋白的表达。

结果：与对照组比较，TSA作用1d后HTF活力下降，呈时间依赖性，具有统计学差异(P<0.05)。TSA处理HTF后2d，Western blot法检测HDAC1和HDAC2蛋白表达受到明显抑制。

结论：TSA可以通过抑制HDAC1和HDAC2的表达量，抑制人Tenon囊成纤维细胞增殖，从而减少术后结膜瘢痕形成可能。]]> 2014/10/31 11:03:30 167true 方法：选取35例翼状胬肉患者切除的翼状胬肉组织为实验组，同时选取10例正常人结膜组织为对照组，使用常规免疫组织荧光染色法对HIF-1α和 Pax6的表达进行检测并与染色进行对照。

结果：实验组35例组织中HIF-1α的阳性表达率为66%(23/35)，正常对照组10例组织中HIF-1α的阳性表达率仅为10%(1/10)，HIF-1α表达在正常球结膜与翼状胬肉两组间的表达有统计学差异(P<0.05)。正常人球结膜Pax6在组织各层细胞核内表达，而Pax6在翼状胬肉组织中表达下降甚至未见表达，两组比较有统计学差异(P<0.05)。

结论：HIF-1α在翼状胬肉中高表达，提示它可能参与了翼状胬肉的病理过程； Pax6基因在翼状胬肉上皮细胞中表达下调，提示翼状胬肉上皮细胞病理过程属于鳞状上皮化生类型。]]> 2014/10/31 11:03:30 166true 2O₂处理对晶状体上皮细胞HLE-B3miRNA表达谱的影响，初步明确miRNA在氧化损伤诱导晶状体细胞凋亡中的作用及机制。

方法：100μmol/L H₂O₂处理HLE-B3 24h后，收集细胞用Trizol法提取总RNA。使用芯片检测miRNA的表达，并且qRT-PCR对芯片结果进行验证。运用生物信息学方法预测差异miRNA调控的靶基因。

结果：HLE-B3细胞经H₂O₂处理后，28个miRNA表达发生明显变化(18个上调，10个下调)。差异miRNA可能通过调控BCL2L2和MIP的表达，参与了晶状体细胞凋亡，进而导致了白内障的发生发展。

结论：氧化损伤能够明显改变晶状体上皮细胞的miRNA表达谱，此变化可能在白内障的发生发展中起调节作用。]]> 2014/9/22 14:18:22 165true 方法：SD大鼠随机分为四组：对照组、糖尿病模型组、葛根素干预组及乙酰香草素组。腹腔注射STZ(65mg/kg)复制糖尿病大鼠模型，Western Blotting分析各组晶状体组织中氧化应激及细胞凋亡相关蛋白表达的变化。

结果：糖尿病大鼠模型复制成功，且大鼠晶状体组织中氧化应激蛋白分子p22、p47及p67表达上调(P<0.05)，细胞凋亡蛋白Bax及Caspase 3表达上调，Bcl2表达下调(P<0.05)。乙酰香草素和葛根素对上述异常具有显著的改善作用(P<0.05)。

结论：NADPH氧化酶介导的氧化应激及P53和Bax/Bcl2介导的细胞凋亡信号通路参与了糖尿病大鼠白内障的发病过程，且葛根素通过抑制上述氧化应激通路起到改善作用。]]> 2014/9/22 14:18:22 164true 方法：兔眼滤过术中结膜下注射TSA、丝裂霉素C(MMC)、PBS，分别于术后3，7，14，21，28d应用Krofeld评分评价滤过泡的形态变化。

结果：TSA组14d内滤过泡弥漫性隆起，28d囊性泡形成。术后14，21d TSA组滤过泡评分高于PBS组，具有统计学差异(P<0.05)。

结论：TSA能够抑制术后结膜瘢痕形成，延长滤过泡存在时间，保持滤过道通畅。]]> 2014/9/22 14:18:22 163true 方法：C57BL/6小鼠44只一侧眼用来诱导慢性高眼压。另一只眼作为对照眼。TONO-PEN AVIA眼压笔分别在激光光凝后1，2，4，8wk测量小鼠眼内压。裂隙灯显微镜观察小鼠眼球结构变化情况，分别于术后1，2，4，8wk摘除小鼠双侧眼球，进行冰冻切片，采用HE染色，光镜下观察视网膜情况。TUNEL计数视网膜切片的细胞凋亡。

结果：在1～8wk，实验眼的眼内压明显高于对照眼(P<0.05)，最高眼内压是31mmHg，只有1眼。眼压平均在20mmHg左右。在第2wk，内核层和视网膜神经节细胞层细胞数较对照眼轻度减少，在第4，8wk细胞数明显减少。

结论：角膜缘激光光凝能造成小鼠慢性眼内压升高，通过该方法可以建立研究青光眼视网膜神经节细胞损害的模型。]]> 2014/9/22 14:18:22 162true 方法：培养D407细胞，分别使用100、200、400μmol/L H₂O₂处理细胞24h后，Trizol试剂抽提细胞总RNA，使用Exiqon miRCURY LNA^TM microRNA表达谱芯片(miRBase 16.0数据库)检测不同浓度处理后D407细胞miRNA的表达差异，并将不同浓度处理后的变化进行聚类分析。使用Stem loop realtime PCR对芯片结果进行验证，并运用生物信息学方法预测差异miRNA调控的靶基因。

结果：芯片所包含的1 425个已知miRNA中，共有367个在不同浓度H₂O₂处理后表达发生变化。通过Treeview软件进行聚类分析发现miR-31等17个miRNA随H₂O₂浓度的升高呈现逐渐降低的趋势，miR-206等7个则逐渐升高。PCR验证显示芯片结果准确性较好。

结论：H₂O₂作用前后RPE的miRNA表达存在明显差异，miRNA作为转录后水平的调节分子，参与了细胞氧化应激反应，可能在AMD的发生发展中起有重要作用。]]> 2015/8/27 11:19:42 161true 方法：实验用健康成年新西兰兔20只，随机分为A组和B组，A组均单眼接受单次玻璃体腔注射1.25mg bevacizumab(1.25mg/0.05mL)，B组均单眼单次Tenon囊下灌注5mg bevacizumab(5mg/0.2mL)。1、3d后抽取玻璃体和血液，使用双抗体夹心Elisa检测玻璃体和血清中bevacizumab药物浓度，比较两组中玻璃体和血清内bevacizumab浓度差异，并通过激光共聚焦观察视网膜免疫荧光。

结果：给药1d后，A组和B组玻璃体腔内bevacizumab药物浓度分别为254.40±13.65、1.60±0.32μg/mL。A组和B组血清内bevacizumab药物浓度分别为0.55±0.15、0.63±0.05μg/mL，两组血清bevacizumab浓度比较差异无统计学意义(t=1.168，P=0.277)。给药3d后，A组和B组玻璃体腔内bevacizumab药物浓度分别为236.80±8.70、1.40±0.23μg/mL，A组和B组血清内bevacizumab药物浓度分别为0.66±0.17、0.64±0.14μg/mL，两组血清内bevacizumab浓度比较差异无统计学意义(t=0.207，P=0.841)，两种给药方式视网膜各层荧光分布均能明显显现。

结论：给药1、3d后玻璃体腔注药组在玻璃体腔内bevacizumab药物浓度要明显高于Tenon囊下灌注组，玻璃体腔内注射是较为有效的给药途径，而球后Tenon囊下灌注也能使bevacizumab进入玻璃体腔而且达到完全抑制VEGF活动所需的浓度(>500ng/mL)，并能至少持续3d以上，两种给药方法在血清中均能检测到较高浓度的bevacizumab，且两者浓度差异无统计学意义(P>0.05)，两种给药方式视网膜各层荧光分布均能明显显现，提示两种给药方式药物均能作用于视网膜各层。]]> 2015/8/27 11:19:42 160true 方法：收集2012-01/2014-12诊断为真菌性角膜炎的患者110例110眼，对真菌涂片、真菌培养及病理检查结果进行回顾性分析总结。真菌涂片行角膜刮片，用10%氢氧化钾制成湿片镜检，同时行革兰染色镜检； 真菌培养采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)培养； 病理检查的标本为角膜移植切除手术标本，采用石蜡切片，使用苏木素-伊红(HE)、六胺银、过碘酸-雪夫(PAS)染色镜检。

结果：真菌涂片阳性者50例(45.5%)； 真菌培养阳性者55例(50.0%)； 病理检查阳性者88例(80.0%)。真菌涂片与病理检查均为阳性者50例，真菌涂片与病理检查均阴性者22例，真菌涂片与病理检查的符合率为65.5%。真菌培养与病理检查均为阳性者55例，真菌培养与病理检查均阴性者22例，真菌培养与病理检查的符合率为70.0%。真菌涂片结果阴性者60例中，有38例经病理检查确诊为阳性，占63.3%； 真菌培养结果阴性者55例中，有33例经病理检查确诊为阳性，占60.0%。

结论：病理检查的敏感性最好，真菌涂片、真菌培养及病理检查联合应用能够提高真菌性角膜炎的诊断水平，降低漏诊、误诊。]]> 2015/8/5 15:43:41 159true 方法：取健康6～8wk Balb/c小鼠30只，随机分成正常对照组、光照组、α-倒捻子素组，每组10只。α-倒捻子素组小鼠每天接受α-倒捻子素30mg/(kg·d)灌胃7d，于灌胃给药第5d进行光损伤造模。对光照组和α-倒捻子素组小鼠采用5 000±200lx白色LED光连续照射1h。模型完成后72h记录各组小鼠闪光视网膜电图； 应用光镜观察各组小鼠视网膜形态学变化； 剥离视网膜，检测各组小鼠视网膜组织匀浆中丙二醛(MDA)含量。

结果：闪光视网膜电图(F-ERG)显示α-倒捻子素组视网膜功能损伤较光照组明显减轻(P<0.05)。光镜下，α-倒捻子素组视网膜结构损伤相较于光照组明显减轻(P<0.05)。相对于光照组，α-倒捻子素组视网膜组织MDA含量明显减少(P<0.05)。

结论：α-倒捻子素抑制光损伤引起的视网膜脂质过氧化，对小鼠视网膜光损伤起到保护作用。]]> 2015/7/1 9:46:01 158true 2O₂)诱导人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cells，RPE)氧化损伤的保护作用。

方法：人RPE细胞系传代培养，MTT检测细胞活力，流式细胞仪检测细胞凋亡率，透射电镜观察超微结构变化。

结果：MTT结果显示用10^-8mol/L和10^-4mol/L AST处理后，RPE细胞活性分别提高到53.66%±3.25%和70.43%±2.38%，与氧化损伤组(38.76%±3.74%)比较，差异具有统计学意义(P<0.05)； 流式细胞计数结果显示，预先给予10^-8mol/L和10^-4mol/L的AST作用后，RPE细胞凋亡率分别下降到30.23%±1.91%和12.58%±2.12%，与氧化损伤组(42.50%±1.94%)比较，差异具有统计学意义(P<0.05)。电镜观察结果显示，伴随AST作用浓度的增加，细胞形态亦逐渐得到改善。

结论：AST可以抑制H₂O₂诱导的人RPE细胞的凋亡，从而为寻求有效的防治视网膜损伤的药物提供可靠的实验依据。]]> 2015/7/1 9:46:01 157true 方法：采用不同方法取出四种晶状体囊或前囊组织，改良组织块法进行原代培养，并在倒置显微镜下观察四种LECs的形态学特征及变化。

结果：大鼠、兔、犬及人四种LECs均可采用改良组织块贴壁法进行原代培养。随着种属级别的升高，LECs贴壁能力逐渐增强，细胞由不规则的多角形向卵圆形发展、胞核渐渐圆润、胞浆越来越丰富，经多次传代后四种LECs均有向纤维化发展的趋势。

结论：成功改良了大鼠、兔、犬及人LECs的原代培养方法，在细胞及分子水平为白内障及其相关领域的研究提供了技术支撑。]]> 2015/7/1 9:46:01 156true 方法：用免疫组织化学SABC法分别检测39例Rb中MMP-2及EMMPRIN的表达； 用LEICA IM 50型全自动医学图像分析系统测量其平均灰度值，比较不同临床和病理阶段Rb中表达MMP-2和EMMPRIN的差异及二者阳性表达之间的关系。

结果：Rb患者39例中MMP-2阳性表达35例(灰度值为109.64±14.52)，占90%； EMMPRIN阳性表达33例(灰度值为108.01±13.60)，占85%； 青光眼期Rb中MMP-2和EMMPRIN的表达(灰度值分别为108.21±11.47，107.56±14.32)明显高于眼内期(灰度值分别为121.13±11.32，119.34±12.66； P<0.01，P<0.05)，眼外期二者表达(灰度值分别为91.03±11.71，92.26±12.93)明显高于青光眼期(P<0.01，P<0.05)； 视神经浸润组Rb中MMP-2和EMMPRIN的表达(灰度值分别为103.89±13.39，105.23±14.00)明显高于无视神经浸润组(灰度值分别为118.39±15.11，117.53±16.13； P<0.01，P<0.05)。

结论：MMP-2及EMMPRIN的表达水平可能与Rb的浸润转移有关。]]> 2015/7/1 9:46:01 155true 方法：选取2012-01/2014-10来我院治疗的糖尿病性白内障患者、年龄相关性白内障患者和外伤性白内障患者各20例，采用RT-PCR法检测各组患者晶状体上皮细胞中SIRT1基因含量，Western blot法检测晶状体上皮细胞中SIRT1蛋白含量，TUNEL法检测晶状体上皮细胞的凋亡率。

结果：RT-PCR检测结果显示，外伤性白内障患者组SIRT1 mRNA相对含量最高为1.000±0.078，其次为年龄相关性白内障患者组为0.427±0.067，糖尿病性白内障组为0.389±0.112，与外伤性白内障组比较，差异有统计学意义(P<0.05)； Western blot检测显示，外伤性白内障患者晶状体上皮细胞中SIRT1 蛋白的表达量最高，其次是年龄相关性白内障组，糖尿病性白内障组SIRT1蛋白的表达量最低； TUNEL法检测结果显示，外伤性白内障组和年龄相关性白内障组患者LECs细胞凋亡率分别为(4.5±2.3)%和(8.7±4.1)%，差异无统计学意义； 而糖尿病性白内障组LECs凋亡率为(24.3±6.1)%，与外伤性白内障组及年龄相关性白内障组比较差异有统计学意义(P<0.05)。

结论：糖尿病性白内障患者晶体上皮细胞中SIRT1基因及蛋白表达下降，提示该基因参与了糖尿病性白内障的发生，这为我们今后进一步的研究提供了可靠的理论依据。探索调节SIRT1基因在晶状体上皮细胞中表达的有效途径，将为糖尿病性白内障的早期干预治疗提供新的思路。]]> 2015/6/1 16:06:21 154true 方法：取健康清洁级兔的16对离体透明晶状体，将一对晶状体的任意一只为实验组，另一只为对照组，实验组为含浓度依次为5，10，15，20，25，30，35，40mmol/L CaCl₂的1640培养液，对照组含1 640培养液，观察培养36h后晶状体的混浊情况。取健康清洁级兔的24对离体透明晶状体，将一对晶状体的任意一只为实验组，另一只为对照组，实验组为含有CaCl₂(5～30mmmol/L)+E-64d的1 640培养液，对照组为含CaCl₂(5～30mmol/L)的1640培养液，检测两组晶状体的透明度及相对灰度值，用原子吸收分光光度计检测两组晶状体的钙离子(Ca²⁺)含量。采用SPSS 11.9统计学软件进行统计学分析，计量资料采用(-overx)±s表示，采用配对t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

结果：透明晶状体在含有氯化钙的培养液中发生混浊，且随着钙离子浓度的升高，晶状体的混浊程度也提高，当培养液中钙离子浓度为30mmol/L以上时，培养液中的晶状体下方的黑色十字线几乎不能透见，晶状体皮质几乎完全混浊； 含有钙蛋白酶抑制剂E-64d的实验组晶状体的混浊程度较对照组明显减轻，实验组与对照组晶状体灰度值比较，差异有显著统计学意义(t<=3.820，P=0.001<0.01)，但实验组与对照组晶状体钙离子含量比较，差异无统计学意义(t=2.144，P=0.055>0.05)。

结论：晶状体外的高钙环境可以诱导晶状体混浊； 钙蛋白酶抑制剂E-64d不能抑制晶状体对细胞外钙离子的摄入； 钙蛋白酶抑制剂E-64d对高钙诱导的晶状体混浊有保护作用，它可能是直接抑制了钙蛋白酶的活性，进而通过其他途径抑制晶状体蛋白变性或者上皮细胞凋亡及坏死，延缓白内障的发生。]]> 2015/6/1 0:00:00 153true 方法：分4组培养RGC，即(1)对照组，(2)激素组(0.1μmol/L可的松)，(3)激素-siNgR组(0.1μmol/L可的松+NgR反义核苷酸病毒)，(4)激素-scRNA对照组(0.1μmol/L可的松+阴性核苷酸病毒)。3d后四甲基噻唑蓝(Thiazolyl blue tetrazolium bromide，MTT)检测细胞活力变化，倒置显微镜观察细胞形态学变化，Hoechst 33342染色检测细胞凋亡，Western blot检测Nogo受体(Nogo receptor，NgR)表达。

结果：对照组、激素组、激素-scRNA组及激素-siNgR组细胞活力分别为(100.0±0.0)%，(76.3±6.8)%，(79.4±9.0)%及(96.7±9.8)%，与对照组相比，激素组及激素-scRNA组细胞活力明显降低，细胞密度降低，体积缩小，NgR表达增加(P<0.01)，而激素-siNgR组无明显变化(P>0.05)。Hoechst 33342染色显示，对照组及激素-siNgR组细胞淡蓝色，激素组及激素-scRNA组可见大量呈亮蓝色的凋亡细胞。

结论：糖皮质激素能通过NgR表达增加诱导RGC凋亡。]]> 2015/6/1 16:06:22 152true Acin1基因(apoptotic chromatin condensation inducer 1，凋亡染色体凝聚诱导1)表达的变化及差异，探讨先天性白内障小鼠与正常小鼠视网膜细胞凋亡的差异及晶状体与视网膜发育的联系。

方法：选取先天性白内障小鼠和正常C57BL/6小鼠各15只，其中雌性各10只，雄性各5只，两种小鼠各随机按1雄2雌合笼正常饲养，雌鼠受孕后单独饲养，待其分娩后将对应幼鼠分为先天性白内障组和正常对照组，各组于1，5，9，14，17，21，26，60d分别处理5只幼鼠，取左眼球4%中性甲醛固定行免疫组化检测ACIN1蛋白(ACINUS)表达，右眼取视网膜行PCR检测Acin1 mRNA表达。

结果：Acin1在两组幼鼠视网膜各日龄均有持续表达； 随着视网膜各层细胞的分化，ACIN1蛋白从神经节细胞层、内核层至外核层逐渐表达，以神经节细胞和内核层为主，神经母细胞层未见阳性表达，正常对照组P1～P14d ACIN1阳性细胞逐渐增多，P17d开始减少，P21d之后各层阳性细胞明显减少； 先天性白内障组整体变化趋势同正常对照组类似，P1～P14d阳性细胞数低于正常对照组，P17～P21d阳性细胞数持平且高于正常对照组； 同日龄两组比较，除P17，P26，P60d外，其余差异均有统计学意义(P<0.05)； 先天性白内障组内不同日龄总体比较差异有统计学意义(F_先白=295.07，P<0.01)，两两比较除P1与P5d，P17与P21d外其余各日龄间均有统计学意义(P<0.05)； 正常组内不同日龄总体比较差异有统计学意义(F_正常=214.21，P<0.01)，除P1与P5d外其余各日龄间两两比较均有统计学意义(P<0.05)； 先天性白内障组P17d表达量低于正常组P14d差异有统计学意义(P<0.05)。两组Acin1 mRNA变化趋势与蛋白相似，两组同日龄比较，除P17，P21，P60d外差异均有统计学意义(P<0.05)； 两组组内不同日龄总体比较差异均有统计学意义(F_先白=522.29，P<0.01； F_正常=472.05，P<0.01)； 两两比较先天性白内障组除P21与P26d外其余各日龄间均有统计学差异(P<0.05)，正常组各日龄间两两比较均有统计学差异(P<0.05)。

结论：小鼠视网膜发育过程中存在Acin1时间和空间的差异性表达，先天性白内障晶状体发育障碍可能会影响视网膜细胞Acin1的表达及视网膜细胞的凋亡及发育。]]> 2015/5/5 16:34:50 151true 方法：72只雄性SD大鼠，随机分为6组：正常2月对照组(C2m)，糖尿病2月组(D2m)，正常4月对照组(C4m)，糖尿病4月组(D4m)，正常6月对照组(C6m)，糖尿病6月组(D6m)，每组各12只。实验组给予一次性腹腔注射65mg/kg STZ建立糖尿病模型。ELISA法检测BIP、HIF-1α和VEGF表达水平，免疫组化法观察大鼠BIP、HIF-1α和VEGF视网膜内定位情况。

结果：BIP表达随DM病程的延长而增加(P<0.05)，且DM各组与对照组相比，其差异均有统计学意义(P<0.01)。HIF-1α在DM组中表达较对照组增加，其差异有统计学意义(P<0.05)，但DM组各组间差异无统计学意义。VEGF蛋白在D2m组与对照组间差别无统计学意义，但D4m、D6m与对照组间差别有统计学意义(P<0.05)，且D4m和D6m两组间差别有统计学意义。免疫组化：BIP在对照组视网膜神经节细胞层中少量表达，DM组主要分布于视网膜内核层和神经节细胞层； HIF-1α在对照组基本不表达，DM组各层均有表达； VEGF在对照组大鼠中视网膜各层中少量表达，而DM组大鼠的内核层、外核层及视网膜血管、神经节细胞层中VEGF阳性表达。

结论：糖尿病大鼠视网膜组织中的BIP、HIF-1α、VEGF均较对照组增加且随糖尿病病程进展而增加，内质网应激和低氧诱导因子途径均可能在糖尿病视网膜病变的进展中起重要作用。]]> 2015/5/5 16:34:51 150true 方法：制备SD大鼠补肾养血明目方含药血清及空白血清，通过CCK-8检测不同浓度(2.5%，5%，10%，20%，40%)血清对细胞活性的影响，预先加入1.25%，2.5%，5%等不同浓度的含药血清处理24h后，将终浓度为75μmol/L的丙烯醛加入对数生长期的ARPE-19细胞中处理24h， CCK-8法检测含药血清对细胞活力的影响，DAPI染色观察细胞核形态。

结果：CCK-8结果示：低浓度(2.5%，5%)血清对细胞活性影响不大(P>0.05)，高浓度(10%，20%，40%)血清降低细胞活性(P<0.05)，补肾养血明目方含药血清中、高剂量组细胞活性较空白血清组有统计学意义(P<0.05)；

结论：补肾养血明目方对丙烯醛诱导的ARPE-19细胞损伤有保护作用。]]> 2015/5/5 16:34:52 149true 方法：建立利用高脂联合高糖饲养C57BL/6小鼠的糖尿病模型，在成模2～12mo分别行1%虎红染色检查角膜上皮完整性； 角膜上皮刮除后，荧光素钠染色观察比较角膜上皮的愈合速度； 病理检测角膜的组织形态和结构的变化。

结果：高脂联合高糖饲养C57BL/6小鼠2mo左右逐渐表现出糖尿病多饮、多食、多尿、体质量下降等典型症状，其血糖稳定维持在较高水平(≥18mmol/L)，体质量较正常小鼠明显偏低。虎红染色发现，成模2mo的小鼠角膜即已出现点状着色，且随着病程的延长，染色面积和程度逐渐加重，到成模12mo几乎呈全角膜着色。在上皮愈合速度方面，刮除角膜上皮后，成模2mo的小鼠角膜上皮在40h即完全愈合(与正常小鼠相似)，成模3mo小鼠上皮愈合时间为120h，成模4，6，12mo上皮完全愈合的时间为144h左右，其中成模12mo的小鼠在96～120h上皮缺损的范围再次扩大，后逐渐缩小愈合，呈现反复现象。

结论：高脂联合高糖饲养诱导的糖尿病小鼠角膜，表现出角膜上皮损害，角膜上皮损伤后延迟愈合等症状，说明其可以作为研究糖尿病角膜病变的动物模型。]]> 2015/4/8 9:56:56 148true 方法：新西兰白兔32只随机分为四组：标准组、实验Ⅰ组、实验Ⅱ组和实验Ⅲ组，双眼均行标准小梁切除术。术中标准组于巩膜瓣下一次性应用0.3mg/mL丝裂霉素C棉片2min，其它3组术中分别于巩膜瓣下一次性应用0.3，0.4，0.5mg/mL苏拉明棉片2min。分别在术后第3，7，15，30d检查眼压、滤过泡情况，取滤过道附近组织分别行HE染色和免疫组化染色。

结果：术后第7，15，30d，四组眼压、功能性滤过泡、PCNA 染色阳性细胞核数比较，实验Ⅱ组和Ⅲ组与实验Ⅰ组和标准组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)； 实验Ⅰ组与标准组的差异均无统计学意义(P>0.05)。实验Ⅲ组的眼压和PCNA 染色阳性细胞核数与实验Ⅱ组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)； 实验Ⅲ组的功能性滤过泡与实验Ⅱ组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。实验Ⅱ组和实验Ⅲ组的滤过道均清晰可见，滤过道开放程度均高于标准组和实验I组。

结论：苏拉明的浓度对其在兔小梁切除术中的作用效果有显著影响。0.3mg/mL苏拉明的作用效果与MMC相当； 0.4，0.5mg/mL苏拉明的作用效果显著优于MMC； 0.5mg/mL苏拉明的降眼压和抑制成纤维细胞增殖的效果优于0.4mg/mL苏拉明。]]> 2015/4/8 9:56:56 147true 方法：取鼠龄7d(P7)的健康C57BL/6小鼠置于75%±2%氧气浓度的密闭氧舱中5d，鼠龄12d(P12)时返回正常空气环境以建立氧诱导鼠视网膜新生血管模型； 新生小鼠于P12～P16隔日给予玻璃体腔内注射0.5μL含有25ng(A组)，50ng(B组)，250ng(C组)可溶性EPO受体的PBS液以及不含EPO受体的PBS液(D组)。于P17时分批处死各组小鼠，小鼠眼球以4%多聚甲醛固定，制成病理切片，进行视网膜组织形态病理学观察计数突破内界膜新生血管细胞核数，了解视网膜新生血管增生程度。

结果：计数病理切片突破内界膜新生血管细胞核数目，各组玻璃体内EPO受体注射组较PBS注射组新生血管细胞核数明显减少，差异有统计学意义(P<0.01)。并且各不同浓度EPO受体组间新生血管细胞核计数差异亦有统计学意义(P<0.01)，随着EPO受体浓度增高，突破内界膜新生血管内皮细胞数减少。

结论：可溶性EPO受体玻璃体腔内注射能够阻断EPO的促新生血管生成作用，有望成为治疗眼部新生血管性疾病的新方法。]]> 2015/4/8 9:56:56 146true 方法：性成熟的健康雌性SD大鼠40只，随机分为研究组、对照组，每组20只，研究组切除双侧卵巢、低浓度萘长间隔给药，建立围绝经期ARC模型； 对照组常规饲养。以消减杂交改良法克隆MRG15，并对其cDNA片段应用地高辛标记制作探针。获取两组大鼠晶状体前囊膜切片后，再通过原位杂交法明确晶状体上皮细胞的表达差异。

结果：克隆出的MRG15通过BamH1和EcoR1酶切以及琼脂糖电泳，可获取长为639bp的cDNA片段。GeneBank对比显示，其同源性达到99.0%。原位杂交显示，ARC患者及正常晶状体上皮细胞内均可见MRG15表达。研究组阳性细胞百分率与对照组相较，有统计学差异(P<0.05)。研究组积分指数与对照组相较，有统计学差异(P<0.05)。

结论：MRG15在ARC和正常晶状体上皮细胞中均有表达，并且ARC较正常晶状体上皮细胞表达增高，这可能与MRG15对晶状体上皮细胞中一部分关键基因的转录产生抑制效应有关，通过降低晶状体上皮细胞的功能，使其出现衰老样改变，进而形成白内障，临床应对此进行更进一步的研究。]]> 2015/3/9 10:14:41 145true 方法：选取20例正常眼的结膜组织及翼状胬肉静止期和进行期各50例标本行苏木素-伊红(HE)染色、过碘酸雪夫(PAS)染色、免疫组化CD34、VEGF染色及免疫组化CD31染色联合PAS双重染色观察翼状胬肉新生血管和血管生成拟态情况。

结果： CD34和VEGF在翼状胬肉组织中的表达均高于正常结膜组织(两者P<0.05)，并且两者在进行期翼状胬肉组织中的表达均高于静止期(两者P<0.05)。PAS染色血管拟态区网眼间隔染成紫红色，进行期和静止期出现血管生成拟态的例数分别是38例和11例，差异具有统计学意义(P<0.05)，相关性分析显示血管生成拟态与进行期翼状胬肉呈显著密切正相关(Spearman's相关系数r=0.540>0.5，P=0.000)。

结论：翼状胬肉除了新生小血管形成增多外，血管生成拟态也是其血供方式之一，并且血管生成拟态与翼状胬肉的进展具有密切关系。]]> 2015/3/9 10:14:41 144true 方法：将双丹明目胶囊作用于糖尿病视网膜病变大鼠，通过与正常组、模型对照组、阳性对照组的比较，电镜下观察双丹明目胶囊对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜组织的影响，HE染色后光镜下观察视网膜结构，并采用免疫组织化学法检测大鼠视网膜中VEGF的表达。

结果：经双丹明目胶囊治疗2mo后，双丹明目组大鼠视网膜组织轻度水肿，毛细血管周细胞水肿，线粒体轻度肿胀，结构稍欠清晰，部分内皮细胞轻度增生。除正常组外各组视网膜VEGF表达增加，以模型对照组最为明显，且双丹明目组和阳性对照组与模型对照组VEGF的表达有明显差异(P<0.01)。

结论：双丹明目胶囊能有效地改善糖尿病大鼠视网膜微血管改变，减轻视网膜各层结构水肿、坏死情况，改善超微结构改变，可以抑制DR大鼠视网膜VEGF表达。]]> 2014/12/30 15:26:04 143true 方法：研究组为人热敏瞬时受体通道1基因通过脂质体介导的方法转染到体外培养的兔角膜内皮细胞中，采用MTT方法观察对细胞增殖的影响，免疫组织化学染色法和计算机图像分析系统检测对细胞增殖细胞核抗原(proliferation cell nucleus antigen，PCNA)表达的影响。

结果：热敏瞬时受体通道1基因转染后内皮细胞增殖增加，实验组与对照组比较差异有统计学意义(t=3.01，P=0.013)； 实验组细胞PCNA表达明显增加，与对照组比较差异有统计学意义(t=3.21，P=0.007)。

结论：人热敏瞬时受体通道1基因转染可以促进兔角膜内皮细胞增殖。]]> 2015/11/27 10:32:21 142true 方法：收集1995-06/2015-06青岛大学附属医院眼科病理室石蜡包埋标本，采用免疫组化法检测40例眼部B细胞非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma，NHL)、10例反应性淋巴组织增生组织中Livin和Caspase-3的表达情况，以患者的年龄、性别、发病部位、病理类型分级作为眼附属器淋巴瘤的分类标准。

结果：Livin及Caspase-3的表达与年龄、性别及发病部位无关，而与病理分级有关，Livin在淋巴瘤中的表达率显著高于反应性淋巴组织增生组织(P<0.05)，且随着病理分级恶性程度的增加其表达逐渐上升(P<0.05)； Caspase-3在淋巴瘤中的表达率则显著低于反应性淋巴组织增生(P<0.05)，且随病理分级的增加其表达逐渐降低(P<0.05)。在NHL中，Livin和Caspase-3两者的表达呈负相关(r=-0.491，χ²=7.519，P<0.05)。

结论：过量的Livin表达及Caspase-3的低表达可能与眼部淋巴瘤的发生有关，且在NHL中两者表现为负相关，联合检测两种蛋白对眼部B细胞淋巴瘤的临床表现及病理分型有重要意义。]]> 2015/11/27 10:32:21 141true 方法：SD大鼠36只随机分为对照组(A组，n=12)和造模组(n=24)，造模组注射链脲佐菌素(STZ)60mg/kg，造模成功后随即分为糖尿病组(B组，n=12)、复方血栓通干预组\〖C组，1g/(kg·d)，n=12\〗，于实验第6、12wk分别在各组处死6只大鼠，RT-PCR方法检测视网膜组织中CTGF mRNA水平。

结果：与A组相比，B组、C组大鼠视网膜CTGF mRNA于第6、12wk表达均增加(均P<0.05)，C组视网膜组织CTGF mRNA表达于第6、12wk均较B组明显下调(P<0.05)； 电镜显示B组大鼠视网膜毛细血管内皮细胞肿胀，胞质内线粒体肿胀，吞饮小泡增多，毛细血管基底膜电子密度不均匀，有结节样增厚现象，C组视网膜病变较B组减轻。

结论：CTGF可能参与糖尿病视网膜病变发生，复方血栓通对糖尿病大鼠视网膜具有保护作用，可能通过下调CTGF mRNA产生作用。]]> 2015/11/27 10:32:22 140true 方法：我们分别测量50只50眼昆明种小鼠在出生后第14、21、28、35和56d视网膜电图，分析比较各时间点Rod-ERG b波、Max-ERG a及b波、Cone-ERG的a及b波、OPs O1及O2波幅值及峰潜时、Flick-ERG幅值。

结果：Max-ERG a波峰潜时(各时间点95%可信区间依次为15.00～18.60、12.00～15.00、13.20～14.40、13.20～15.00、13.20～15.00ms)、OPs O1波峰潜时(各时间点95%可信区间依次为15.00～19.80、13.80～18.00、13.20～14.40、13.80～15.60、13.80～15.60ms)和Flick-ERG幅值(各时间点95%可信区间依次为0.97～3.28、0.85～2.32、0.91～3.49、0.94～2.68、0.98～3.69μV)在各周龄间无统计学差异(P>0.05)； Cone-ERG a波峰潜时(各时间点95%可信区间依次为25.20～55.20、27.00～40.20、27.00～38.40、25.20～43.80、23.40～37.80ms)在出生后14d和28d间存在统计学差异(P<0.05)、出生后14d与出生后21d、28d间Cone-ERG b波峰潜时(各时间点95%可信区间依次为70.80～88.20、56.40～78.60、60.00～75.60、60.60～87.00、62.40～81.60ms)均有统计学差异； 同时出生后第14d与其他时间点间Rod-ERG b波峰潜时(各时间点95%可信区间依次为87.00～114.00、53.40～73.80、52.2～63.6、55.20～71.40、57.60～67.80ms)及幅值(各时间点95%可信区间依次为64.21～195.07、133.79～355.71、130.62～355.96、190.92～448.97、239.26～462.40μV)、Max-ERG b波峰潜时(各时间点95%可信区间依次为67.20～107.40、32.40～54.60、31.20～36.60、31.80～42.00、34.20～41.40ms)及幅值(各时间点95%可信区间依次为160.64～344.48、281.74～590.09、284.91～716.80、358.64～737.55、406.98～810.55μV)、OPs O2波峰潜时(各时间点95%可信区间依次为49.8～69.6、29.40～42.60、28.80～33.60、28.80～37.80、31.20～37.20ms)和波幅值(各时间点95%可信区间依次为5.43～24.84、54.38～147.52、65.55～201.60、46.33～164.79、49.07～148.32μV)以及OPs O1(各时间点95%可信区间依次为11.60～21.36、6.77～53.71、32.96～76.42、34.06～70.37、35.58～63.35μV)和Cone-ERG b波幅值(各时间点95%可信区间依次为5.10～15.85、9.61～24.88、14.96～40.73、14.87～28.54、13.83～51.98μV)均存在统计学差异。OPs O1波在P14时即已存在，而有一只小鼠(1/10)OPs第二波群在第2wk时波形不明显。

结论：本实验结果在一定程度上证实了小鼠ERG中各波形的起源。由于小鼠ERG在发育过程中的变化，在测量小鼠ERG时应当考虑到小鼠发育阶段对结果的影响。]]> 2015/10/30 17:17:32 139true 方法：A组应用前房维持器联合前置镜装置完成眼前、后节联合手术，B组采用传统的眼前、后节联合手术。对比A组和B组手术时间、手术完成效果、术后并发症。

结果：前房维持器联合前置镜应用于兔眼前、后节联合手术，剥膜时间短(P<0.05)，手术效果及术后并发症较对照组差异无统计学意义(P>0.05)。

结论：前房维持器联合前置镜在兔眼前、后节手术具有操作简单、观察范围广、利于双手操作及术后并发症少等优点。]]> 2015/10/30 17:17:32 138true 3F₈)填充术后早期晶状体的损伤改变是否与氧化损伤有关。

方法：健康新西兰白兔45只分为三组：正常组、对照组和实验组。对照组行单纯玻璃体切除联合平衡盐溶液(BSS)填充术； 实验组行玻璃体切除联合非膨胀浓度C₃F₈填充术。在术后1、3、8、35、45d分别将三组兔眼晶状体取出制成组织匀浆，采用分光光度法分别检测T-SOD和MDA的含量。

结果：T-SOD活力：正常组最高，实验组最低，三组不同时期两两相互比较均有显著统计学差异(P<0.01)。MDA含量：正常组最低，实验组最高，三组不同时期两两相互比较除术后第1d实验组与对照组比较无显著统计学差异外，其余各组两两相互比较均有显著统计学差异(P<0.01)。

结论：兔眼玻璃体切除联合非膨胀浓度C₃F₈气体填充术后早期晶状体混浊可能与氧化损伤有关。]]> 2015/10/30 17:17:33 137true 方法：以pSilencer2.1-U6neo为质粒载体，构建HIF-1α.siRNA 重组质粒。选取雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠54只，随机分为正常对照组(15只)和实验组(39只)。实验组采用尾静脉注射链尿佐菌素(STZ)的方法建立糖尿病大鼠模型，造模成功后将实验组随机分为糖尿病组(15只)、基因治疗组(12只)和空载体组(12只)。正常对照组及糖尿病组大鼠均不做转染； 基因治疗组和空载体组分别转染HIF-1α.siRNA 重组质粒和pSilencer空载体质粒。行苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining，HE染色)观察视网膜组织形态，并采用免疫组织化学法检测VEGF蛋白的表达。分别于干扰后24、48、72h，1wk时计算VEGF蛋白的抑制效率。采用单因素方差分析和LSD-t检验进行统计学分析。

结果：HIF-1α.siRNA 重组质粒经酶切、测序鉴定，确定为目的序列。HE染色显示：正常对照组大鼠视网膜各层细胞排列整齐，细胞形态基本正常。糖尿病大鼠视网膜各层细胞排列紊乱，内界膜不完整，新生血管芽、新生血管簇呈垂直状突破内界膜生长。免疫组织化学染色显示：VEGF阳性表达为细胞浆出现棕黄色颗粒，主要位于神经节细胞层。正常对照组VEGF蛋白呈弱阳性表达，而DR对照组和空载体组表达明显增强，基因治疗组较DR组和空载体组表达明显减少，差异有统计学意义(P<0.05)。VEGF蛋白抑制率24、48、72h和1wk时分别为：27.4%、40.6%、47.5%、64.5%。

结论：HIF-1α.siRNA重组质粒能够抑制糖尿病大鼠视网膜中VEGF蛋白的表达，可能成为一种治疗糖尿病性新生血管疾病的新方法。]]> 2015/9/25 17:05:18 136true 方法：制备新西兰兔干眼动物模型，使用1g/L玻璃酸钠和3g/L玻璃酸钠滴滴液治疗，分别作为低浓度治疗组(B组)和高浓度治疗组(C组)，生理盐水治疗作为对照组(A组)。分别观察角膜荧光染色、泪液分泌试验、结膜杯状细胞及黏蛋白表达和组织学变化。

结果：治疗后D7和D14时，B组及C组角膜荧光染色评分低于A组(P<0.05)，泪液分泌、杯状细胞密度及黏蛋白含量高于A组(P<0.05)。C组角膜泪液分泌和杯状细胞密度高于B组(P<0.05)。与B组和C组相比较，A组角膜及结膜上皮细胞层变薄，角膜及结膜基质未见明显异常。

结论：玻璃酸钠能够改善干眼眼表损害，且高浓度治疗效果优于低浓度。]]> 2015/9/25 17:05:18 135true 方法：建立高糖诱导的HLECs模型，用不同浓度的银杏内酯B干预，MTT比色法检测细胞存活率，Hochest33258染色观察凋亡细胞形态，透射电镜观察细胞内超微结构变化，比色法检测凋亡相关因子Caspase-3及Caspase-9的表达。

结果：高浓度葡萄糖可抑制HLECs活性，诱导HLECs发生凋亡，引起细胞内Caspase-3及Caspase-9表达水平升高； 银杏内酯B能明显抑制高糖诱导的HLECs活力的下降，降低细胞凋亡率，减少高糖所致HLECs细胞内Caspase-3及Caspase-9的表达。

结论：银杏内酯B可能通过抑制Caspase-3及Caspase-9的表达而有效抑制了高糖诱导的HLECs凋亡。]]> 2016/6/29 17:05:28 134true 方法：将60只6～8周龄C57BL/6J小鼠分为正常对照组和碘酸钠组。碘酸钠组经鼠尾静脉注射碘酸钠(35mg/kg)，分别于注射后6h，1、3、5、8d进行眼底照相、OCT和电生理检测； 正常对照组注射同等剂量的生理盐水。所有小鼠摘除眼球制作石蜡切片进行HE染色。

结果：正常对照组小鼠视网膜呈淡红色，视盘呈黄色，视网膜血管呈放射状走行。鼠尾静脉注射碘酸钠后6h即可见到眼底黄白色类似玻璃膜疣样改变，但此时OCT和ERG尚无明显变化。注射后1d，眼底改变加重，类玻璃膜疣的改变逐渐增加，OCT可见RPE层色素紊乱，光感受器和外核层受损。注射后3d，视网膜损伤进一步加重，视网膜出现水肿，注射后5d水肿消失，视神经变白，眼底病灶进一步增多。注射后8d，RPE层、感光细胞层及外核层结构破坏明显，几乎没有正常结构。在此过程中，ERG表现为a波、b波振幅下降，并呈时间依赖性加重。HE染色结果显示，对照组小鼠视网膜各层细胞排列规则整齐，密度均匀。碘酸钠组小鼠外层视网膜呈波浪状改变，RPE层正常结构消失，可见黑色圆形沉积物，随时间延长，黑色沉积物逐渐增多，至注射后第8d时几乎没有正常RPE结构。

结论：碘酸钠经鼠尾静脉注射后，可以很好地模拟年龄相关性黄斑变性的发病过程，视网膜出现明显的形态和功能变化，为年龄相关性黄斑变性的研究提供一个较好的动物模型。]]> 2016/5/31 16:15:54 133true 方法：将15只野生型(WT)小鼠作为对照组，10只Eaf2基因敲除(Eaf2 KO)小鼠作为实验组。两组均取14周龄左右的小鼠作为研究对象。进一步分组为：WT-nonUV、WT-UV、Eaf2 KO-nonUV、Eaf2 KO-UV，共4组。使用裂隙灯显微镜观察小鼠白内障程度，利用晶状体混浊分类系统Ⅱ(LOCSⅡ)对小鼠白内障进行分级。然后断颈处死小鼠，摘取晶状体进行暗视野显微镜照相，利用Image J软件对晶状体混浊程度进行分析，并将各测量结果进行统计学处理。

结果：裂隙灯显微镜和暗视野显微镜的结果一致：WT-UV组及Eaf2 KO-UV组晶状体混浊程度明显高于WT-nonUV组及Eaf2 KO-nonUV组，其中WT-UV组明显高于Eaf2 KO-UV组，均具有统计学差异(P<0.05)。

结论：紫外线辐射能够导致小鼠白内障的形成，Eaf2蛋白质具有促进紫外线所致的小鼠白内障形成的作用。]]> 2016/2/3 8:48:35 132true 方法：将24只家兔按照随机等分的方法分为3组，即姜黄素干预青光眼模型组(姜黄素组)、未给予姜黄素干预的青光眼模型组(青光眼组)和不经任何干预措施的正常对照组(正常组)。应用前房灌注升高眼压的方法给姜黄素组和青光眼组的家兔建立急性高眼压模型，急性高眼压模型造模成功后，给予姜黄素组家兔玻璃体腔注射比例浓度为0.1mg/0.1mL的姜黄素，青光眼组家兔玻璃体腔注射相同体积的生理盐水，每天注射1次，共7d。正常对照组不做上述任何处理直接取眼球。实验完成后，通过免疫组织化学法检测三组家兔眼球视网膜神经节细胞Thy-1的表达并计数。

结果：姜黄素组和正常组的视网膜神经节细胞Thy-1表达之间差异无统计学意义(P>0.05)； 青光眼组和正常组的视网膜神经节细胞Thy-1表达差异有显著统计学意义(P<0.01)。姜黄素组、正常组和青光眼组的视网膜神经节细胞密度分别为20.3±2.7、21.5±1.8和15.1±2.3个/高倍视野。

结论：在姜黄素作用的急性高眼压模型家兔的实验中，姜黄素可以通过提高视网膜神经节细胞的Thy-1的表达，表明其在一定程度上能够降低急性高眼压状态下家兔视网膜神经节细胞的损伤，推测姜黄素可能对视网膜在特定情况下具有一定的保护作用。]]> 2016/2/3 8:48:35 131true 方法：采用双极电凝器电凝巩膜表面3组静脉，建立慢性高眼压大鼠模型，分为3组。一组为高眼压模型组，一组为大黄酚低剂量组(25mg/kg)，一组为大黄酚高剂量组(50mg/kg)，每组各15只，右眼为实验眼，左眼为正常对照眼。连续给药6wk后处死大鼠并摘取眼球，PCR和Western-blot检测PERK和ROCK-1在视网膜中的表达。

结果：大黄酚高、低剂量组能有效降低大鼠眼内压，与模型眼相比有显著统计学差异(P<0.01)。正常对照视网膜p-PERK蛋白水平表达比较低，青光眼模型组表达显著升高，高、低剂量大黄酚使其表达增高。ROCK-1在视网膜中的表达在青光眼模型组表达最高，各治疗组均可使其表达下降，以高剂量组下降最显著。RT-PCR结果表明，高剂量组大鼠视网膜PERK mRNA水平明显高于模型对照眼； ROCK-1 mRNA水平则显著降低。

结论：高剂量大黄酚能有效降低青光眼大鼠的眼内压，其作用机制可能是通过激活PERK蛋白磷酸化以调控PERK/ROCK信号转导而发挥其保护作用。]]> 2015/12/28 16:15:58 130true 2O₂)作用的人视网膜色素上皮株ARPE-19细胞的细胞形态、增殖以及凋亡的影响。

方法：常规培养ARPE-19细胞，分为正常对照组、75μmol/L H₂O₂及150ng/mL BMP-6、75μmol/L H₂O₂+150ng/mL BMP-6环境中培养3、6、9、12h后，MTT比色法检测细胞的活性； 流式细胞仪检测细胞的周期及凋亡变化。

结果：H₂O₂作用组的细胞活性随着作用时间的延长逐步降低； 而BMP-6+H₂O₂组的细胞活性则较H₂O₂组高，在3h及6h时两组相比差异有统计学意义(P<0.05)； 细胞形态观察发现：H₂O₂培养6h后，细胞数量减少，细胞发生脱落，而添加BMP-6后细胞脱落及凋亡均要明显减少。

结论：BMP-6可以一定程度上保护视网膜色素上皮受到氧化应激的损伤。]]> 2015/12/28 16:15:58 129true 方法：将前期实验证实视网膜病变严重程度有明显差异的两组(B组>A组)各12只新生幼鼠于出生后第7d置于75%浓度氧环境中，第12d时返回正常空气环境中饲养。第17d时将A组和B组的幼鼠均随机分配，分别进行FFA检查或高分子量FITC-Dextran灌注结合视网膜铺片检查，即每种检查方法纳入两组幼鼠各6只，利用图像分析软件对视网膜无灌注区进行定量分析和比较。

结果：FFA结合图像分析软件能对视网膜无灌注区进行定量分析，与FITC-Dextran灌注结合视网膜铺片的测量结果有良好的可比性，两种方法得到的结果无统计学差异(P>0.05)。

结论：FFA结合图像定量分析在小鼠OIR模型的血管病变评价中具有一定的实用价值。]]> 2015/12/28 16:15:59 128true 方法：本研究的数据是从美国生物技术信息中心GEO基因表达数据库获得。利用美国昂飞公司Expression Console软件对原始的CEL数据进行标准化及对数化转换处理。利用以t检验为基础的基因表达差异显著性分析方法SAM对基因芯片数据进行显著性差异分析，分析后筛选显著性差异表达基因，采用GNRInfer软件构建了小鼠视乳头及视网膜前50个有显著差异表达基因的调控网络，同时我们利用MAS3.0分子注释系统软件及DAVID软件这两种在线分析平台中进一步富集基因信号通路。

结果：青光眼各组视乳头和视网膜及其相对应组的显著性差异基因分析表明，在青光眼早期视乳头组及视网膜组较之正常组相比视乳头组显著性差异基因数量明显增多，青光眼视乳头及视网膜网络构建显示，视乳头基因网络中主要调控节点基因包括Unc13c、Kif5a、TRPM1、PANX； 视网膜基因网络中主要调控节点基因包括POU4F1、NEFL、BC03870、CALB2。MAS在线信号通路分析显示，视乳头组织中主要的信号代谢通路包括肌萎缩侧索硬化代谢通路、神经退行性紊乱、白细胞穿内皮性迁移及前列腺癌信号通路。视网膜组织主要代谢通路包括肌萎缩侧索硬化代谢、酪氨酸代谢、黑色素生成、氮代谢、缝隙连接、白细胞穿内皮迁移。

结论：早期青光眼阶段视乳头较视网膜对眼压更为敏感，特别是Tyrp1基因在早期高眼压的表达能否作为青光眼早期生物学指标有待进一步探讨。在青光眼高眼压压力下，节点分子生物学功能显示在视乳头组织中，细胞骨架的重排、生物驱动马达动力、物质代谢及运输力均为增强； 而在视网膜组织中，最突出的表现在细胞的再生、分化及修复作用，此结果提示我们在青光眼的研究中应重视哺乳动物视网膜损伤后自身修复的研究。代谢通路富集分析显示，炎性反应在视乳头及视网膜的病理反应中均起到非常重要的作用，而在视乳头中由于其狭窄而拥挤的解剖结构在青光眼发病中存在营养代谢及物质转运障碍。]]> 2016/10/25 14:35:36 127true 方法：选取50只兔，随机分为两组，每组25只，即实验组和对照组，并建立兔角膜碱烧伤模型。实验组在角膜碱烧伤后当天行结膜瓣遮盖术。裂隙灯下观察两组角膜病损恢复情况并照相。采用苏木素-伊红(HE)染色切片后测定两组角膜碱烧伤后不同时间点PMNs的浸润量值。

结果：PMNs在角膜碱烧伤后的3d开始升高，大量浸润角膜，7d略有下降，14d上升达到最大峰值，之后逐渐降低，早期分布在烧伤部位角膜基质内，后期则与溃疡浸润面积相一致。实验组PMNs的计数均明显低于对照组，且角膜碱烧伤后的3、14和21d的差异有统计学意义(P<0.05)。

结论：结膜瓣遮盖治疗重度角膜碱烧伤的疗效确切，角膜的病理损伤和修复与PMNs的浸润密切相关。]]> 2016/9/19 17:26:48 126true 方法：将40只80眼雄性SD大鼠随机分成6组，分别为：A组(空白组)、B组(模型组)、C组(青光安Ⅱ号方低剂量组)、D组(青光安Ⅱ号方中剂量组)、E组(青光安Ⅱ号方高剂量组)、F组(益脉康分散片组)。将B、C、D、E、F五组实验大鼠采用烧灼巩膜表浅静脉法建立大鼠慢性高眼压模型，术后监测眼压，使眼压维持在25mmHg以上持续2mo视为慢性高眼压造模成功。动物维持高眼压状态2mo后开始灌胃，灌胃后2、4wk分别处死，qPCR检测PAX6、Ngn1、Ngn2 mRNA的相对表达量。

结果：PCR结果显示：SD大鼠慢性高眼压模型成模灌胃2wk后，各组PAX6、Ngn1、Ngn2 mRNA表达量与B组比较，差异有统计学意义(P<0.05)； C、D、E、F组组间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。SD大鼠慢性高眼压模型成模灌胃4wk后，C、D、E组与F组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。C、D组与E组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。C组与D组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

结论：青光安Ⅱ号方及益脉康分散片均能增加PAX6、Ngn1、Ngn2 mRNA的相对表达量，对慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞有一定的保护作用； 在对慢性高眼压大鼠视神经的保护中，青光安Ⅱ号方高剂量灌胃后4wk时效果最优。]]> 2017/8/22 10:31:08 125true 方法：建立兔青光眼缺血再灌注模型，72只新西兰大白兔随机分为神经生长因子组(A组)、银杏叶提取物组(B组)和联合用药组(C组)。分别在持续给药1、7、14d，光镜下观察视网膜各层组织形态学改变，测定视网膜组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、一氧化氮(nitric oxide，NO)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)浓度变化。

结果：在持续给药1、7、14d，银杏叶提取物组、神经生长因子组的MDA含量和NO含量均高于联合用药组(P<0.05)； 各时间点，银杏叶提取物组、神经生长子组的SOD含量均低于联合用药组(P<0.05)。HE染色视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells，RGCs)计数结果显示，联合用药组RGCs的丢失较其他组明显减少，各时间点银杏叶提取物组、神经生长因子组的RGCs计数均低于联合用药组(P<0.05)。

结论：神经生长因子联合银杏叶提取物对RIR损伤具有更好更持久的保护作用，机制可能与其降低自由基的大量产生，以及其增加视网膜组织中SOD含量和活性有关。]]> 2017/8/22 10:31:08 124true 方法：体外培养HTFs并通过vimentin免疫荧光染色技术及细胞形态特征观察鉴定细胞； 将HTFs分为实验组(80mmol/L LiCl处理48h)和对照组(未用药)。用实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction， Real time-qPCR)检测两组细胞内TGF-β及CTGF基因的表达，Western blot检测两组细胞内TGF-β及CTGF蛋白的表达。

结果：体外培养的HTFs能够表达TGF-β及CTGF。与对照组比较，实验组中TGF-β、CTGF基因表达下降，差异均具有统计学意义(t=20.042、14.995，P<0.05)； 与对照组比较，实验组中TGF-β、CTGF蛋白表达下降，差异均具有统计学意义(t=46.058、12.452， P<0.05)。

结论：体外培养的HTFs在基因和蛋白水平表达TGF-β及CTGF，LiCl能够抑制该过程，其可能通过该机制抑制HTFs增殖，此研究为LiCl用于青光眼滤过术后瘢痕化调控提供了实验依据。]]> 2017/8/22 10:31:08 123true 方法：采用不同浓度HQ诱导体外培养ARPE-19细胞氧化损伤，确定最佳造模浓度； 制备补肾养血明目方含药肠吸收液。采用CCK-8法检测补肾养血明目方含药肠吸收液对ARPE-19细胞活力的影响，TUNEL技术观察其对细胞凋亡的保护作用，以及化学比色法检测细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)的活性。

结果：当HQ浓度达到90μmol/L以上时，ARPE-19细胞活性明显降低。相较于模型组，预防给药时，浓度1%和2%补肾养血明目方含药肠吸收液对HQ损伤具有有显著保护作用(均P<0.01)，0.5%和5%含药肠吸收液对HQ损伤有一定保护作用(均P<0.05)； 治疗给药时，1%和2%含药肠吸收液对HQ损伤有一定保护作用(均P<0.05)。与模型组相比，预防组的细胞凋亡率显著下降(P<0.01)，治疗组的细胞凋亡率有一定下降(P<0.05)。抗氧化酶检测结果显示与模型组相比，预防组和治疗组均能明显提高SOD和GSH-Px含量(均P<0.05)，其中预防组的作用更为显著(P<0.01，P<0.05)。

结论：补肾养血明目方对HQ诱导的ARPE-19细胞氧化损伤有保护作用，其作用机制可能与增加细胞内抗氧化酶的含量有关。]]> 2017/7/24 10:38:38 122true 方法：用1.5ng/mL IL-1β模拟角膜基质细胞炎性环境，不同浓度雌激素(0，10^-10，10^-8，10^-6，10^-4mol/L的17-β雌二醇)体外作用于人角膜基质细胞，四甲基偶氮唑(MTT)比色法鉴定细胞活性。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组细胞上清中MMP-2、TIMP-2及TGF-β1蛋白的表达量。

结果：不同浓度雌激素(E2)对角膜基质细胞的活性没有影响。E2处理组的MMP-2、TIMP-2及TGF-β1表达量与对照组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。E2处理组与对照组相比，雌激素处理使MMP-2及TGF-β1的表达明显减少，而TIMP-2的表达则显著增多。

结论：雌激素能一定程度抑制MMP-2及TGF-β1的表达，同时促进TIMP-2的表达，这可能对正常人角膜起保护作用。]]> 2017/6/26 10:38:49 121true 方法：SD大鼠60只，随机分为3组(每组20只)：对照组、低剂量组和高剂量组，各组分别应用微量注射器行大鼠眼球玻璃体腔内注射，剂量均为0.3μL，对照组给予9g/L生理盐水、低剂量组给予浓度0.5mg/kg衣霉素、高剂量组给予浓度1.5mg/kg衣霉素进行玻璃体腔内注射。在造模后每天散瞳观察眼底，第1、7、14d 通过OCT、眼底照相、眼底荧光、视网膜电图及HE染色观察不同浓度下视网膜各层形态学变化。

结果：OCT结果提示衣霉素对视网膜形态及结构有损伤作用，呈现出时间-剂量依赖性； 眼底照相结果提示在衣霉素注射2wk后，随着衣霉素浓度的变化，视网膜周边及黄斑区颜色逐渐苍白，视盘区水肿，高剂量组出现视网膜血管变细，视神经萎缩； 荧光素造影结果提示：衣霉素注射玻璃体腔2wk后，视网膜血管功能损伤，逐渐出现周边至中央部血管造影剂渗漏； 电生理表明，衣霉素诱导的视网膜电图紊乱，a波、b波逐渐地振幅降低，甚至变平，具有明显的统计学意义(P<0.05)； 石蜡切片HE染色结果提示衣霉素对视网膜各层的损伤呈现剂量-时间依赖性，与OCT结果相一致。

结论：衣霉素可以通过诱导视网膜损伤模拟视网膜疾病模型，OCT可以动态观察视网膜的损伤改变，作为一种非侵入性检查手段对于评价视网膜损伤具有一定积极意义。]]> 2017/6/26 10:38:49 120true 方法：将色素兔26只采用抽签法随机分为正常对照组2只、常规光凝组6只和阈下微脉冲光凝组18只。正常对照组不做任何处理，常规光凝组行577nm激光光凝，阈下微脉冲光凝组又亚分为三个亚组，分别行9%、12%、15%工作负载率的577nm阈下微脉冲激光光凝。采用免疫组织化学法检测各组兔眼视网膜上MMP-9的表达情况。

结果：常规光凝组：RPE层及视细胞层MMP-9呈强阳性表达，较阈下微脉冲组明显增多，差异有统计学意义(P<0.05)； 阈下微脉冲组：9%工作负载率见RPE层及视细胞层MMP-9少许阳性表达，12%工作负载率见RPE层及视细胞层阳性表达增多、胞核也出现少许阳性表达，15%工作负载率RPE层及视细胞层中度阳性表达，三个亚组间差异无统计学意义(P>0.05)。

结论：577nm阈下微脉冲光凝在9%、12%、15%工作负载率下对视网膜色素上皮层具有高度选择性，对视网膜神经纤维层无明显损伤，较常规577nm激光光凝更加安全。]]> 2017/6/26 10:38:49 119true 方法： 雄性BN大鼠30只，右眼眼底采用激光光凝建立CNV模型，按随机数字表法分为三组：单次给药组、重复给药组及生理盐水对照组。光凝后21d，单次给药组玻璃体腔内注射Ad-Es 0.01mL； 重复给药组玻璃体腔内注射Ad-Es 0.01mL，并于1wk后重复给药； 生理盐水对照组玻璃体腔内注射生理盐水0.01mL。观察各组末次给药后7d荧光眼底血管造影荧光素渗漏情况，应用激光共焦显微镜下脉络膜血管平铺法测量各组CNV面积，光镜下观察组织细胞学变化，免疫组织化学检测CNV组织中CD105的表达。

结果：FFA造影显示给药组渗漏发生率明显低于生理盐水对照组，重复给药组渗漏发生率低于单次给药组，差异均有统计学意义(P<0.05)； 激光共焦显微镜下CNV定量分析显示给药组CNV面积显著低于对照组，重复给药组CNV面积低于单次给药组，差异均有统计学意义(P<0.05)。光镜下光凝部位新生血管内皮细胞数，给药组明显低于对照组，重复给药组低于单次给药组； CNV组织中CD105的表达，给药组明显低于生理盐水组，重复给药组低于单次给药组。

结论：Ad-Es可以有效抑制动物模型的CNV生成，重复给药组抑制效果优于单次给药组，为治疗CNV提供了一种可能的新途径。]]> 2017/5/24 16:26:29 118true 方法：取生长状况良好的RF/6A细胞，分为对照组、低剂量组(0.1μmol/L apelin-13)和高剂量组(1μmol/L apelin-13)。培养细胞24h后采用MTT法检测细胞增殖，细胞划痕法检测细胞迁移，基质胶法检测管腔形成。

结果：不同浓度apelin-13作用24h的细胞增殖强于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，不同浓度apelin-13组RF/6A细胞24h的迁移距离大于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，不同浓度apelin-13组毛细血管样管腔形成数明显多于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，且细胞增殖、迁移和管腔形成均随着apelin-13浓度的升高而增加。

结论：Apelin-13能够明显促进RF/6A细胞的血管生成过程，提示apelin-13是一种促视网膜新生血管形成的重要因子。]]> 2017/5/24 16:26:29 117true 方法：选择60只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、PEDF组各20只，除空白对照组外，均建立视神经夹伤大鼠模型，均取左侧眼球为标本，造模成功后，模型组玻璃体腔内注射平衡盐溶液5μL，PEDF组玻璃体内注射5μL PEDF(浓度0.2μg/μL)。2wk后取视网膜组织，行HE染色后光镜下观察视网膜形态的变化，采用比色法测定NO含量的变化，采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法、蛋白印迹法(Western-blot)检测Caspase-3 mRNA和蛋白表达情况。

结果：HE染色发现，空白对照组视网膜组织排列整齐且清晰，视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells，RGCs)呈单层细胞排列，细胞为卵圆形，大小均匀，分布均匀，细胞核清晰，排列紧密，边界清晰； 模型组视网膜组织结构稀疏，RGCs呈空泡样变化，整体细胞数量减少，残留RGCs细胞核见固缩，染色不均。PEDF组视网膜组织残留神经节细胞轻微水肿，但RGCs细胞层排列尚且紧密，且受损程度明显轻于模型组； 模型组、PEDF组Caspase-3 mRNA和蛋白水平高于空白对照组，差异有统计学意义(P<0.05)； PDEF组Caspase-3 mRNA和蛋白水平低于模型组，差异有统计学意义(P<0.05)。模型组、PEDF组NO含量高于空白对照组，差异有统计学意义(P<0.05)； PEDF组NO含量低于模型组，差异有统计学意义(P<0.05)。

结论：采用PEDF干预可下调视神经损伤大鼠Caspase-3、NO的表达，减轻RGCs细胞损伤。]]> 2017/5/24 16:26:30 116true 方法：采用氪激光诱导棕色挪威(brown Norway，BN)大鼠建立实验性CNV模型。24只雄性BN大鼠，随机分为正常对照组(6只)与模型组(18只)。模型组行659nm氪激光视网膜光凝，功率360mW，曝光时间0.05s，光斑直径50μm。光凝后7、14、21d行荧光素钠和吲哚菁绿眼底血管造影，观察CNV形成率及渗漏光斑平均光密度值(average optical density，AOD)变化。处死大鼠，获得眼球标本，观察CNV的组织病理学变化和CD105因子的表达。

结果：光凝后7d，CNV开始形成，14d和21d达到高峰。光凝后7、14、21d的CNV形成率分别为77.08%、85.42%、89.58%。光凝后7～21d，荧光素渗漏AOD值逐渐增高(P<0.05)，7d与14d比较差异有统计学意义(P<0.05)，14d与21d比较差异无统计学意义(P>0.05)。造模后7～21d，CD105因子表达先升高后下降，7d与14d比较AOD值差异有统计学变化(P<0.05)，14d与21d比较AOD值差异无统计学变化(P>0.05)。

结论：CD105免疫组织化学与眼底血管造影对CNV变化规律的研究结果具有高度一致性，CD105免疫组织化学评价CNV具有准确、易操作的优点。]]> 2017/4/25 17:20:01 115true 方法：选用标准家兔28只，右眼为术眼，随机分成3组， A组12只，B组12只，C组4只。A组：玻璃体切割联合玻璃体腔填充硅油组； B组：玻璃体切割联合玻璃体腔填充重硅油组； C组：玻璃体切割联合玻璃体腔填充平衡盐溶液组。对实验动物术眼术前与术后不同时间段测得的视网膜后极部厚度、眼压及视网膜电图b波振幅值进行统计分析。

结果：实验A、B组及对照C组术前及术后不同时间点测得的术眼眼压经过两两比较，无统计学差异(P>0.05)； A、B、C组经两两比较，在术后第24wk时经OCT测得的术眼视网膜后极部厚度值均有统计学差异(P<0.05)； 在术后第24wk时术眼ERG的b波振幅均值有显著统计学差异(P<0.01)。

结论：硅油或者重硅油在作为玻璃体腔内填充物后，对兔眼术后眼压中长期内的影响无明显差别； 重硅油在填充后对兔眼视网膜视觉信息传导功能的负面影响，导致视网膜变薄的程度要明显大于普通硅油。]]> 2017/4/25 17:20:01 114true 方法：收集结膜松弛症组38例38眼和正常对照组36例36眼的结膜组织和泪液标本，分别行免疫组织化学染色检测结膜组织中黏蛋白(MUC2、MUC4、MUC5AC、MUC16)表达情况，ELISA检测泪液中黏蛋白(MUC2、MUC4、MUC5AC、MUC16)A值，结果行统计学分析，比较两组之间的差异。

结果：结膜松弛症组的结膜上皮细胞中MUC2、MUC4与正常对照组表达无统计学差异(P=0.315、0.156)； 结膜松弛症组的结膜上皮细胞中MUC5AC、MUC16阳性表达细胞较正常对照组明显减少，差异有统计学意义(P=0.016、<0.01)。结膜松弛症组泪液中MUC2的A值与正常对照组无统计学差异(P=0.651)，结膜松弛症组中MUC4、MUC5AC的A值较正常对照组明显降低，有显著的统计学差异(均P<0.01)，结膜松弛症组中MUC16的A值较正常对照组下降，差异有统计学意义(P=0.022)。

结论：结膜松弛症患者结膜组织和泪液中MUC5AC和MUC16均下降，对其进一步研究可能揭示结膜松弛症的发病机制。]]> 2017/4/25 17:20:01 113true 方法：采用完整及去上皮离体角膜进行兔体外扩散实验，供给池中分别加入不含冰片和含合成冰片的地塞米松滴眼液，用高效液相色谱仪测定接受池中不同时间点样品中地塞米松的含量，计算表观渗透系数。测定完整角膜的角膜水化值。观察合成冰片点眼对角膜的刺激性。

结果：与对照组相比，合成冰片使地塞米松在完整角膜的表观渗透系数增加2.40倍，差异有统计学意义(P<0.05)，合成冰片不能显著增加地塞米松在去上皮角膜的表观渗透系数，差异无统计学意义(P>0.05)。角膜水化值及刺激性试验表明，合成冰片不会明显增加角膜水化值及白兔眨眼次数，差异无统计学意义(P>0.05)。

结论：合成冰片能够提高脂溶性药物地塞米松的角膜通透性，无明显角膜刺激性。]]> 2017/3/27 10:17:04 112true 方法：分离鼠龄为2～24mo的小鼠RPE，采用qRT-PCR的方法检测RPE中miR-146a/b和IL-6 mRNA的表达水平。检测来自于ARMD患者眼球中miR-146a及IL-6 mRNA的表达水平。在ARPE-19细胞系中检测miR-146a过表达对IL-6基因表达水平的影响。

结果：miR-146的表达在自然衰老的小鼠RPE中与年龄呈现正相关，而IL-6无变化。在ARMD患者中，miR-146a mRNA表达水平下降，IL-6 mRNA表达水平上升。在人ARPE-19细胞中的实验表明，miR-146a过表达抑制了由TNF-α所诱导的IL-6的表达。

结论：在湿性ARMD中，miR-146a与IL-6 mRNA表达水平有可能与ARMD的发生呈相关性，暗示IL-6和miR46a有可能作为生物分子标志物在未来的ARMD诊断中发挥作用。]]> 2017/3/27 10:17:04 111true 方法：选取7天龄SD乳鼠96只随机分为6组：Z组：正常组； O组：OIR组； A组：OIR+溶媒对照组； B组：OIR+塞来昔布5μg组； C组：OIR+塞来昔布20μg组； D组：OIR+塞来昔布80μg组。除Z组在正常环境饲养外，其余各组乳鼠均建立OIR模型。乳鼠于生后第 12d出氧箱后给予玻璃体内注射二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide， DMSO)及相应剂量的塞来昔布，于生后第 17d处死，做组织切片HE染色观察视网膜组织形态并计数突破内界膜的血管内皮细胞核数，石蜡切片行免疫组化染色检测VEGF蛋白的表达。

结果：HE染色显示，Z组、O组、A组、B组、C组、D组突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数分别为0.44± 0.18、30.60±5.36、28.05±4.68、19.58±4.58、10.13±1.93、7.58±2.68个； 除O组与A组外，各组间差异均有统计学意义(P<0.05)，经塞来昔布治疗后，突破内界膜的血管内皮细胞核明显减少，且与剂量正相关； 免疫组化结果显示，Z组VEGF蛋白表达呈阴性，表达率为10%，其余各组可见VEGF蛋白的阳性表达，O、A组阳性表达较高，阳性率分别为90%、86%，表现为棕褐色颗粒或团块，均高于B、C、D组，且三组的阳性表达依次减低为68%、42%、30%。

结论：塞来昔布能够有效抑制大鼠OIR模型视网膜新生血管的生长，且抑制效果与剂量正相关，其作用可能通过抑制VEGF表达实现。]]> 2017/3/27 10:17:04 110true 方法：健康新西兰白兔22只，随机分为实验组及正常对照组，实验组兔双眼行碱烧伤法建立角膜新生血管模型，造模后每日裂隙灯检查角膜形态学改变并计算新生血管面积，同时自造模当日起右眼每日结膜下注射siRNA 1U组成siRNA治疗组，左眼以control siRNA为实验对照组，分别于术后3、7、14、21d取角膜组织行免疫组化染色，观察EPO的表达情况。

结果：实验组最早于碱烧伤后3d可见CNV长入，7～14d生长最为旺盛，免疫组织化学染色见随碱烧伤时间延长，角膜EPO的表达逐渐增加； siRNA治疗后CNV延迟长入，面积较实验对照组明显减小，炎性细胞浸润减轻，且角膜中EPO的表达较前者明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。

结论：EPO可能在CNV的发生发展中发挥重要作用，碱烧伤后siRNA的早期干预可能通过影响EPO的表达而抑制CNV的生长。]]> 2017/2/27 10:55:37 109true 方法：实验分为AMD组、白内障组和正常组，运用生物信息学预测出AT1R是miR-410的靶基因，将正常的RPE细胞模拟AMD和白内障的微环境进行培养，检测其中miR-410的表达量，进一步将miR-410 mimics转染入细胞中，分别运用Q-PCR和Western blot的方法检测AT1R mRNA和蛋白的表达量，并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-410与AT1R的相互作用关系。

结果：AMD组与白内障组和正常对照组相比，RPE细胞中的miR-410表达量显著降低(P=0.0006，0.0008)，双荧光素酶报告基因实验表明，miR-410对AT1R具有明显的调控作用，且miR-410 mimics的下调效率大致为40%左右。细胞实验显示miR-410对AT1R的mRNA和蛋白表达的抑制率约为40%～50%。

结论：AT1R是miR-410的靶基因，且在AMD的RPE细胞中提高miR-410的表达可以抑制AT1R的表达。]]> 2017/2/27 10:55:37 108true 方法：鼠龄7d的SD大鼠60只随机分为正常组、模型组、干预组和NS对照组共4组。正常组置于正常空气中饲养； 模型组置于75mL/L高氧环境5d建立氧诱导视网膜病变模型； 干预组给予抗p16甲基化药物5-aza-CdR(0.25mg/kg)腹腔注射； NS对照组腹腔注射同体积的生理盐水。各组分别取双侧眼球，左眼做HE染色观察视网膜新生血管，免疫组织化学和免疫荧光观察p16蛋白的表达。右眼视网膜行real time-PCR分析p16 mRNA的表达。

结果：正常组幼鼠的视网膜未发现突破视网膜内界膜的新生血管管腔。模型组和NS对照组视网膜组织明显增厚，可见大量新生血管管腔。干预组视网膜偶见新生血管管腔。免疫组织化学和免疫荧光显示，模型组视网膜p16呈低表达，阳性细胞数为19.52±2.67个； 而干预组阳性细胞数为36.38±3.16个，差异有统计学意义(P<0.001)。real time-PCR显示，模型组p16 mRNA的表达降低(2^-△△ct=0.14±0.01)，p16 mRNA在干预组大鼠的视网膜表达明显高于NS对照组大鼠视网膜，两组相比差异有统计学意义(2^-△△ct=0.68±0.08，P<0.001)。

结论：P16的异常表达可能与视网膜新生血管增殖密切相关，抑制p16甲基化可减少视网膜新生血管的增殖。]]> 2017/1/20 11:21:30 107true 方法：收集青岛大学附属医院眼科1995-06/2015-12手术切除并确诊为眼附属器B细胞非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma，NHL)的病理标本40例，以同期手术切除的眼部反应性淋巴组织增生组织20例作为对照组。采用PCR法检测淋巴瘤组与对照组中MTDH与β-catenin的mRNA表达情况； 采用免疫组化法检测两组中MTDH与β-catenin的蛋白表达情况，并分析其与眼附属器淋巴瘤临床特征的关系。

结果：与对照组相比，眼附属器淋巴瘤中MTDH与β-catenin的mRNA与蛋白表达均显著增加(P<0.05)。MTDH与 β-catenin蛋白的阳性表达率与淋巴瘤的病理类型有关，随肿瘤恶性程度的增高，其表达增加(P<0.05)，而与发病年龄、性别及部位无关(P>0.05)。在眼附属器淋巴瘤中，MTDH与β-catenin的蛋白表达呈正相关(r=0.389，P<0.05)。

结论：MTDH与β-catenin的高表达可能与眼附属器淋巴瘤的发生发展有关，且两者表现为正相关。]]> 2017/1/20 11:21:30 106true 目的：探讨大鼠硒性白内障形成是否与血-视网膜屏障的发育情况有关。

方法：测定了不同年龄段大鼠晶状体中谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性、丙二醛(MDA)水平以及眼球中的硒含量； 并采用氢氧化镧[La(OH)₃]示踪法观察不同年龄段血-视网膜屏障的发育情况。

结果：开眼前幼鼠GPx的酶活性最高，之后随着年龄的增长而逐渐下降； 出生第20d大鼠视网膜色素上皮层的La(OH)₃分布显著少于出生第11天龄幼鼠。对出生第9d大鼠注射亚硒酸钠(Na₂SeO₃)48h后，La(OH)₃大量进入视网膜的内层，视网膜色素上皮层受到严重破坏； 而注射相同剂量Na₂SeO₃的18天龄大鼠在48h后，只有少量的La(OH)₃进入。开眼前大鼠晶状体中MDA含量最高，开眼后下降显著； Se组是对照组的5倍。再者，大鼠眼中的La(OH)₃分布与眼球中的硒含量、晶状体中的MDA水平的变化基本一致。

结论：亚硒酸钠诱导形成的硒性白内障主要原因是幼鼠血-视网膜屏障发育不成熟，而不是抗氧化能力。]]> 2017/11/20 16:09:09 105true 目的：研究氪激光联合Q-开关Nd：YAG激光行激光虹膜切除术后一过性眼压升高的发病机制。

方法：选取由本院动物实验中心提供的健康家兔42只84眼，其中雌兔18只，雄兔24只； 平均质量2.24±0.31kg； 随机分为6组，每组7只14眼，其中A、B、C、D、E组分别为激光虹膜切除术后20min，2、6、18、24h组； F组为正常对照组。观察各组术前及术后眼压和房水内丙二醛(malondialdehyde，MDA)、一氧化氮(nitric oxide，NO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、6-酮-前列腺素F_1α(6-酮-PGF1α)和一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)含量的变化。

结果：手术前各组眼压、房水内NO、NOS、SOD、MDA、6-酮-PGF1α含量对比差异均无统计学意义(P>0.05)。术后6h内眼压升高，A、B、C组分别与F组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)，术后6h以后呈下降趋势，D、E组分别与F组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。术后房水内NO、NOS、SOD含量呈下降趋势，A、B、C组分别与F组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)，术后6h以后慢慢恢复，D、E组分别与F组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。术后房水内MDA和6-酮-PGF1α含量呈上升趋势，A、B、C组分别与F组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)，术后6h以后慢慢恢复，D、E组分别与F组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。

结论：激光虹膜切除术后一过性眼压升高与术后房水内MDA、6-酮-PGF1α含量升高和SOD、NO降低相关。]]> 2017/11/20 16:09:09 104true 目的：研究siRNA下调Mcl-1后奥沙利铂对Y79凋亡率的影响。

方法：使用RPMI1640培养液培养Y79细胞。将培养后的细胞用0.25μmol/L的奥沙利铂进行刺激，分别在6、16和24h后，使用Western blot法对Mcl-1蛋白的表达效果进行检测。收集对数生长期的细胞，制备单细胞悬液，分别转染空质粒和Mcl-1-homo-991、Mcl-1-homo-1114、Mcl-1-homo-1235质粒。6h后使用荧光显微镜拍照，观察转染效率，选出最佳的siRNA序列。将未进行转染操作的RB细胞Y79分为A组，将转染空质粒的为对照组，将行转染下调Mcl-1操作后的细胞分为B组和C组，其中A组和C组均采用0.25μmol/L的奥沙利铂进行刺激诱导处理，B组转染细胞常规培养，24h后采用Annexin V-FITC/PI双染法和流式细胞术进行检测对比4组的细胞凋亡率。

结果： Western blot检测结果表明处理Y79细胞24h后Mcl-1的表达最为显著，转染Mcl-1-homo-991质粒后能够明显抑制Y79细胞中Mcl-1的表达，转染效率最高。采用Annexin V-FITC/PI双染法和流式细胞术进行检测A组凋亡率(11.1%±1.2%)与对照组(6.1%±0.6%)对比，差异无统计学意义(P>0.05)； C组Y79的凋亡率(49.2%±2.7%)显著高于B组(20.8%±1.9%)，同时这两组的凋亡率都显著高于A组和对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。

结论：通过siRNA下调Mcl-1后，可以降低Y79的抗药性，从而增强奥沙利铂对Y79的凋亡，降低了Y79的存活。]]> 2017/11/20 16:09:09 103true 目的：探讨不同浓度红景天苷对H₂O₂诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelium cells，HLEC)氧化损伤的影响。

方法：HLEC传代培养，分为4组：对照组：以正常培养液培养； 氧化损伤组：100μmol/L的H₂O₂作用12h； 红景天苷低浓度组：10μmol/L红景天苷预处理24h后，加入H₂O₂作用12h； 红景天苷高浓度组：100μmol/L红景天苷预处理24h后，加入H₂O₂作用12h。应用MTT法观察红景天苷对HLEC细胞活力的影响； 倒置显微镜下观察并记录各组细胞形态变化； DCFH-DA荧光探针检测胞内ROS含量的变化； 分光光度计检测细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)及丙二醛(malondialdehyde，MDA)的含量。

结果：红景天苷能明显抑制H₂O₂诱导的HLEC细胞活力下降，抑制细胞内ROS生成，引起HLEC内SOD、GSH-Px水平的升高及MDA水平的下降。

结论：红景天苷通过降低细胞内MDA产生，提高细胞内SOD、GSH-Px含量抑制H₂O₂诱导的HLEC损伤，提示红景天苷可能在HLEC损伤的治疗中具有保护作用。]]> 2017/9/18 10:53:56 102true 目的：观察脂质运载蛋白2(lipocalin-2， LCN-2)对体外培养的小鼠视网膜内皮细胞(retinal vascular endothelial cells， RVECs)增殖、迁移和管腔形成的影响及其在视网膜新生血管中的作用。

方法：取生长状况良好的RVECs分为不同浓度组：分别以0、5、10μmol/L LCN-2作用细胞48h。采用EdU法检测细胞增殖，Transwell法检测细胞迁移，Matrigel法检测管腔形成。

结果：不同浓度LCN-2作用的细胞增殖率大于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，不同浓度LCN-2组RVECs细胞迁移数目多于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，不同浓度LCN-2组细胞管腔形成数明显多于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，且细胞增殖、迁移和管腔形成均随着LCN-2浓度的升高而增加。

结论：LCN-2能够明显促进RVECs的血管生成过程，提示LCN-2是一种重要的促视网膜新生血管形成的因子。]]> 2018/8/17 17:07:07 101true 目的：探讨Mcc950对过氧化氢(H₂O₂)诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19细胞)炎性损伤的保护作用。

方法：将ARPE-19细胞分为正常对照组、H₂O₂损伤组、单纯Mcc950给药组、Mcc950预处理+H₂O₂损伤组，采用 CCK-8法检测细胞活力并确定H₂O₂和Mcc950合适的实验浓度，ELISA法检测细胞分泌的IL-1β浓度，免疫印迹(Western blot)法检测细胞中NLRP3炎性小体相关蛋白的表达情况，TUNEL染色法观察细胞凋亡情况。

结果：细胞活力随H₂O₂刺激浓度的增加逐渐下降，H₂O₂浓度为400μmol/L时细胞活力显著降低； 而0.1、1μmol/L Mcc950对细胞活力无显著影响，故选取400μmol/L H₂O₂和1μmol/L Mcc950作为合适的实验浓度。与正常对照组相比，H₂O₂损伤组细胞活力显著降低，细胞上清液中IL-1β浓度显著升高，细胞凋亡率明显增加，差异均有统计学意义(P<0.05)，而与H₂O₂损伤组比较，Mcc950预处理+H₂O₂损伤组细胞活力明显升高，细胞上清液中IL-1β浓度和细胞凋亡率均降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测结果显示，H₂O₂能够促进细胞中NLRP3、Pro-caspase1和caspase1的表达，而Mcc950预处理+H₂O₂损伤组细胞中NLRP3、Pro-caspase1依然保持高表达，但caspase1表达水平得到明显抑制，表明Mcc950能有效抑制NLRP3炎性小体的激活从而干扰具有细胞凋亡作用的成熟caspase1的产生。

结论：Mcc950能够有效抑制H₂O₂诱导的NLRP3炎性小体激活，恢复细胞活力，抑制细胞凋亡。]]> 2018/8/17 17:07:07 100true 目的：观察胰岛素对人视网膜微血管内皮细胞syndecan-1的表达及细胞的增殖和通透性的影响。

方法：以低浓度(100nmol/L)和高浓度(1 000nmol/L)胰岛素分别刺激细胞48h后，采用蛋白印迹和实时定量聚合酶链反应观察syndecan-1蛋白和mRNA的表达变化。分别以四甲基偶氮唑蓝法和辣根过氧化物酶法观察细胞的增殖性和通透性。

结果：不同浓度的胰岛素刺激后，视网膜微血管内皮细胞syndecan-1蛋白和mRNA的表达均升高，且高浓度胰岛素的作用更显著。胰岛素刺激后，视网膜微血管内皮细胞的增殖水平和通透性均增高，且高浓度胰岛素的作用更强。

结论：胰岛素可上调人视网膜微血管内皮细胞syndecan-1的表达、增加细胞的通透性和促进细胞的增殖。]]> 2018/7/20 11:38:05 99true 目的：探讨蓝光和白光分别光照不同时间对人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞增殖的影响，为进一步检测光照损伤过程中相关因子的变化情况，研究光照损伤过程中的信号转导机制奠定基础。

方法：收集生长状态良好的ARPE-19 细胞进行实验，制作CCK-8标准曲线，确定实验合适的ARPE-19细胞密度及CCK-8试剂的反应时间。将细胞分为避光组、蓝光组、白光组，分别光照 3、6、9h，再避光培养12h后采用CCK-8 法检测不同光源光照不同时间对ARPE-19细胞增殖率的影响。

结果：通过CCK-8标准曲线选择每孔细胞数量为20 000个，CCK-8溶液作用4h后测量相应吸光度值。CCK-8检测结果示，避光组、蓝光组、白光组三组细胞光照不同时间细胞增殖率比较，差异有统计学意义(P<0.01)。蓝光组细胞光照3、6、9h，各时间点细胞增殖率比较，差异有统计学意义(P<0.001)，且随着光照时间的延长，细胞增殖率逐渐降低。白光组细胞光照3、6、9h，各时间点细胞增殖率比较，差异有统计学意义(P<0.05)，其中光照3h和6h细胞增殖率比较，差异有统计学意义(P<0.05)，而光照9h分别与光照3、6h细胞增殖率比较，差异均无统计学意义(P=0.253、0.120)。白光光照3～6h细胞增殖率呈下降趋势，而光照6～9h细胞增殖率呈现上升趋势。相同光照时间，蓝光组和白光组细胞增殖率均低于避光组，且蓝光组细胞增殖率均低于白光组，差异均有统计学意义(P<0.05)。

结论：光照能抑制ARPE-19细胞的增殖，其中蓝光光照细胞增殖率明显低于白光，且随光照时间的增长，细胞增殖率进一步降低。]]> 2018/7/20 11:38:05 98true 目的：观察COX-2(cyclooxygenase，COX-2)抑制剂(塞来昔布)对糖尿病大鼠视网膜缝隙连接蛋白Cx43(connexin43， Cx43)表达的影响。

方法：选取SD(Sprague-Dawley)大鼠45只，随机分为3组：对照组、糖尿病组、用药组，每组各15只，采用STZ腹腔注射造模的方式进行造模，快速血糖仪监测各组大鼠空腹血糖，正常对照组、糖尿病模型组、用药组分别用生理盐水、生理盐水、塞来昔布溶液进行灌胃，3mo后采用过量麻醉法处死大鼠，制备视网膜标本，采用免疫组化法观察Cx43蛋白，实时定量PCR技术检测大鼠视网膜Cx43 mRNA的相对表达量，采用SPSS13.0统计软件进行统计分析，对各组检测结果进行比较。

结果：免疫组织化学染色缝隙连接蛋白Cx43在视网膜大鼠的神经节细胞层、神经纤维层、内丛状层、色素上皮层、内皮细胞层可见表达不同程度点状、片状表达，计算机图像灰度分析发现塞来昔布对糖尿病大鼠视网膜Cx43表达有促进作用，正常对照组、糖尿病组、用药组灰度值分别是0.233±0.025、0.124±0.014、0.197±0.021，两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)； 实时定量PCR检测发现塞来昔布促进糖尿病大鼠Cx43 mRNA表达量增加，正常对照组、糖尿病组、用药组相对表达量分别是0.635±0.084、0.110±0.061、0.367±0.074，两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。

结论：缝隙连接蛋白Cx43在糖尿病大鼠视网膜中表达减少，塞来昔布可以减缓糖尿病大鼠视网膜缝隙连接蛋白Cx43表达的减少。]]> 2018/7/20 11:38:05 97true 目的：观察手机光照刺激体外培养人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium； RPE)后形态及B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl2-Associated X(Bax)、半胱天冬酶-3(Caspase-3)的mRNA表达变化。

方法：将体外培养的人RPE细胞随机分成4组，根据RPE细胞光照时间长短分为照射3h光照组、6h光照组、12h光照组和0h光照组。在特制的培养箱内，将智能手机屏幕开到最大亮度(200±20Lx)做为光源，持续静音情况下循环播放彩色图片。然后应用苏木精-伊红(HE)染色法，末端脱氧核糖核酸转移酶介导的原位缺口末端标记(TUNEL)染色，四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法观察各实验组RPE细胞形态学改变，并运用聚合酶链反应(PCR)技术检测各组细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3的mRNA表达变化。

结果：用HE染色、TUNEL染色、MTT法观察发现各光照组RPE细胞形态学无明显改变，差异均无统计学意义(P>0.05)。应用PCR技术检测发现RPE细胞在光照刺激3h光照组和6h光照组，细胞内的Bcl-2、Bax、Caspase-3的mRNA表达与0h光照组的差异均无统计学意义(P>0.05)。但随着光照时间持续延长(12h)，细胞内的Bcl-2表达下调，Bax、Caspase-3表达水平均上升，差异均有统计学意义(P<0.05)。

结论：手机屏幕等作为人造光源在长期持续高亮度照射下会引起体外培养人视网膜色素上皮细胞的损伤。]]> 2018/6/27 10:52:29 96true 目的：研究清眩润目饮对蒸发过强型干眼模型兔的作用机制和疗效。

方法：将25只雄性健康日本大耳白兔随机分为5组：空白对照组、模型组、西药组、高剂量清眩润目饮组、低剂量清眩润目饮组。空白对照组不做任何处理，采用改良睑板腺口灼烧法制备兔蒸发过强型干眼模型； 造模后，高、低剂量组每天分别予27.2mg/kg、6.8mg/kg的清眩润目饮灌胃，模型组每天以等量生理盐水灌胃，西药组以妥布霉素地塞米松眼膏1滴，1次/d点双眼，各组连续给药28d。各组分别在实验前第14d、实验前第7d、造模后当天、造模后第7d、造模后第14d，对全部实验兔行Schimer Ⅰ试验(SchimerⅠ test，SⅠt)和泪膜破裂时间(break-up time，BUT)测定。造模后15d以过量麻醉法处死动物，制备兔角结膜组织切片，采用苏木精-伊红染色法，观察各组兔角膜组织形态变化； 采用ELISA法检测兔角结膜中TNF-α、IL-1、IL-6的浓度含量。

结果：(1)BUT、SⅠt：造模后7d，西药组、高、低剂量清眩润目饮组的BUT、SⅠt较造模时均有不同程度的改善(P<0.05)； 西药组、高、低剂量清眩润目饮组与模型组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)TNF-α、IL-1、IL-6：ELISA法检测显示，模型组兔角结膜中的TNF-α、IL-1、IL-6浓度含量明显高于空白对照组，西药组和高、低剂量组兔角结膜中的TNF-α、IL-1、IL-6浓度明显低于模型组，差异均有统计学意义(均P<0.05)，且高剂量组作用优于西药组。(3)病理组织学检查：造模后14d，空白对照组角膜上皮分层好，基底部细胞排列呈柱状，靠近角膜上皮呈鳞状改变，结膜可见完整的上皮层和结膜下组织层，杯状细胞排列紧密； 模型组角膜上皮层细胞数减少甚至剥脱缺失，基质层分层紊乱，结膜上皮细胞层不规则脱失，杯状细胞大量减少； 西药组、高剂量组兔角膜形态接近正常组，结膜杯状细胞数量与空白对照组无明显差异。

结论：清眩润目饮可以通过下调蒸发过强型干眼兔角膜和结膜中TNF-α、IL-1、IL-6的表达而抑制炎症反应，从而改善眼表症状，增加泪液分泌，延长泪膜破裂时间。]]> 2018/6/27 10:52:29 95true 目的：用过碘酸雪夫氏(Periodic Acid-Schiff， PAS)染色法比较4%多聚甲醛固定液、4%戊二醛固定液和Davidson 固定液固定豚鼠眼球的固定效果，筛选最佳眼球固定液和固定时间。

方法： 取正常豚鼠眼球分6组，每组5只，I组眼球放入4%多聚甲醛固定液固定24h、Ⅱ组眼球放入4%戊二醛固定液固定24h； Ⅲ～V组眼球放入Davidson 固定液分别固定3、6、24h； Ⅵ组眼球在Davidson 固定液中固定3h后转移到10%中性甲醛中再固定48h。常规制片、PAS染色、显微镜观察，比较不同固定方法对组织的固定效果。

结果：Davidson 固定液固定3h的固定效果最为理想，Davidson 固定液固定3h后转移到10%中性甲醛再固定48h的固定效果与Davidson 固定液固定3h的固定效果接近，这两组固定液固定的眼球切片均结构完整、层次清晰，视网膜各层细胞排列整齐。

结论： Davidson固定液对豚鼠眼球的固定效果明显优于其他两种固定液，豚鼠眼球用Davidson 固定液固定后，可将其转移到中性甲醛中长期保存，其固定效果不受影响。]]> 2018/5/25 15:46:38 94true 目的：观察光化学法构建视网膜分支静脉阻塞(branch retinal vein occlusion， BRVO)大鼠模型的自然病程和不良事件。

方法：选取30只SD(Sprague Dawley)大鼠尾静脉注射孟加拉红1min后，532nm激光(80mW，100μm，100ms)于视盘颞侧视网膜静脉二级分叉处进行单光点光凝50点建立BRVO模型。分别于1、3、5、7、10、14和21d检测全视野视网膜电图(electroretinogram， ERG)、荧光素眼底血管造影(fundus fluorescein angiography， FFA)和相干光断层扫描(optical coherence tomography， OCT)。于1、5和21d各时间点随机处死2只大鼠行HE病理和血管内皮生长因子-α(vascular endothelial growth factor-α， VEGF-α)免疫组化染色。

结果：光凝后，3只大鼠死亡，3只严重出血导致视网膜大部分脱离，1只出现视网膜凹陷，1只白内障。FFA和眼底(荧光)彩照发现BRVO大鼠模型造模成功率为73%(22/30)，1d时近端变粗，远端变细，3～7d光凝血管完全再通。ERG示光凝1d后暗适应3.0反应b波降低至正常眼的0.694±0.042倍，5～7d下降至最低点约为正常眼0.487±0.064倍，之后开始上升，21d上升至初始值0.708±0.0465倍。OCT和HE病理切片分别于在体和离体水平发现第1d视网膜节细胞层和外核层水肿，3～5d水肿消失且激光光凝点视网膜附近250μm外核层开始凋亡变薄，到21d外核层变薄只剩3～4层细胞。免疫组化发现激光光凝部位VEGF-α第1d表达水平大于光凝前，第5d光凝处VEGF-α表达量无明显差异，21d光凝处VEGF-α表达略低于光凝前。

结论： 激光光凝制作BRVO模型是一种切实可行的方法，其疾病的演变和发展可以部分模拟人体BRVO的进程。同时由于造模成功率较低以及激光光凝相关并发症较多，在实际使用中有待进一步改进方法。]]> 2018/4/24 14:27:16 93true 目的：研究准分子激光治疗性角膜切削术(phototherapeutic keratectomy，PTK)对兔眼细菌性角膜溃疡愈合的影响，并探讨该方法用于临床上治疗细菌性角膜病变的可能性。

方法：24只新西兰大耳兔48眼接种金黄色葡萄球菌，成功制作细菌性角膜溃疡模型。接种细菌后1～2d溃疡明显形成，予以左氧氟沙星滴眼液滴眼。术前行双眼前节裂隙灯检查，双眼光学相干断层扫描(optical coherence tomography，OCT)检查并测量角膜溃疡中央深度。接种3d后所有实验兔右眼行PTK手术，左眼不予以处理作为对照眼。术后3、7d再行裂隙灯检查，并行OCT检查测量角膜溃疡中央厚度。术后7d处死实验兔，摘除双眼眼球取角膜组织行病理切片观察。

结果：经裂隙灯观察，随时间推移两组兔眼角膜溃疡均有愈合倾向，表现为溃疡面积缩小和表面变平坦光滑。观察组术前测量角膜溃疡深度与对照组比较，差异无统计学意义(t=0.706，P=0.484)。观察组术后3、7d角膜溃疡厚度与对照眼比较，差异有统计学意义(P<0.05)。

结论：PTK能有效治疗兔眼金黄色葡萄球菌性角膜溃疡，促进溃疡创面愈合，这可能为PTK应用于临床治疗患者细菌性角膜病变提供实验依据。]]> 2018/4/24 14:27:16 92true 目的：建立一种简便、高效的兔角膜缘干细胞原代培养方法。

方法：获取兔角膜缘组织，采用组织块联合胰蛋白酶消化法进行兔角膜缘干细胞体外培养，倒置显微镜下观察细胞生长情况，HE染色观察细胞形态和结构特点，并运用免疫组织化学技术进行细胞鉴定。

结果：采用组织块联合胰蛋白酶消化法可以简便、快速地培养出兔角膜缘干细胞，显微镜下动态观察细胞生长良好，有较高的增殖能力； HE染色证实细胞形态和结构正常； AE5及P63免疫组织化学鉴定呈阳性。

结论：采用组织块联合胰蛋白酶消化共同培养的方法，建立了一种简便、高效的兔角膜缘干细胞原代培养模式。]]> 2018/3/26 15:30:53 91true 目的：对比2%双醋瑞因滴眼液结膜囊多次给药与单次给药在角膜中的药代动力学差异，为临床医师治疗感染性角膜病时多次给药提供实验依据。

方法：以2%双醋瑞因为实验滴眼液，选取健康无眼疾的雄性昆明白小鼠，随机分为多次给药组和单次给药组，双眼结膜囊分别给予双醋瑞因滴眼液。多次给药组间隔2min给药一次，共给药3次； 单次给药组仅给药1次。用高效液相法测定角膜中双醋瑞因的代谢产物(大黄酸)的浓度，多次给药组和单次给药组的时间点均为5、15、30、60、120、180min。将小鼠角膜组织中的药物浓度经药物动力学程序(DAS2.1.1)进行拟合，并计算相关药动学参数。

结果：结膜囊多次给药组和单次给药组各个时间点角膜中均可检测到其活性代谢产物大黄酸； 多次给药组5、15、30、60、120、180min的浓度分别为318.678±40.88、210.02±25.66、188.83±31.74、112.24±11.70、90.28±22.01和57.67±13.71μg/g，单次给药组各时间点浓度分别为145.17±19.29、97.95±10.49、71.18±18.70、39.11±2.44、18.10±2.34和9.08±2.04μg/g。两组小鼠角膜中大黄酸的含量均于给药后5min最高，多次给药组浓度高于单次给药组浓度，差异具有统计学意义(P<0.01)。随时间延长大黄酸的浓度逐渐下降，3h后多次给药组浓度仍高于单次给药组，差异具有统计学意义(P<0.01)。单次给药组半衰期为0.89±0.31h。

结论：结膜囊多次给药与单次给药相比具有药物有效浓度高、维持时间长的优点，双醋瑞因作为一种新的抗菌药物，可以在感染性角膜炎的早期对病程的发展起到抑制作用。多次给药后可以对急性发展期起到较好的治疗效果，而且在夜晚也可维持较高浓度，在保证患者的睡眠休息质量同时又起到了对疾病的治疗作用。]]> 2018/3/26 15:30:53 90true 目的：探讨表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)对视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial，RPE)细胞增殖和迁徙的影响。

方法：体外培养人RPE细胞株(ARPE-19细胞)，给予不同浓度EGF处理ARPE-19细胞，通过噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)实验、5-溴脱氧尿苷(5-bromodeoxyuridine，BrdU)吸收实验和细胞划痕实验检测EGF对ARPE-19细胞活力、增殖和迁徙的影响； 通过Western blot法检测EGF对表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)和蛋白激酶B(protein kinase B，AKT)蛋白表达的影响。

结果：MTT实验显示50、100ng/mL EGF处理12h诱导ARPE-19细胞活力增加； BrdU吸收实验显示100ng/mL EGF处理24h诱导BrdU染色阳性ARPE-19细胞数增加； 细胞划痕实验显示100ng/mL EGF处理24h可以诱导ARPE-19细胞迁徙能力增加。Western blot检测显示使用10～100ng/mL EGF 处理细胞 12h或者100ng/mL EGF 处理细胞15～180min均可以诱导磷酸化EGFR(pEGFR)表达升高和总EGFR表达降低，同时也可以诱导磷酸化AKT(pAKT)表达升高，但是对总AKT表达无显著影响。

结论：EGF通过EGFR/AKT信号通路增加RPE细胞的活力、增殖和迁徙能力，可能对增殖性玻璃体视网膜病变中RPE细胞的异常增殖和迁徙起到重要作用。]]> 2018/2/27 14:49:15 89true 目的：探究黄芪注射液对模拟高海拔缺氧大鼠视网膜自由基代谢及病理学形态改变的影响。

方法：选取60只健康不伴有眼疾的SD大鼠，依照随机分组法分为黄芪注射液组(干预组)与生理盐水组(对照组)，每组各30只。每组大鼠中，随机各选取6只于放入模拟舱前分别腹腔注射黄芪注射液(15mL/kg)与生理盐水(15mL/kg)。注射完30min之后放入5 000m的模拟舱，分别生存2、6、8、12、24h。出舱后立即处死并摘除眼球，用HE染色法观察视网膜形态的改变，比色法测定视网膜SOD和MDA含量。

结果：HE染色示2h时两组视网膜均无形态学改变，随着缺氧时间延长，视网膜各层水肿逐渐加剧，但干预组水肿程度低于对照组。随高海拔缺氧时间的延长，两组SOD活性均下降，组内不同时间点比较，差异均具有统计学意义(P<0.05)； 两组MDA的含量均逐渐升高，组内不同时间点比较，差异均具有统计学意义(P<0.05)。两组SOD活性在同时间点进行比较，除2h无统计学意义，其余时间点差异具有统计学意义(P<0.05)； 同时间点两组MDA含量进行比较，除2h差异无统计学意义，其余时间点差异具有统计学意义(P<0.05)。

结论：黄芪注射液可以改善高海拔缺氧环境下大鼠视网膜病变的损伤程度，其机制可能与清除自由基、增强SOD的活性，减少脂质过氧化物MDA的含量、增强抗氧化能力有关。]]> 2018/2/27 14:49:15 88true 目的：比较三种泪液采集载体(进口吸附滤纸、国产吸附滤纸和泪液采集毛细管)在不同储存温度条件下对泪液蛋白保存的影响，为科学地选择泪液采集方式、准确测定泪液中的不同类型的蛋白分子提供实验依据。

方法：表面硅化处理的玻璃毛细管，国产泪液试纸及进口泪液试纸吸附等体积等量的血清白蛋白、胎牛蛋白或已知浓度的IL-1Ra、IL-6、MIG、IP-10、MMP-9、TIMP1、VEGF和HBD1标准品混合液后放于无菌离心管并分别保存于4℃、-20℃和-80℃。以适当的洗脱液进行洗脱后，用Micro BCA^TM和酶联免疫吸附法分别检测总蛋白浓度和各种特异性蛋白浓度。

结果：洗脱缓冲液中是否添加表面活性剂或蛋白酶抑制剂对滤纸载体的蛋白洗脱率没有显著影响。-20℃和-80℃保存条件下，三种泪液采集载体对样本总蛋白的平均洗脱率没有显著性差异。IL-6在三种泪液采集载体中的平均洗脱率均较高，且载体之间及不同保存温度环境之间均没有显著的差异。滤纸和毛细管载体对IL-1Ra和HBD1的滞留效应差异较大：IL-1Ra在滤纸和毛细管载体中的平均洗脱率分别为19%±15%和98%±6%； HBD1在滤纸和毛细管载体中的平均洗脱率分别为93%±8%和61%±3%。MIG在毛细管收集载体中的平均洗脱率显著高于滤纸载体，分别为87%±4%和69%±4%。毛细管载体对MMP-9和TIMP1的平均洗脱率分别为90%±5%和103%±7%，同样显著高于滤纸(分别为62%±3%和87%±5%)。样本载体保存于-80℃ 环境时，其洗脱液中VEGF和IP-10的平均洗脱率分别为82%±5%和72%±8%，明显高于其他温度环境保存的样本载体。

结论：检测泪液中不同目的蛋白时，需综合考虑采集方法和保存温度条件，选择最经济可靠的方法。用毛细管采集泪液适合大多数的蛋白定量检测，检测IL-1Ra、IP-10、MIG、MMP-9和TIMP1的泪液适合用毛细管进行采集。但是对于有明显极性的蛋白，例如HBD1，则要事先试验最有效的收集和保存方法。]]> 2018/1/19 9:47:41 87true 目的：通过观察高眼压模型形态学改变，为复方卡波姆成功构建高眼压模型提供形态学证据。

方法：SD清洁级大鼠50只，用随机数字法随机分为实验组大鼠40只、空白组大鼠10只。通过前房注射10μL复方卡波姆溶液方式造模，实验组大鼠在模型成功后再次随机分为3组，各组在高眼压1、2、3wk时间点分别处死并取材部分大鼠模型，观察视网膜和视神经病理结构、超微结构变化。

结果：实验组模型在1、2、3wk时间点均出现高眼压的视神经、视网膜损伤。电镜下正常视神经轴索、髓鞘结构完整，无明显溶解情况； 高眼压下的视神经轴索消失，髓鞘排列紊乱，阶段性溶解或脱髓鞘变性，胶质细胞增生。光镜下正常视网膜各层结构分明，各层无明显水肿，未见炎症细胞； 高眼压下的视网膜细胞排列紊乱，外核层增厚，内、外丛状层增厚，内核层增厚，出现空泡状结构，节细胞数目减少，节细胞层和神经纤维层水肿，小胶质细胞增生，血管膜毛细血管扩张，出现炎症细胞。电镜下正常视网膜细胞器结构较为完整，无明显细胞增生，线粒体结构正常，膜盘结构较为完整； 高眼压下视网膜节细胞层小胶质细胞增生，节细胞结构模糊，细胞器结构消失； 细胞凋亡，线粒体肿胀，胞浆空泡变性，视细胞外节膜盘断裂或溶解； 并且损伤程度与高眼压时间呈正比。

结论：高眼压模型的视网膜、视神经形态学改变证明，复方卡波姆溶液前房注射构建高眼压模型成功。]]> 2018/1/19 9:47:41 86true 目的：检测琥珀酸甲泼尼龙(methylprednisolone sodium succinate，MPS)兔眼球周注射后，MPS和其在眼内的代谢产物甲泼尼龙(methylprednisolone，MP)的分布及药代动力学情况。

方法：兔眼球周注射琥珀酸甲泼尼龙钠10mg，采用质谱-液相色谱方法检测MPS和MP在巩膜、脉络膜和视网膜、玻璃体、虹膜、房水、晶状体、视神经和血浆中的浓度。

结果：球周注射琥珀酸甲泼尼龙钠后， MPS浓度在眼内组织中的达峰时间为注药后0.25～1h，在血浆中的达峰时间为注药后0.25h； MP浓度在眼内组织中的达峰时间为0.5～6h，在血浆中的达峰时间为注药后0.5h。MPS和MP在眼内各组织的达峰浓度由高到低依次为巩膜、视神经、脉络膜和视网膜、虹膜、晶状体，二者在晶状体内的浓度均为所有眼部组织中最低，且远远低于眼内其它组织的含量，但平均驻留时间最长。

结论：球周注射MPS是一种有效的向眼组织传递药物的方式，且该药在眼内的分布有利于向巩膜、视神经和脉络膜视网膜给药，而不易被晶状体吸收。]]> 2018/1/19 9:47:41 85true 目的：探讨白藜芦醇对高糖环境下视网膜血管内皮细胞线粒体DNA的影响及机制。

方法：人视网膜血管内皮细胞培养于正常或高糖环境，提取细胞基因组DNA，Real-time PCR检测线粒体DNA 拷贝数，研究白藜芦醇对高糖培养的视网膜血管内皮细胞线粒体DNA的影响。通过Western-blot及免疫共沉淀检测线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A，TFAM)表达及PGC-1α乙酰化。

结果：高糖对视网膜血管内皮细胞线粒体DNA的拷贝数有明显的抑制作用，白藜芦醇能够降低视网膜血管内皮细胞PGC-1α的乙酰化，提高TFAM的表达，增加线粒体DNA的拷贝数。

结论：白藜芦醇可能通过激活PCG-1α-TFAM信号通路改善高糖环境下视网膜血管内皮细胞的线粒体功能。]]> 2017/12/18 10:32:18 84true 目的：从蛋白分子水平分析天麻钩藤饮抗大鼠视神经夹伤模型视网膜神经节细胞凋亡的机制。

方法：将所有大鼠36只随机分为天麻钩藤饮低剂量组(0.6g/mL，n=6)、中剂量组(1.2g/mL，n=6)、高剂量组(2.4g/mL，n=6)、正常对照组(n=6)、阴性对照组(n=6)和银杏叶片阳性对照组(1.2mg/mL，n=6)共6组，再将30只SPF级雄性Wistar大鼠(除正常对照组外其余五组)制备成视神经夹伤模型。检测N-甲基-D-天冬氨酸2B(N-methyl-D-aspartic acid receptor 2B，NMDA2B)受体蛋白平均灰度值和β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein，Aβ)平均灰度值。

结果：天麻钩藤饮低、中、高剂量组NMDA2B受体蛋白平均灰度值较阴性对照组明显减少(P<0.001)，并与阳性对照组比较差异无统计学意义(P=0.320)，正常对照组与阴性对照组具有显著性差异(P<0.001)。天麻钩藤饮中、高剂量组β-淀粉样蛋白平均灰度值较阴性对照组明显减少(P=0.086、0.001)； 低浓度组较阴性对照组减少，但差异无统计学意义(P=0.614)； 其中高剂量组和阳性对照组之间比较，差异无统计学意义(P=0.376)； 正常对照组与阴性对照组比较，差异有统计学意义(P<0.001)。

结论：天麻钩藤饮可以通过下调NMDA2B受体蛋白的表达和控制β-淀粉样蛋白的沉积来减少视网膜神经节细胞的损伤和凋亡，并以此机制对视网膜神经节细胞起到一定的保护作用。]]> 2017/12/18 10:32:19 83true 目的：研究p75 NTR受体在视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cells，RPE)氧化损伤过程中的作用及机制。

方法：将转染p75 NTR受体的RPE细胞作为实验组，未转染的RPE细胞作为对照组。BrdU检测法检测细胞增殖活性； PI/Annexin V-FITC双染法检测细胞凋亡率； 激光显微镜观察细胞内ROS的表达情况； 流式细胞仪检测细胞内ROS、线粒体标志物、细胞色素C表达水平； Western blot法检测细胞中Fas蛋白、裂解Caspase-3、VEGF165蛋白的表达水平。

结果：随着p75 NTR受体转染时间的延长，实验组RPE细胞的增殖活性呈逐渐降低趋势，各转染时间点的RPE细胞增殖活性比较，差异有统计学意义(P<0.05)； 实验组各转染时间点的RPE细胞增殖活性均明显低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。随着转染时间的延长，实验组RPE细胞凋亡率呈逐渐增加趋势，各转染时间点的RPE细胞凋亡率比较，差异有统计学意义(P<0.01)； 实验组各转染时间点的RPE细胞凋亡率均明显高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.01)。实验组ROS荧光信号明显强于对照组。流式细胞仪检测结果显示，实验组RPE细胞中ROS、细胞色素C水平均明显高于对照组，线粒体标志物水平明显低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.01)。Western blot 法检测结果表明，实验组细胞内Fas蛋白、Caspase-3、VEGF₁₆₅蛋白的表达水平均明显高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.01)。

结论：p75 NTR受体高表达可导致RPE细胞线粒体发生损伤，同时促进细胞凋亡，最终导致脉络膜新生血管的形成，表明p75 NTR受体可能是导致RPE细胞发生损伤的因素之一。]]> 2017/12/18 10:32:19 82true 目的：探讨硫化氢(H₂S)对糖尿病性白内障大鼠氧化应激的作用及其作用机制是否涉及调控沉默信息调节因子1(SIRT1)。

方法：将SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、低浓度NaHS组、高浓度NaHS组、单用NaHS组。NaHS作为H₂S的供体。糖尿病模型组、低浓度NaHS组、高浓度NaHS组大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin， STZ，65mg/kg)建立糖尿病大鼠模型。采用BQ900裂隙灯观察各组大鼠晶状体的变化。自实验开始12wk后，采用硫代巴比妥酸法检测MDA的含量，黄嘌呤氧化酶法检测SOD 的含量，二硫代二硝基苯甲酸法检测GSH-Px的含量； Western blotting检测大鼠晶状体SIRT1的表达。

结果：糖尿病组大鼠晶状体出现不同级别的混浊，表明糖尿病性白内障大鼠模型复制成功。分别予低浓度NaHS、高浓度NaHS治疗后糖尿病大鼠晶状体混浊程度得到明显改善。与糖尿病模型组相比，分别给予低浓度NaHS、高浓度NaHS治疗的糖尿病大鼠晶状体MDA的含量明显下降，SOD和GSH-Px的水平显著增加。此外，Western blotting结果显示糖尿病模型组大鼠晶状体SIRT1的表达明显下调，分别予低浓度NaHS、高浓度NaHS治疗能有效逆转该趋势。

结论：H₂S能够抑制糖尿病性白内障大鼠氧化应激水平，其机制可能涉及上调SIRT1的表达。]]> 2018/11/19 14:44:07 81true 目的：研究叉头框转录因子O4(FOXO4)对高糖环境下视网膜血管内皮细胞氧化应激和凋亡的影响。

方法：以高糖培养人视网膜血管内皮细胞，Real-Time PCR和Western blot检测细胞中FOXO4表达变化。以FOXO4 RNAi慢病毒、对照载体慢病毒感染视网膜血管内皮细胞，以高糖培养液培养，Real-Time PCR和Western blot检测干扰效率。收集培养液上清和细胞，用试剂盒检测培养液上清中超氧化物歧化酶(superoxide orgotein dismutase，SOD)活性、丙二醛(malonaldehyde，MDA)含量和细胞中活性氧(reactive oxygen species，ROS)水平。流式细胞术测定细胞凋亡变化，Western blot检测细胞中凋亡蛋白Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9的表达变化。

结果：高糖处理后的视网膜血管内皮细胞中FOXO4表达上调，FOXO4 RNAi慢病毒感染下调高糖环境下视网膜血管内皮细胞中FOXO4表达水平，对照载体慢病毒对细胞中FOXO4表达水平没有影响。高糖诱导视网膜血管内皮细胞中ROS水平升高，降低细胞培养液中SOD活性，提高MDA含量，增加细胞凋亡率，促进细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达。下调FOXO4表达的视网膜血管内皮细胞经高糖诱导后，细胞培养液中的SOD活性升高，MDA水平降低，细胞中ROS水平降低，细胞凋亡减少，细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白水平降低，与未干扰FOXO4表达的视网膜血管内皮细胞比较，差异有统计学意义(P<0.05)。

结论：高糖诱导视网膜血管内皮细胞表达FOXO4，敲低其表达降低高糖诱导的细胞氧化应激和凋亡水平。]]> 2018/11/19 14:44:08 80true 目的：观察双丹明目胶囊对糖尿病大鼠模型视网膜VEGF家族因子VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c蛋白表达的影响。

方法：将40只雄性SD大鼠，采用随机数字法分为A空白组、B模型组、C双丹明目组、D阳性对照组4组，每组10只20眼。将B、C、D三组实验大鼠采用STZ 50mg/kg的剂量一次性大鼠尾静脉注射法建立糖尿病视网膜病变大鼠模型，造模后1wk开始连续灌胃用药，灌胃后4wk，处死动物，免疫组化法检测视网膜组织中VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c的表达。

结果：成模后用药第4wk，模型组、双丹明目组、阳性对照组视网膜中VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c蛋白表达平均灰度值均低于正常组，平均光密度均高于正常组，其中模型组与正常组比较，差异均具有统计学意义(P<0.01)； 双丹明目组、阳性对照组VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c表达的平均灰度值均高于模型组(P<0.05)，平均光密度值均低于模型组(P<0.01)。

结论：双丹明目胶囊能明显降低VEGF家族中VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c在糖尿病模型大鼠视网膜中的表达，对其视网膜有一定的保护作用。]]> 2018/10/22 14:57:10 79true 目的：研究锌对半乳糖诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells，HLEC)凋亡的影响。

方法：将培养的SRA01/04细胞系分为六组，对照组、半乳糖处理组、补锌组、补锌联合半乳糖处理组、缺锌组、缺锌联合半乳糖处理组。采用MTT法检测半乳糖对HLEC存活率的影响，荧光显微镜和流式细胞仪分别检测各实验分组细胞核形态和细胞凋亡率水平的变化。

结果：不同浓度半乳糖(0、25、50、75、100、125mmol/L)处理HLEC细胞后，细胞存活率分别为(100.0±5.4)%、(97.5±3.2)%、(91.3±5.3)%、(93.4±0.6)%、(86.6±1.4)%和(83.5±0.4)%，与未处理细胞相比，半乳糖浓度为100、125mmol/L时，细胞存活率显著下降，差异有统计学意义(P<0.05)。荧光显微镜结果显示对照组和补锌组的细胞核呈现均一的染色，半乳糖处理组、补锌联合半乳糖处理组、缺锌组和缺锌联合半乳糖处理组中一些细胞的细胞核收缩，表现出典型的细胞凋亡形态。各组的细胞凋亡率分别为(1.5±0.1)%、(7.1±0.2)%、(1.4±0.1)%、(4.4±0.2)%、(5.5±0.2)%和(15.8±0.3)%。与对照组相比，半乳糖处理组、补锌联合半乳糖处理组、缺锌组和缺锌联合半乳糖处理组的细胞凋亡率显著增加，差异有统计学意义(P < 0.05)。与半乳糖处理组相比，补锌联合半乳糖处理组的细胞凋亡率显著下降，差异有统计学意义(P<0.05)，缺锌联合半乳糖处理组的细胞凋亡率则显著升高，差异有统计学意义(P<0.05)。

结论：补锌可以保护人晶状体上皮细胞抵抗由半乳糖引起的细胞凋亡，可能对白内障的形成有抑制作用。]]> 2018/9/14 16:29:44 78true 方法：取传代至第3代的细胞进行分组：(1)对照组：含100mg/L BSA的DMEM培养基培养48h；(2)AGEs干预组：含200mg/L AGEs的DMEM培养基培养48h；(3)PM组：PM1组：含16mg/L PM+200mg/L AGEs的DMEM培养基培养48h； PM2组：含32mg/L PM+200mg/L AGEs的DMEM培养基培养48h。采用免疫组织化学法检测RAGE蛋白的表达； 荧光染色法观察细胞内ROS的生成； Tunel法检测细胞凋亡情况。

结果：AGEs可明显刺激RPE细胞内RAGE蛋白的表达和ROS的生成，增加细胞凋亡情况，而PM可抑制该过程，且具有一定的浓度依赖性。

结论：PM能够抑制AGEs干预的RPE细胞内RAGE蛋白的表达和ROS生成，减少细胞凋亡，具有一定的细胞保护作用。]]> 2018/9/14 16:29:44 77true 目的：观察不同月龄阿尔茨海默病(AD)模型小鼠视网膜Aβ斑阳性率与AD病程的相关性。

方法：6、12月龄APP/PS1模型小鼠各6只，同月龄同背景非转基因C57小鼠各6只为正常对照。各组小鼠均进行水迷宫实验，检测空间学习记忆能力。姜黄素溶液连续灌胃3d，对24只48眼小鼠行眼底自发荧光照相检查，观察视网膜Aβ斑。

结果：水迷宫试验：与6月龄对照组(C6)相比，6月龄AD模型小鼠(AD6)游行时间显著增加(P<0.05)，游行路径长度及穿越站台次数也显著增加(P>0.05)； 与12月龄对照组(C12)相比，12月龄AD模型小鼠(AD12)游行持续时间、路径长度均显著增加(P<0.05)，穿越站台次数也显著增加(P>0.05)； 12月龄AD小鼠(AD12)与6月龄AD模型(AD6)小鼠相比，12月龄AD小鼠(AD12)游行持续时间、路径长度及穿越站台次数均显著增加(P<0.05)。姜黄素标记联合眼底自发荧光照相结果：AD6、AD12的视网膜后极部检测到了Aβ斑：6月龄AD模型小鼠中有2只小鼠出现了视网膜Aβ斑，视网膜Aβ斑阳性率为33%； 12月龄AD模型小鼠中有6只小鼠出现了视网膜Aβ斑，视网膜Aβ斑阳性率为100%； C6、C12均未检测出视网膜Aβ斑； 12月龄AD模型小鼠眼底Aβ斑阳性率明显高于6月龄AD模型小鼠(P<0.05)。

结论：6月龄AD模型小鼠已有认知功能障碍，且随着病程的延长病情逐渐加重，视网膜Aβ斑的阳性率也逐渐增加。]]> 2018/9/14 16:29:45 76true 目的：通过光学相干断层扫描血管造影，对小鼠角膜上皮和角膜全层厚度进行检测并分析埃罗替尼对其的影响。

方法：随机均分20只小鼠为埃罗替尼组和PBS组，制备埃罗替尼滴眼液，分别应用埃罗替尼滴眼液和PBS，于每日8：00、12：00、16：00和20：00对2组小鼠点眼。在点眼前、点眼后1、2、3wk应用OCTA测量角膜17个区域的上皮和角膜全层厚度。

结果：点眼前埃罗替尼组与PBS组各区域角膜上皮和角膜全层厚度比较无差异(均P>0.05)； 点眼后第2wk，埃罗替尼组小鼠角膜上皮和角膜全层的17个区域中M、T5、IT5、I5、IN5、N5、T6、IT6、I6、IN6、N6区域与PBS组相比均明显增厚(均P<0.05)。第3wk，埃罗替尼组小鼠角膜上皮和角膜全层厚度的17个区域与PBS组相比均明显增厚(均P<0.05)； 埃罗替尼组和PBS组经处理2、3wk后，各组间角膜上皮厚度和角膜全层厚度平均值相比有差异(均P<0.05)； 通过角膜上皮和角膜全层厚度平均值变化趋势分析，埃罗替尼组与PBS组均有差异(均P<0.05)。

结论：利用OCTA可以发现埃罗替尼具有使角膜上皮和角膜全层增厚的作用，且随着应用次数的增多，其效果越明显。]]> 2019/8/23 9:51:20 75true 目的：初步建立非肥胖性糖尿病(NOD)小鼠蒸发过强型干眼模型，通过研究小鼠眼表组织病理变化，初步探讨其作为糖尿病性干眼模型的可行性。

方法：选取40只雌性NOD小鼠，NOD小鼠自发糖尿病为实验组，同时选取未自发糖尿病的NOD小鼠作为正常对照组。实验组NOD小鼠置于40%以下湿度环境，每天皮下注射0.5mg/0.2mL氢溴酸菪胺，并置于可控干燥箱中，每天通风12h，制作蒸发过强型干眼模型。在造模后的第1、7、10、14d采用酚红棉线实验测量泪液分泌量，PAS染色检查结膜杯状细胞形态和数目； 在造模后的第10d，进行角膜组织苏木精染色检测角膜上皮变化情况。

结果：实验组NOD小鼠泪液分泌量随造模时间而逐渐降低，正常对照组未有明显变化。实验组的结膜杯状细胞体积变大，在造模后的第1d，杯状细胞密度较正常对照组减少(P=0.008)，从造模后第7d开始，随时间延长，实验组杯状细胞数量逐渐减少，且较同一时间点正常对照组显著减少(均P<0.001)。此外，观察两组第10d的角膜上皮情况，实验组NOD小鼠角膜上皮层变薄，部分角膜上皮细胞变性、基底细胞水肿。

结论：初步建立了NOD小鼠干眼模型，其眼表变化与临床上干眼症表现类似。]]> 2019/7/25 14:32:55 *,李春华^*,李正日,李承霖,金海燕,任宁,汝新宇,李英俊]]> 74true 目的：探索制作可以自动控制氧浓度的小鼠饲养箱的可行性，为制作早产儿视网膜病变模型提供帮助。

方法：用粘合剂将有机玻璃粘合成透明密闭玻璃箱，前面设置开口便于放入和取出饲养小鼠的笼子，侧面设通风口，KY-2F型数字显示控氧仪置于玻璃箱顶部，其氧气探头和通过电磁阀的送气管从玻璃箱顶部接入箱内，连接控氧仪和电磁阀，用视网膜铺片和HE染色两种方法验证造模效果。

结果：氧箱饲养的C57BL/6J新生小鼠第17d视网膜形成无灌注区并有新生血管生成，HE染色示视网膜新生血管突破内界膜。

结论：本方法制作的可控制氧浓度的小鼠饲养箱简单易做、效果可靠。]]> 2019/6/21 10:08:46 73true 目的：研究芪三酚对糖尿病白内障模型大鼠体质量和生化指标的影响。

方法：将30只大鼠分为空白组、模型组、治疗组各10只。空白组大鼠不做处理，模型组、治疗组大鼠进行建模，使用芪三酚对治疗组大鼠进行干预，并对各组大鼠晶状体混浊情况、体质量、身长及生化指标水平进行检测，对三组大鼠右眼眼球进行HE染色。

结果：空白组大鼠晶状体透明，无混浊现象； 治疗组大鼠晶状体混浊程度和白内障整体评分均优于模型组(P<0.05)； 第3、5wk时，治疗组大鼠体质量、身长高于模型组，空腹血糖(FPG)和餐后2h血糖(2hPG)水平低于模型组(P<0.05)； 5wk后，相比模型组大鼠，治疗组各项生化指标水平均明显改善(P<0.05)。

结论：芪三酚能够改善糖尿病白内障大鼠晶状体混浊程度，减轻疾病对大鼠体质量的影响，调控大鼠血糖、生化指标水平，缓解白内障进展。]]> 2019/6/21 10:08:46 72true 目的：探讨基因修饰诱导骨髓间充质干细胞分化治疗视神经损伤的效果。

方法：将带有大鼠睫状神经营养因子(CNTF)编码序列的慢病毒转染进入从大鼠股骨中分离出的骨髓间充质干细胞。将采用钳夹视神经方法构建的视神经损伤模型大鼠随机分为对照组和研究组，分别于造模成功后第4、7、10、13d，研究组术眼玻璃体腔内注入经转染的骨髓间充质干细胞悬浮液，对照组术眼玻璃体腔注入等量生理盐水。造模成功后第14d，观察两组大鼠的光反射情况，视网膜神经节细胞数量及胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和Caspase-3蛋白表达水平。

结果：研究组大鼠光反射恢复率明显高于对照组(83% vs 25%，P<0.05)，视网膜细胞结构相对整齐，可见少量空泡，而对照组大鼠视网膜细胞结构欠整齐，可见明显空泡，视网膜神经节细胞数明显减少，且对照组大鼠视网膜GFAP和Caspase-3蛋白表达水平均高于研究组。

结论：基因修饰诱导骨髓间充质干细胞分化能够有效治疗大鼠视神经损伤。]]> 2019/5/22 14:15:43 71true 目的：探讨诱导兔部分性角膜缘干细胞失代偿(limbal stem cell deficiency，LSCD)动物模型的一种新方法。

方法：分别采用C57小鼠和新西兰白兔制作完全性和部分性角膜缘干细胞失代偿动物模型。小鼠(n=30)采用1mol/L氢氧化钾溶液浸泡的滤纸片(直径3mm)置于左眼中央角膜表面30s，随后用生理盐水冲洗。白兔(n=19)切除瞬膜(第三眼睑)后，采用1mol/L氢氧化钾溶液浸泡的滤纸片(直径5mm)置于左眼颞上方角膜表面30s，随后用生理盐水冲洗。烧伤眼术后采用0.5%盐酸左氧氟沙星滴眼液4次/d。烧伤前、烧伤后第1、2、4wk，2mo采用裂隙灯显微镜观察、摄像，记录角膜溃疡、穿孔等并发症。术后2mo采用印迹细胞学检测角膜杯状细胞分布，根据裂隙灯显微镜检查所见和角膜印迹细胞学检查判断LSCD严重程度。术后2mo处死动物，角结膜切片观察角膜新生血管、杯状细胞分布。意外死亡动物不计入总数，计算并比较完全性LSCD和部分性LSCD的模型诱导成功率。

结果：30只小鼠中6只意外死亡，2只于烧伤后出现角膜穿孔，其余22只发生完全性LSCD，诱导成功率92%，烧伤后2mo小鼠角膜可见新生血管广泛分布于角膜浅层及深基质层，病理切片可见角膜新生血管。19只白兔，7只意外死亡，其余12只发生不同程度LSCD(部分性LSCD，平均累及1.17±0.39个象限)，未发生角膜穿孔情况，诱导成功率100%(P=0.543)。正常角膜区域无杯状细胞，LSCD区域角膜上皮印迹细胞学PAS染色可见杯状细胞，平均密度58.60±12.58个细胞/HP。

结论：中央角膜碱烧伤可以诱导产生完全性LSCD，部分动物会因为角膜溃疡穿孔而导致模型诱导失败，LSCD往往比较严重，且合并深层角膜新生血管。颞上方角膜碱烧伤可以诱导产生部分性LSCD，合并较少的角膜病变，角膜新生血管位于浅层。]]> 2019/4/22 9:40:42 70true 目的：研究结缔组织生长因子(CTGF)对原发性开角型青光眼(POAG)患者Tenon囊成纤维细胞(Tfb)增殖、移行和转化的影响。

方法：POAG患者的Tenon囊组织行组织块法培养出来的Tfb细胞分为2组：(1)对照组；(2)CTGF处理组：DMEM-F12培养液中分别加入终浓度为1.0、10.0、100.0ng/mL的CTGF。细胞处理24h后，分别用MTT法和细胞划痕法分别检测Tfb的增殖和移行，半定量RT-PCR法和免疫组织化学法分别检测Tfb中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA水平的变化和蛋白的表达。

结果：MTT法测得1.0、10.0、100.0ng/mL CTGF处理组的A值分别是0.436±0.009、0.643±0.009、0.679±0.006，对照组为0.423±0.156。细胞划痕法显示，细胞移行数分别为34.600±3.507、70.400±2.074、80.000±2.915个，对照组为31.000±3.536个。RT-PCR法得出不同浓度CTGF处理组α-SMA/β-actin条带吸光度比值分别为0.873±0.161、1.213±0.312、1.352±0.376，对照组是0.851±0.158。免疫组织化学法得出1.0、10.0、100.0ng/mL CTGF处理组阳性细胞的平均光密度值分别是0.110±0.026、0.141±0.017、0.175±0.027，对照组是0.108±0.020。上述所有观察指标10.0、100.0ng/mL CTGF组与对照组相比较均有差异(P<0.05)，而1.0ng/mL CTGF与对照组相比较均无差异(P>0.05)。

结论：CTGF能促进POAG患者Tfb的增殖、移行和表型转化，CTGF可能在滤过泡瘢痕化中扮演了重要作用。]]> 2019/4/22 9:40:43 69true 目的：研究黄连素对体外高糖环境下的SD大鼠视网膜Müller细胞增殖的影响。

方法：采用酶消化法原代培养SD大鼠视网膜Müller细胞，将第2代Müller细胞随机分为正常糖浓度(5mmol/L)组、高糖浓度(25mmol/L)组、高糖+不同浓度(5、10、25、50、100μmol/L)黄连素组，分别培养24、48、72h后，采用CCK-8法检测细胞增殖活性。

结果：培养24、48、72h时，高糖浓度组Müller细胞吸光度值较正常糖浓度组明显降低(均P<0.01)； 10、25、50、100μmol/L黄连素组细胞吸光度值较高糖浓度组明显升高(均P<0.05)，且呈剂量依赖性； 5μmol/L黄连素组细胞吸光度值与高糖浓度组无明显差异(P>0.05)。

结论：黄连素在一定程度上能够减轻高糖对Müller细胞增殖活性的抑制作用，其作用强度与黄连素浓度呈正相关。]]> 2019/4/22 9:40:43 68true 目的：探讨阿柏西普对体外培养的高糖环境下视网膜Müller细胞膜K⁺通道的影响。

方法：人Müller细胞分为3组：对照组(常规DMEM培养基培养)、高糖组(高糖DMEM培养基培养)、实验组(高糖DMEM培养基和100μmol/L 阿柏西普处理)。采用荧光探针检测细胞K⁺浓度，MTT法检测细胞存活率，流式细胞仪检测细胞凋亡率，Western blot法检测Müller细胞caspase-3蛋白水平。

结果：Müller细胞培养48h后呈现谷氨酰胺合成酶(GS)阳性，纯化度在90%以上。荧光检测显示对照组、高糖组、实验组K⁺相对浓度分别为(2.14±0.44)%、(23.11±4.39)%、(5.20±0.92)%，细胞存活率分别为(100.00±0.00)%、(73.24±4.13)%、(85.22±5.33)%，细胞凋亡率分别为(5.03±1.91)%、(26.73±3.14)%、(16.63±2.73)%(均P<0.05)。 与对照组相比，高糖组Müller细胞内caspase-3蛋白水平显著上升(P<0.05)； 与高糖组Müller细胞相比，实验组Müller细胞内caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.05)。

结论：阿柏西普可抑制体外培养的高糖环境下视网膜Müller细胞膜K⁺通道，抑制高糖诱导的Müller细胞凋亡，降低caspase-3蛋白表达水平，促进细胞增殖。]]> 2019/3/22 14:50:40 67true 目的：探究血管内皮生长因子(VEGF)及趋化因子受体3(CCR3)在翼状胬肉组织中的表达及意义。

方法：纳入行翼状胬肉切除联合自体结膜瓣移植术的患者18例18眼，术中取翼状胬肉组织； 行巩膜扣带环扎术的孔源性视网膜脱离患者14例14眼，术中取鼻侧球结膜组织。采用HE染色法观察翼状胬肉和正常结膜的组织学差异，采用免疫化学法分析VEGF和CCR3的表达水平，采用qRT-PCR法检测VEGF和CCR3 mRNA的表达水平。

结果：与正常结膜组织相比，翼状胬肉组织上皮层明显增厚，基质层组织排列紊乱，且VEGF(0.69±0.0875 vs 0.05±0.0024)和CCR3(0.45±0.0248 vs 0.03±0.0074)表达水平显著升高(均P<0.01)。翼状胬肉组织中VEGF mRNA表达水平约为正常结膜组织的12倍(12.33±2.84 vs 1.00±0.08)，CCR3 mRNA的表达水平约为正常结膜组织的160倍(159.60±34.15 vs 1.00±0.09)。

结论：翼状胬肉组织中VEGF和CCR3表达明显升高，提示二者可能参与翼状胬肉的发生，促进疾病的发展。]]> 2019/3/22 14:50:40 66true 目的：检测白塞氏病(BD)患者和正常人群血浆中微小核糖核酸(microRNA，miRNA)的差异表达谱，探讨miRNA在BD发病中的作用，寻找与BD相关的血浆生物标记物。

方法：收集15例活动期BD患者和15例正常人的抗凝静脉血，离心获得血浆，提取总RNA，经miRNA标记、miRNA阵列杂交、miRNA阵列扫描和分析获得BD患者异常表达的miRNA谱。通过miRTarBase(靶基因数据库)检索差异性表达的miRNA已经过验证的靶基因，并选取与免疫学相关的差异性表达的miRNA进行Real time-PCR验证。

结果：活动期BD患者血浆中hsa-miR-34c-5p、hsa-miR-144-3p、hsa-miR-483-3p较正常人表达上调，hsa-miR-301a-3p、hsa-miR-224-5p、hsa-miR-454-3p、hsa-miR-17-5p、hsa-miR-199a-5p较正常人表达下调。

结论：miRNA的差异性在BD的发生发展过程发挥重要作用，异常表达的miRNA可能通过Notch1和SMAD4信号通路促进BD发病。]]> 2018/12/17 9:54:34 65true 目的：评价橙皮苷对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞(HPF)增殖的抑制作用及对周期蛋白D(cyclin D)表达的影响。

方法：将人翼状胬肉新鲜组织进行体外贴壁细胞常规培养，并采用免疫荧光染色法进行鉴定。通过MTT法检测不同浓度丝裂霉素C(MMC)(1.5、7.5、30.0μmol/L)和橙皮苷(24、48、64、72、96、120μmol/L)作用不同时间(24、48、72h)对细胞增殖的抑制，筛选适宜的作用浓度和时间。采用Western blot法检测cyclin D在HPF细胞中的相对表达量。

结果：分别采用48、72μmol/L橙皮苷和7.5μmol/L MMC作用于HPF细胞48h，Western blot检测结果显示，空白对照组(正常培养)、MMC组、48μmol/L橙皮苷组、72μmol/L橙皮苷组细胞cyclin D蛋白相对表达量分别为1.20±0.02、0.60±0.03、0.54±0.02、0.45±0.07(F=73.025，P=0.001)，MMC组和橙皮苷组细胞cyclin D蛋白相对表达量均低于空白对照组(P<0.05)，但MMC组和橙皮苷组(48、72μmol/L)细胞cyclin D蛋白相对表达量均无差异(P>0.05)。

结论：橙皮苷能抑制翼状胬肉HPF细胞增殖，该过程与其降低cyclin D的表达有关。]]> 2019/11/21 15:09:55 64true 目的：探究白皮杉醇对糖尿病视网膜病变模型大鼠的治疗效果及作用机制。

方法：建立糖尿病视网膜病变模型，随机分为模型组、常规用药组、低剂量和高剂量白皮杉醇组各10只。模型组使用100mg/kg的生理盐水灌胃，常规用药组使用100mg/kg的依帕司他灌胃，低剂量、高剂量白皮杉醇组分别使用100、200mg/kg白皮杉醇灌胃。使用光学显微镜观察五组大鼠视网膜组织，Western blot检测五组大鼠视网膜组织中Bax、Bcl-2蛋白的表达，酶联免疫吸附试验法检测五组大鼠视网膜组织VEGF、HIF-1α、ANGⅡ、Ang-1、Ang-2、Tie-2水平。

结果：高剂量白皮杉醇组大鼠视网膜组织中Bax、Ang-1/Ang-2比值(1.76±0.05、3.16±0.09)高于低剂量白皮杉醇组(1.01±0.21、2.98±0.02)(P<0.05)。高剂量白皮杉醇组大鼠视网膜组织中Bcl-2、VEGF、HIF-1α、ANGⅡ、Ang-1、Ang-2、Tie-2水平(0.37±0.06ng/mL、121.89±5.45ng/mL、0.38±0.01pg/mL、7.58±0.10ng/mL、8.56±0.04μg/L、3.24±0.25μg/L、3.00±0.04μg/L)低于低剂量白皮杉醇组(0.96±0.21ng/mL、140.25±8.10ng/mL、0.42±0.02pg/mL、8.12±0.09ng/mL、9.10±0.46μg/L、4.12±0.23μg/L、3.46±0.15μg/L)(P<0.05)。

结论：白皮杉醇通过作用于Ang/Tie受体信号通路，抑制氧化应激损伤、新生血管的生成，有效保护糖尿病视网膜病变大鼠的视网膜组织，且呈剂量依赖，为临床上治疗糖尿病视网膜病变的治疗提供了理论依据。]]> 2019/11/21 15:09:56 63true 目的：研究角膜碱烧伤后基质损伤修复病程中多形核中性白细胞(PMNs)的浸润和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达的关系。

方法：建立25只家兔角膜碱烧伤模型，分别于伤后3、7、14、21、28d随机处死5只兔，裂隙灯下观察角膜病理修复情况，摘除角膜做病理切片，测定PMNs的浸润量值。免疫组化法测定MMP-9的表达。

结果：PMNs和MMP-9在角膜碱烧伤后的3d开始升高，14d上升达到最大峰值，之后逐渐降低，碱烧伤后角膜基质在第14d溃疡面积及深度最为严重。

结论：角膜碱烧伤病灶中PMNs和MMP-9的量值呈正相关，且角膜的病理损伤与PMNs的浸润和MMP-9的表达密切相关。]]> 2019/10/23 15:17:25 62true 目的：评价地塞米松不同途径给药对2型糖尿病(T2DM)大鼠房水药物浓度和血糖的影响。

方法：将造模成功的T2DM大鼠随机分为实验组(注射地塞米松磷酸钠)和对照组(注射生理盐水)，每组根据给药途径不同随机分为球旁注射组、球后注射组、结膜下注射组三个亚组。注射0～24h采集大鼠尾静脉血经试纸法测定血糖浓度，注射0.5～24h，采用高效液相-质谱法测定大鼠双眼房水内地塞米松浓度。

结果：不同途径注射地塞米松磷酸钠或生理盐水对T2DM大鼠血糖浓度的影响无明显差异(P>0.05)。不同途径注射地塞米松磷酸钠后0.5～24h，实验组大鼠双眼房水地塞米松浓度峰值：结膜下注射组(957.34±3.60ng/mL)>球后注射组(859.60±3.56ng/mL)>球旁注射组(732.38±4.56ng/mL)。

结论：球旁、球后、结膜下注射地塞米松磷酸钠对T2DM大鼠血糖影响无明显差异，而结膜下注射操作简单，较球旁和球后注射可在短时间内达到较高的药物浓度。]]> 2019/10/23 15:17:26 61true 目的：观察甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)在同型半胱氨酸(Hcy)环境下对人晶状体上皮细胞(HLEC)的保护作用。

方法：构建BHMT基因过表达慢病毒载体，将体外培养的HLEC随机分为3组：正常组：正常培养的HLEC； 对照组：感染了空载体的HLEC-B3，BHMT过表达组(OE)：感染了过表达BHMT基因载体的HLEC-B3，均培养于10% FBS(胎牛血清)培养基+5mmol/L Hcy培养液中。应用EdU(5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷)试剂盒检测细胞的增殖能力，流式细胞仪检测活性氧(ROS)含量，可见分光光度计测算谷胱甘肽(GSH)活性，Western blotting检测内质网应激相关蛋白(GPR78，Nrf2)及凋亡相关酶Caspase-12的表达。

结果：BHMT过表达组较对照组细胞增殖能力增长约30.0%(P<0.05)。ROS检测显示，正常组、对照组、过表达组荧光强度分别为(89.2043±0.3511)%、(91.4502±0.0606)%、(49.5625±0.4502)%，过表达组与正常组有差异(P<0.05)； GSH活性检测显示：相比于正常组与对照组，BHMT高表达组GSH活性明显上升(P<0.05)； Western blotting结果显示：GRP78的相对表达量在正常组及对照组中明显高于过表达组，Nrf2的相对表达量在正常组与对照组中明显低于过表达组。凋亡相关酶Caspase-12的相对表达量在过表达组中明显低于对照组。

结论：BHMT可以抑制Hcy对HLEC的氧化损伤作用，降低ROS水平，升高GSH活性，减轻内质网应激反应，抑制细胞凋亡。BHMT对Hcy诱导的HLEC氧化损伤有重要的保护作用。]]> 2019/9/20 14:45:17 60true 目的：探讨飞燕草素(Dp)防护光诱导的视网膜氧化应激损伤的机制。

方法：将661W感光细胞经2 000Lx光照(48h)和/或不同浓度Dp(5、10、20μmol/L，24h)处理，分别测定细胞活性和乳酸脱氢酶(LDH)活力、硫代巴比妥酸活性物质(TBARS)含量及抗氧化酶系[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)]活性。将健康SD大鼠经3 000Lx光照(24h)和/或Dp\〖100mg/(kg·d)，灌胃4wk\〗处理后，观察视网膜的组织结构和氧化应激指标(SOD、GSH-Px、GST)变化。

结果：细胞实验结果表明，光照后细胞活性显著降低，细胞LDH活力和TBARS含量升高，抗氧化酶系活性下降，而Dp处理能提高光照后细胞的活力，降低细胞LDH活力和TBARS含量，提高抗氧化酶系活性。动物实验结果表明，Dp可保护大鼠视网膜结构的完整性，降低视网膜组织中TBARS含量，升高SOD、GSH-Px、GST活性。

结论：Dp可能通过调控氧化-抗氧化系统有效防护光化学因素导致的视网膜损伤。]]> 2019/9/20 14:45:18 59true 目的： 探讨褪黑素对大鼠糖尿病视网膜病变的影响及其机制。

方法： 选用健康雄性SD大鼠40只，随机分为4组，正常对照组、糖尿病组、低剂量褪黑素组和高剂量褪黑素组，HE染色观察视网膜结构改变，电镜观察视网膜神经节细胞超微结构变化，黄嘌呤氧化酶法检测视网膜组织中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平，Western Blot检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)，Bcl-2相关X蛋白(Bax)及P53的蛋白表达水平。

结果： HE染色结果显示，正常对照组大鼠视网膜组织结构清晰，糖尿病组大鼠视网膜组织层次欠清晰，神经纤维层水肿，低剂量褪黑素组视网膜细胞分层基本分明，层间细胞排列较整齐，内外核层排列稍紊乱，高剂量褪黑素组大鼠视网膜组织结构较低剂量褪黑素组进一步改善； 电镜观察结果显示，与糖尿病组比较，褪黑素组大鼠视网膜神经节细胞形态均不同程度改善； 黄嘌呤氧化酶法检测结果显示，褪黑素组大鼠视网膜组织中SOD水平高于糖尿病组，MDA水平低于糖尿病组(均P<0.05)； Western Blot结果显示，低、高剂量褪黑素组与糖尿病组比较，Bcl-2蛋白表达逐渐升高，Bax、P53蛋白表达明显降低(均P<0.05)。

结论：褪黑素可改善糖尿病大鼠视网膜形态变化，对糖尿病视网膜病变有一定抑制作用。]]> 2019/9/20 14:45:18 58true 目的：探讨地塞米松联合葡萄糖高渗液对兔眼角膜内皮的保护作用。

方法：健康日本大耳白兔20只40眼按随机数字表法分为A、B、C、D四组，各组均予以平衡盐溶液与灭菌注射用水按3：7配成的低渗液维持前房灌注10min建立角膜水肿动物模型，A组造模后立即予以地塞米松注射液0.2mL结膜下注射、高渗葡萄糖液点眼，B组造模后立即予以0.9%生理盐水0.2mL结膜下注射、平衡盐溶液点眼，C组造模后第2d予以地塞米松注射液0.2mL结膜下注射、高渗葡萄糖液点眼，D组造模后第2d予以0.9%生理盐水0.2mL结膜下注射、平衡盐溶液点眼。造模后第1、3、5、7d在裂隙灯下观察兔眼角膜水肿情况，角膜内皮仪测量角膜内皮细胞计数，前节OCT检查角膜，并用A超测量角膜中央厚度。

结果：A组兔眼在整个实验观察期间角膜无水肿或仅轻度水肿，角膜中央厚度几乎未增加，角膜内皮细胞数无明显变化，与造模前相比均无明显差异(P>0.05)； B、C、D组兔眼造模后角膜均出现不同程度水肿，角膜厚度增加，与A组比较有明显差异(P<0.05)，且B、D组兔眼由于角膜水肿在观察期间无法测出角膜内皮细胞数，C组至造模后第7d可测出角膜内皮细胞数，但较造模前及A组造模后第7d角膜内皮细胞数均明显减少(P<0.05)。

结论：地塞米松注射液联合葡萄糖高渗液对兔眼角膜内皮细胞有良好的保护作用，早期联合应用能有效预防及治疗角膜水肿，避免进展至角膜内皮失代偿。]]> 2020/8/19 19:18:37 57true 目的： 研究高糖环境对人角膜上皮细胞损伤修复的影响，初步探讨Cyclin D1蛋白在高糖培养的角膜上皮细胞创伤愈合中表达的意义。

方法： 模拟糖尿病角膜病变的高糖微环境，人角膜上皮细胞经复苏、培养传代后，分别设置等体积蒸馏水的DMEM完全培养基的正常对照组和含25mmol/L葡萄糖的DMEM完全培养基高糖处理组的两组细胞，细胞长满后进行划伤刺激，倒置相差显微镜下观察比较各组细胞生长状况及其变化，于不同时间点(0、12、24、48和72h)利用Western blot检测分析高糖培养的角膜上皮细胞中Cyclin D1蛋白的表达，qRT-PCR检测Cyclin D1 mRNA水平相对表达情况。

结果： 体外高糖处理条件下，人角膜上皮细胞划伤后修复速度减慢，漂浮细胞增多，细胞重新贴壁少，细胞间距增加，随着高糖处理时间的延长，细胞状态变差，生长速度慢； 正常组细胞损伤修复较快， 细胞密度增大，且形态规则，细胞膜光滑。Western blot 检测划伤刺激上调Cyclin D1的表达，但随着时间延长上调作用呈逐渐减弱，两组Cyclin D1最高表达量均出现在12h。高糖处理组Cyclin D1表达量低于正常对照组。qRT-PCR结果显示：高糖处理后，Cyclin D1 mRNA表达呈上调趋势，但随着高糖处理时间延长，上调作用减弱，且在48h处mRNA水平恢复至与对照组同一水平。

结论： 在角膜上皮细胞创伤愈合过程中，高糖呈负性调节，抑制Cyclin D1蛋白的表达，且与角膜上皮细胞增殖能力下降及凋亡相关。]]> 2020/8/19 19:18:37 56true 目的：研究miR-221对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞(HRCECs)凋亡的影响，并探讨其作用机制。

方法：用葡萄糖30mmol/L处理HRCECs 48h建立高糖诱导的HRCECs细胞； 将HG+miR-NC组(转染miR-NC)、HG+miR-221组(转染miR-221 mimics)、HG+anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、HG+anti-miR-221组(转染anti-miR-221)、HG+miR-221+pcDNA 3.1组(共转染miR-221 mimics和pcDNA 3.1)、HG+miR-221+pcDNA 3.1-MDM2组(共转染miR-221 mimics和pcDNA 3.1-MDM2)，用脂质体法转染至HRCECs细胞，再进行高糖处理； qRT-PCR法检测细胞中miR-221、p53、MDM2的表达； Western blot检测细胞中p53、MDM2的蛋白表达； 流式细胞术检测细胞的凋亡。

结果：与NG组相比，高糖诱导的HRCECs细胞中miR-221、p53的表达显著升高，MDM2的表达显著降低，细胞凋亡率显著升高； 过表达miR-221可使高糖诱导的HRCECs细胞的凋亡率升高更明显，抑制miR-221可下调高糖诱导的HRCECs细胞的凋亡并下调p53，上调MDM2； 过表达MDM2则可逆转抑制miR-221对高糖诱导的HRCECs细胞的抗凋亡作用及对p53、MDM2的调控。

结论：miR-221可促进高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞凋亡，其机制与p53/MDM2信号通路有关。]]> 2020/8/19 19:18:38 55true 目的：观察发光二极管照射对大鼠高糖视网膜血管内皮细胞中的光生物调节作用及其机制。

方法：大鼠视网膜血管内皮细胞随机分为三组：正常对照组、高糖模型组、高糖模型发光二极管照射组，高糖模型发光二极管组的细胞在造模48h后开始采用发光二极管对培养箱中的细胞进行照射。MTT细胞凋亡实验检测各组细胞凋亡率； 激光共聚焦显微镜观察各组视网膜血管内皮细胞胞内钙离子变化； Western blot 法检测各组磷酸化丝氨酸-苏氨酸激酶(P-AKT)蛋白表达。

结果：正常对照组、高糖模型组、高糖模型发光二极管照射组凋亡率分别为7.54%±2.67%，31.69%±5.74%，21.65%±3.52%(P<0.05)。正常对照组细胞质微弱Ca²⁺荧光染色呈现出绿色的荧光，其荧光像素值为192.65±50.54； 高糖模型组中，细胞质呈现较强烈的绿色荧光，其荧光像素值为710.69±100.38； 发光二极管照射组中，绿色荧光像素值为430.47±80.67，明显高于正常对照组，但明显低于高糖模型组。三组间细胞中内Ca²⁺荧光像素值有差异(P<0.05)。这三组细胞P-AKT蛋白量分别为10.26±2.47、2.35±0.16、7.46±1.64(P<0.05)。

结论：高糖环境抑制苏氨酸激酶通路活性，对大鼠视网膜血管内皮细胞钙稳态产生影响，促使细胞凋亡，低强度的发光二极管照射可激活苏氨酸激酶通路，降低高糖引起的细胞凋亡率。]]> 2020/7/22 11:15:57 54true 目的：观察双七他克林对青光眼模型大鼠的视神经保护作用。

方法：选取雄性成年SD大鼠24只，随机分成对照组、手术组、双七他克林组和美金刚胺组，通过右眼巩膜上静脉注射高渗盐水(对照组大鼠右眼仅进行上巩膜静脉穿刺)制作青光眼模型后，对照组和手术组大鼠给予正常饮水，双七他克林组和美金刚胺组大鼠饮用水中每天分别添加0.5mg/kg双七他克林和5mg/kg美金刚胺，持续5wk。定期测量眼压，造模后5wk处死大鼠，取右侧视网膜进行免疫荧光染色，检测视网膜神经节细胞数目和视网膜神经纤维层厚度。

结果：造模后模型大鼠右眼眼压均显著升高，至造模后1mo，均高于28mmHg。手术组大鼠右眼视网膜神经节细胞数较对照组明显减少(79.83±9.58个 vs 119.50±8.26个，P<0.01)，神经纤维层厚度明显变薄(6.64±0.50μm vs 13.40±0.60μm，P<0.01)，而双七他克林(109.00±7.04个)和美金刚胺(107.33±8.57个)能够抑制青光眼所致的视网膜神经节细胞减少，且双七他克林能够抑制青光眼所致的视网膜神经纤维层萎缩(12.26±0.78μm)。

结论：双七他克林能够抑制青光眼所致视网膜神经节细胞数目减少及神经纤维层萎缩。]]> 2020/5/25 15:42:59 53true 目的：探讨低温琼脂包埋振动切片机切片法制作的大鼠视网膜切片内核层神经元的形态和基本电生理学特性。

方法：采用低温琼脂包埋振动切片机切片的方法制作大鼠视网膜切片，对内核层的神经元进行膜片钳全细胞记录，同时在胞内液中加入荧光黄观察记录细胞的形态。

结果：该方法制作的视网膜切片切面平整、细胞活性好、保留了细胞之间的突起联系，能够根据细胞胞体的大小、位置初步辨别细胞的种类。在视网膜切片上荧光黄显示的细胞形态表明，双极细胞胞体呈梭形，突起主要沿纵向延伸； 而水平细胞和无长突细胞胞体圆形或椭圆形、胞体较大，分别位于内核层的最外层和最内层。水平细胞和无长突细胞的静息膜电位(RMP)和膜电容(Cm)明显高于双极细胞。给予时程40ms，步阶10mV从-60mV至+40mV的电压刺激，41.7%的视锥双极细胞和64.7%的无长突细胞表现出内向钠电流和外向钾电流，其他细胞则只表现出外向钾电流。

结论：采用低温琼脂包埋振动切片机切片的方法操作简单，制作的切片质量稳定可靠，使得在视网膜切片上对包括水平细胞在内的不同内核层神经元进行膜片钳记录成为可能。进一步研究视网膜内核层神经元的电生理学特性，有助于揭示视觉信号的发生、传导和调控机制。]]> 2020/4/26 11:24:08 52true 目的：通过建立兔角膜碱烧伤模型，比较自体血清与小牛血去蛋白眼用凝胶在兔角膜碱烧伤治疗中的效果。

方法：制作兔右眼角膜碱烧伤模型30眼，造模后碱烧伤分度全部为Ⅲ度烧伤，将其随机分为三组，分别采用生理盐水、小牛血去蛋白眼用凝胶及自体血清滴眼液4次/d，各组滴阿托品眼用凝胶1次/晚，氧氟沙星眼用凝胶1次/晚，连续2wk。治疗7、14d后观察角膜新生血管形态并计算面积； 第14d处死各组实验动物后，摘除双眼角膜，其中左眼为正常对照，右眼为实验眼，分别进行常规组织病理学检查，角膜组织匀浆内CD45、IL-10、IFN-γ及VEGF浓度测定。

结果：治疗7、14d后小牛血去蛋白眼用凝胶组角膜新生血管面积(29.48±2.27、34.19±2.67mm²)与自体血清组(34.19±2.67、33.89±2.74mm²)无差异(P>0.05)。治疗14d角膜组织匀浆测定：小牛血去蛋白眼用凝胶组(0.56±0.04ng/mL)和自体血清组(0.54±0.05ng/mL)CD45含量均小于生理盐水组(1.27±0.07ng/mL)(P<0.05)； 自体血清组(452.49±11.40pg/mL)和小牛血去蛋白眼用凝胶组(332.49±13.67pg/mL)IL-10含量均大于生理盐水组(111.05±6.95pg/mL)(P<0.05)； 小牛血去蛋白眼用凝胶组(23.20±2.89pg/mL)和自体血清组(22.61±2.72pg/mL)IFN-γ含量均小于生理盐水组(41.77±4.26pg/mL)(P<0.05)； 小牛血去蛋白眼用凝胶组(151.14±18.21pg/mL)和自体血清组浓度(149.11±14.75pg/mL)VEGF含量均小于生理盐水组(391.35±28.59pg/mL)(P<0.05)。

结论：兔角膜碱烧伤后抑制炎症因子CD45、IFN-γ及VEGF释放及抑制角膜新生血管形成方面，自体血清与小牛血去蛋白眼用凝胶作用相当； 在促进抗炎因子IL-10释放、抑制炎症细胞浸润方面，自体血清作用强，小牛血去蛋白眼用凝胶次之。]]> 2020/4/26 11:24:08 51true 目的：观察形觉剥夺性豚鼠近视模型中给予中药驻景方或雷珠单抗注射液干预后屈光度、眼轴长度和脉络膜厚度的短期变化。

方法：取出生2wk的豚鼠60只，右眼戴头套诱导形觉剥夺性近视(FDM)动物模型。2wk后随机分为雷珠单抗组、驻景方组和生理盐水组(各组n=20)。雷珠单抗组第1d玻璃体腔注射雷珠单抗注射液0.02mg 1次，驻景方组给予加减驻景方灌胃3.285g/(kg·d)(1.5mL/d)共7d，生理盐水组给予等量生理盐水灌胃。分别测量记录三组豚鼠给药前和给药后1、3d，1wk的屈光度、眼轴长度和脉络膜厚度。

结果：雷珠单抗组给药前后的各值均无差异(P>0.05)。驻景方组和生理盐水组给药后1、3d的屈光度明显降低、眼轴长度缩短、脉络膜厚度增厚(P<0.05)，且3d时两组的各值变化最明显，但均在1wk时恢复到给药前的水平。三组间给药1、3d时生理盐水组和驻景方组的屈光度均低于雷珠单抗组，且眼轴长度较短，脉络膜厚度较厚(P<0.05)，给药3d时生理盐水组的各值变化最明显(P<0.05)。给药1wk时三组间各指标均无差异(P>0.05)。

结论：形觉剥夺性近视恢复期有一个短暂的脉络膜增厚时期，雷珠单抗注射液全程明显抑制了形觉剥夺性近视恢复期脉络膜的增厚，驻景方在3d时开始出现轻微的增厚抑制，均只持续了短暂的1wk时间。]]> 2020/3/25 14:45:38 50true 目的：探究桑色素滴眼液在围绝经期雌性兔干眼症中的治疗作用。

方法：选取雌性新西兰大白兔36只，采用双侧卵巢切除术，术后饲养60d，制作围绝经期雌兔干眼症模型(36眼，均为右眼)，其中24只随机分成对照组、实验组两组(各12只)：对照组应用磷酸盐缓冲液(PBS)，实验组应用桑色素滴眼液，另12只不使用任何滴眼液。治疗前，治疗后2、4、6wk对实验兔采取角膜荧光素染色(FL)、Schirmer I试验(SⅠt)检查，同时测验溶菌酶含量、乳铁蛋白、淀粉酶活性和泪液总蛋白含量，并使用角膜共聚焦显微镜观察。

结果：治疗前两组的SⅠt、FL、溶菌酶含量、乳铁蛋白、淀粉酶活性和泪液总蛋白量均无差异(P>0.05)； 治疗2、4、6wk后，对照组和实验组SⅠt和FL评分发生了不同的变化(P<0.05)。实验组溶菌酶含量、乳铁蛋白、淀粉酶活性和泪液总蛋白量较治疗前没有显著变化(均P>0.05)，对照组溶菌酶含量、乳铁蛋白、淀粉酶活性和泪液总蛋白量都发生了程度不一的变化(均P<0.05)。治疗后2、4、6wk时两组SⅠt、FL评分、溶菌酶含量、乳铁蛋白、淀粉酶活性和泪液总蛋白量均有差异(P<0.05)。治疗6wk，对照组炎症细胞密度为321±91个/mm²，上皮基底细胞密度为4436±289个/mm²，实验组炎症细胞密度为36±11个/mm²，上皮基底细胞密度为3219±223个/mm²，两组均有差异(P<0.05)。治疗6wk后，对照组角膜上皮下多支神经纤维发生弯曲，密度显著减少(P<0.05)，实验组神经弯曲度明显减小，密度较治疗前增加。

结论：桑色素滴眼液对围绝经期雌性兔干眼症具有明确的治疗作用。]]> 2020/3/13 19:43:57 49true 方法：健康成年雄性SD大鼠30只，按照随机分配的原则分为正常对照组(CON组，n=10)，糖尿病组(DM组，n=20)。DM组禁食12h后，按照60mg/kg体质量剂量一次性左下腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ)溶液，CON组注入等量的柠檬酸缓冲溶液。用药72h后，鼠尾静脉取血检测血糖，≥16.7mmol/L者定为糖尿病模型动物。成模大鼠随机分为糖尿病对照组(D组)和NAC治疗组(N组)。模型建立后，N组大鼠每周通过玻璃体腔注射4μL 1.6μg/μL的NAC，CON组、D组大鼠则给予玻璃体腔注射4μL 0.01mmol/L的磷酸缓冲盐溶液(pbs)不限饮食水，分组喂养。每周记录各组大鼠体质量及血糖。糖尿病成模后2mo，处死实验动物，通过HE染色法，检测各组大鼠视网膜内核层厚度； 通过免疫荧光法，检测各组大鼠视网膜神经节细胞数量及视网膜中色素上皮衍生因子(PEDF)水平。

结果：N组视网膜内核层厚度较D组厚度增加(P<0.01)，与CON组厚度无差异(P>0.05)。与CON组相比，D组视网膜神经节细胞数量减少(P<0.01)，N组视网膜神经节细胞略减少(P>0.05)。D组视网膜神经节细胞较N组减少(P<0.01)。与CON组相比，D组PEDF表达下降(P<0.01)，N组PEDF表达略下降(P>0.05)。D组PEDF表达较N组下降(P<0.01)。

结论：抗氧化剂NAC对早期糖尿病大鼠视网膜组织有保护作用的机制可能是通过上调视网膜中PEDF水平。]]> 2020/3/13 19:43:57 48true 目的：基于455～470nm面阵蓝光照射SD大鼠，观察大鼠视网膜及脉络膜组织结构变化并分析照射时间与组织结构变化之间的关系。

方法：选取6周龄健康SD雄性大鼠24只，随机分为正常对照组(n=6)和实验组(n=18)，正常对照组无任何干预正常喂养6wk； 实验组分为3个小组，每天分别予面阵蓝光发光器(455～470nm，391Lx)照射3、6、12h，连续照射6wk。光学显微镜下观察组织结构变化。

结果：正常对照组的大鼠眼底组织结构完整，细胞形态正常。随蓝光照射时间延长，各实验组大鼠脉络膜纤维结缔组织玻璃样改变，局部疏松水肿，小血管增生，色素层变薄，细胞稀疏，视细胞数逐渐减少，局部消失。3h实验组细胞核染色清晰，双极细胞层及节细胞层未见明确改变。6、12h实验组细胞核固缩，双极细胞层轻度增生，神经节细胞层局部形成胞突。

结论：视网膜的光感受器细胞随蓝光照射时间的延长出现明显变薄、萎缩、消失。色素上皮细胞损伤程度与蓝光照射时间无明显关系。]]> 2020/1/19 11:26:19 47true 目的：探讨沉默SIAH1基因对H₂O₂诱导的人晶状体上皮细胞凋亡的影响。

方法：将培养的人晶状体上皮细胞系HLE-B3分为正常组、H₂O₂组(用含400μmol/L H₂O₂的培养液培养)、H₂O₂+siR-SIAH1组(转染SIAH1干扰序列后用含400μmol/L H₂O₂培养液培养)和siR-NC组(转染阴性对照序列后用含400μmol/L H₂O₂培养液培养)，采用实时荧光定量PCR技术检测细胞中SIAH1基因表达，流式细胞术检测细胞凋亡率，Western blot法检测细胞中p38 MAPK、p-p38 MAPK、Bcl-2和Bax蛋白表达。

结果：H₂O₂组、siR-NC组和H₂O₂+siR-SIAH1组细胞中SIAH1 mRNA相对表达量均高于正常组，而H₂O₂+siR-SIAH1组细胞中SIAH1 mRNA相对表达量低于H₂O₂组和siR-NC组(均P<0.05)。H₂O₂组、siR-NC组和H₂O₂+siR-SIAH1组细胞凋亡率均高于正常组，而H₂O₂+siR-SIAH1组细胞凋亡率低于H₂O₂组和siR-NC组(均P<0.05)。H₂O₂组、siR-NC组和H₂O₂+siR-SIAH1组细胞中p38 MAPK和Bcl-2蛋白表达量低于正常组，而p-p38 MAPK和Bax蛋白表达量高于正常组，H₂O₂+siR-SIAH1组细胞中p38 MAPK和Bcl-2蛋白表达量高于H₂O₂组和siR-NC组，而p-p38 MAPK和Bax蛋白表达量低于H₂O₂组和siR-NC组(均P<0.05)。

结论：下调SIAH1基因表达可抑制H₂O₂诱导的人晶状体上皮细胞凋亡，其机制可能与抑制p38 MAPK信号通路活化有关。]]> 2019/12/20 14:53:54 46true 目的：研究甘草甜素(Gly)对小鼠角膜急性碱烧伤后角膜新生血管(CNV)的抑制作用。

方法：采用碱烧伤法制备小鼠碱烧伤模型60只，随机平均分为Gly组和PBS组，分别隔天结膜下注射2g/L Gly溶液或PBS溶液，共14d。裂隙灯显微镜下观察角膜炎症反应和CNV。实验结束后取角膜行HE染色法和免疫组织化学法CD34及髓过氧化物酶(MPO)染色并计算角膜微血管密度(MVD)及中性粒细胞数。

结果：造模后第7、14d Gly组CNV面积分别是4.16±0.00、7.33±0.13mm²，显著低于PBS组(7.58±0.20、9.24±0.08mm²，均P<0.05)。HE病理染色显示正常小鼠角膜结构完整，未见新生血管形成及炎症细胞浸润； Gly组角膜新生血管数量及炎症细胞浸润较少，胶原排列较规则，而PBS组角膜基质中可见大量炎症细胞浸润及新生血管。免疫组织化学CD34染色结果显示Gly组MVD为11.13±1.46条/mm²，显著低于PBS组(34.08±2.46条/mm²，P<0.001)； 免疫组织化学MPO染色结果显示Gly组中性粒细胞计数为每200倍视野17.50±1.98个，明显少于PBS组(59.56±4.79个，P<0.001)。

结论：Gly能减轻小鼠角膜急性碱烧伤模型中的角膜炎症反应，并抑制角膜新生血管形成，这为临床上有效防治角膜新生血管类疾病提供了一种新的思路。]]> 2020/11/19 16:34:46 45true 目的：构建过表达睫状神经营养因子(CNTF)的腺病毒，利用腺病毒载体转染骨髓间充质干细胞，使其在体外持续高效表达CNTF，为视网膜病变的体外研究提供新途径。

方法：构建空载GFP-腺病毒及CNTF-腺病毒，取第3代BMSCs用于转染实验，分为3组：空白对照组(未转染腺病毒组)、阴性对照组(GFP-腺病毒转染组)和实验组(CNTF-腺病毒转染组)。ELISA测转染后1、2、3d各组上清液的CNTF蛋白分泌量。

结果：成功构建空载GFP-腺病毒及CNTF-腺病毒， 实验组的CNTF表达量明显高于空白对照组和阴性对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。

结论：利用腺病毒载体可使BMSCs在体外持续高效表达CNTF。]]> 2020/11/19 16:34:46 44true 目的：研究beta-B2晶状体蛋白(CRYBB2)缺失对小鼠晶状体自噬的影响。

方法：取6月龄野生型(WT)和Crybb2基因敲除型(Crybb2 ^KO)小鼠各6只，取晶状体组织，透射电子显微镜观察各组小鼠晶状体组织自噬的改变，用Western blot法检测两组小鼠自噬相关蛋白的相对表达量。

结果：透射电子显微镜下观察发现，与WT小鼠相比，Crybb2^KO小鼠晶状体核区线粒体累积明显，皮质区自噬小体数量增多。Western blot结果显示，Crybb2^KO小鼠晶状体组织LC3B表达显著低于WT小鼠(0.09±0.01 vs 0.26±0.05)，P62及p-mTOR表达(0.64±0.09和0.41±0.03)显著高于WT小鼠(0.43±0.07和0.27±0.02)。

结论：CRYBB2晶状体蛋白缺失会影响晶状体自噬，其机制可能与mTOR信号通路的自噬相关，最终导致白内障产生。]]> 2020/9/17 16:45:30 43true 目的：构建基于视网膜微血管内皮细胞(ECs)和周细胞(RMPs)的大鼠视网膜血管新生体外三维模型。

方法：分离、纯化、培养大鼠视网膜微血管内皮细胞及视网膜微血管周细胞，选用第3～7代经鉴定后的细胞用于研究，采用细胞示踪剂对细胞进行染色，混合后按表面培养法接种于Matrigel，动态观察，并检测血管新生期间血管内皮生长因子A(VEGF-A)的表达。

结果：培养12h时，RMPs被ECs招募，聚集成大小不等细胞团块； 24h时，ECs/RMPs共同形成复杂的三维血管样条索网； 48h时，网状结构出现明显崩解，仅保持少量不完整的简单网状结构； 72h时，血管样条索网完全崩解。在三维模型发生过程中，VEGF-A的表达量升高； 退化时，VEGF-A的表达量下降。

结论：成功基于视网膜微血管全成分细胞ECs和RMPs构建了大鼠视网膜血管新生体外三维模型。]]> 2021/8/18 21:32:58 42true 方法：将眼睑基底细胞癌及眼睑正常皮肤组织块贴壁培养获得原代CAFs及NFs，于倒置相差显微镜下观察纯化的两种细胞第3代的细胞形态并用细胞免疫化学染色(SP法)鉴定两种细胞； MTT法检测细胞生长增殖活力； 通过RT-qPCR、Western Blot分别检测其FAP mRNA、蛋白在两种细胞中的表达差异。

结果：眼睑CAFs呈长梭形或纺锤形，胞质突明显减少，而胞浆内具有较多颗粒，细胞体积差异明显，排列紊乱且密集，丧失接触抑制，存在明显的重叠生长现象； NFs呈长梭形，但胞浆内颗粒少见，细胞体积较均一，放射状排列，存在接触抑制，未见重叠生长。眼睑CAFs的增殖速度明显快于NFs。RT-qPCR法检测眼睑CAFs中FAP mRNA相对于内参的表达量为3.672±0.221，明显高于眼睑NFs中的含量1.034±0.024(P<0.05)。Western Blot法检测两种细胞中FAP蛋白表达水平发现，FAP在眼睑CAFs中高表达，而眼睑NFs中几乎不表达(P<0.05)。

结论：眼睑CAFs与眼睑NFs在形态结构、生长增殖、生长因子表达等生物学特征方面发生了显著改变，提示肿瘤微环境随眼睑基底细胞癌的发生发展相应地发生了一些变化，进而诱导NFs生物学特性和功能发生改变，最终转变为CAFs。此外，眼睑CAFs较NFs高表达分泌FAP，表明肿瘤细胞微环境中FAP可能参与肿瘤的发生发展，与眼睑基底细胞癌浸润性生长有一定关系。]]> 2021/7/21 22:23:09 41true 目的：研究柚皮素(Nar)及其磷脂复合物(NPC)对叔丁基氢过氧化物(t-BHP)诱导产生的氧化损伤人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19细胞)的保护作用及其作用机制。

方法：根据文献最佳制作工艺制备NPC。将体外培养的ARPE-19细胞分为溶媒组(用DMSO培养)、模型组(用200μmol/L t-BHP干预)、Nrf2-siRNA组(针对Nrf2基因进行细胞转染)、柚皮素组(200μmol/L柚皮素培养基预处理后加入200μmol/L t-BHP)、NPC组(200μmol/L NPC培养基预处理后加入200μmol/L t-BHP)、Nrf2-siRNA+柚皮素组(200μmol/L柚皮素预处理后Nrf2基因干扰，再加入200μmol/L t-BHP)、Nrf2-siRNA+NPC组(200μmol/L NPC预处理后Nrf2基因干扰，再加入200μmol/L t-BHP)。检测各组细胞内活性氧、丙二醛、超氧化物歧化酶、总抗氧化能力水平，分别采用RT-PCR和Western blot法检测各组细胞内血红素加氧酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶-1(NQO-1)、谷氨酸半胱氨酸连接酶(GCL)和核因子E2相关因子2(Nrf2)的表达水平。

结果：NPC较柚皮素能明显降低ARPE-19细胞内丙二醛、活性氧的含量，提高细胞内超氧化物歧化酶、总抗氧化能力水平。柚皮素和NPC预保护ARPE-19 细胞后，Nrf2、HO-1、NQO-1和GCL mRNA的相对表达量和蛋白表达水平均较模型组和Nrf2-siRNA组升高。柚皮素组与NPC组，Nrf2-siRNA+柚皮素组与Nrf2-siRNA+NPC组细胞内4种基因和蛋白相对表达水平均有差异。Nrf2-siRNA+柚皮素组与Nrf2-siRNA组Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白表达无显著差异。Nrf2-siRNA+NPC组与Nrf2-siRNA组4种蛋白表达均有差异，NPC作用明显强于柚皮素。

结论：柚皮素磷脂复合物能明显提高细胞内抗氧化能力，降低氧化水平，其通过激活Nrf2/ARE抗氧化应激通路上调Nrf2及其下游抗氧化酶和Ⅱ相解毒酶的表达对氧化损伤的ARPE-19细胞起到更好的保护作用。]]> 2021/6/24 15:27:59 40true 目的：研究基因重排检测技术联合玻璃体液中白介素-10(IL-10)、白介素-6(IL-6)细胞因子检测对原发性眼内淋巴瘤(PIOL)的诊断价值。

方法：研究对象为本院2015-01/2019-12收治的拟诊断为PIOL患者27例的临床资料，经诊断性玻璃体切割术病理检查确诊PIOL 患者21例，葡萄膜炎6例； 回顾性分析其基因重排检测结果及玻璃体液中IL-10、IL-6水平，绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析基因重排检测技术、玻璃体液中IL-10、IL-6水平及两者联合对PIOL的诊断价值。

结果：纳入的21例PIOL患者中，15例IhH FR2单克隆性重排序列，阳性率为71%(15/21)； 4例检出TCRG克隆性基因重排序列； 经ROC曲线分析显示基因重排检测技术诊断PIOL的曲线下面积值(AUC)为0.857，敏感性、特异性分别为71.43%、100.00%； PIOL患者玻璃体液中IL-10及IL-10/IL-6水平均显著高于葡萄膜炎患者，但两种病变患者IL-6水平无差异(P>0.05)； 经ROC曲线分析显示IL-10诊断PIOL的AUC值最高，以170.90pg/mL为IL-10的cut-off，其诊断PIOL的敏感性、特异性分别为66.67%、100.00%； 而以1.95为IL-10/IL-6比值的cut-off，其诊断PIOL的敏感性为52.40%、特异性为100.00%； 基因重排检测技术联合玻璃体液中IL-10、IL-10/IL-6水平检测诊断PIOL的AUC为0.893，敏感性、特异性分别为95.24%、83.33%。

结论：单一基因重排检测技术诊断PIOL敏感性欠佳，联合玻璃体液中IL-10、IL-6水平检测可获得更佳的诊断敏感性，且特异性良好。]]> 2021/6/24 15:27:59 39true 目的：研究视觉发育关键期单眼形觉剥夺(MD)对弱视大鼠视皮层突触密度超微形态结构变化规律的影响，以及突触素(SYN)在视皮层的表达及意义，探讨弱视大鼠视皮层突触密度及功能的关系，为弱视的发病机制及临床治疗提供分子水平理论依据。

方法：选用正常新生Long Evans大鼠随机分为正常对照组与弱视模型组，每组16只，两组大鼠均在相同环境下饲养。正常对照组不做任何处理，弱视模型组在出生后第13d采用单眼缝合的方法建立单眼形觉剥夺性弱视经典模型。两组大鼠均于出生后51d进行闪光视觉诱发电位(F-VEP)的检测。检测结束后立即取材，用透射电镜及Image J图像分析软件观察并统计两组大鼠初级视皮层V1M区第Ⅳ～Ⅵ层大锥体细胞周围神经纤维网络的突触密度变化。利用漂染法对视皮层冰冻切片进行免疫荧光组织化学染色，在激光共聚焦显微镜及荧光显微镜下对SYN阳性神经元进行定位观察和定量统计分析。

结果：F-VEP检查结果显示与正常对照组相比，弱视模型组剥夺眼的P2潜伏期较正常眼明显延长，P2波振幅较正常眼明显降低(P<0.05)； 透射电镜结果显示，与正常对照组相比，弱视模型组双侧视皮层的突触密度显著降低(P<0.05)，其中弱视眼对侧视皮层下降更加明显(P<0.05)； 免疫荧光染色结果显示两组大鼠视皮层脑切片形态完整，镜下组织结构清晰，与正常对照组相比，弱视模型组SYN阳性神经元表达强度值明显降低(P<0.01)。

结论：视觉发育关键期存在着突触结构可塑性，单眼形觉剥夺可以造成大鼠初级视皮层突触密度的降低，SYN表达水平下降，视皮层功能下降。]]> 2021/5/20 16:38:35 38true 目的：从分子水平探讨全反式视黄酸(ATRA)诱导ARPE-19细胞的内质网应激反应(ERS)。

方法：应用免疫荧光法、实时定量-聚合酶链反应和蛋白印记法等方法，检测ATRA诱导ARPE-19细胞产生ERS过程中相关信号通路蛋白及mRNA表达水平的变化。

结果：检测结果显示，随着ATRA浓度的累积，ERS标记蛋白CHOP及BIP的蛋白及mRNA水平显著上升(P<0.001)； 下游信号通路中，PERK、EIF2α、ATF4、IRE1α及XBP1表达上调(P<0.001)，ATF6表达无变化(P>0.05)。

结论：过度累积的ATRA诱导ARPE-19细胞产生ERS，并激活其中PERK-EIF2α-ATF4及IRE1α-XBP1信号途径。]]> 2021/5/20 16:38:35 37true 目的：通过检测人翼状胬肉组织及正常结膜组织中miR-486-3p的表达情况，探寻其在翼状胬肉发生发展中可能的作用机制。

方法：于2018-09/2019-12收集原发性翼状胬肉患者69例69眼，收集术中切除的翼状胬肉组织和术眼正常结膜组织，采用RT-PCR定量检测标本中miR-486-3p的相对表达量，并利用 Targetscan数据库、miWalk3.0数据库、miRDB数据库对miR-486-3p进行靶基因预测后将得到的潜在靶基因取交集； 采用DAVID数据库对miR-486-3p潜在靶基因进行功能和通路富集分析； 采用String网站对miR-486-3p潜在靶基因进行互作分析。

结果：miR-486-3p在翼状胬肉组织中的相对表达量\〖(6.183±1.366)×10^-6\〗与正常结膜组织的相对表达量\〖(7.930±1.394)×10^-5\〗有显著差异(P<0.0001)。通过对其靶基因预测及生物信息学分析发现miR-486-3p潜在靶基因436个，其生物学功能主要富集于对RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的调控、囊泡介导的转运和转录调控、DNA依赖性RNA代谢过程的调控。KEGG通路主要富集于神经轴突导向(Axon guidance)通路及溶酶体通路上，其中Axon guidance通路可能对翼状胬肉的发生发展起着重要的调控作用。PPI网络分析进一步表明Axon guidance通路中的关键基因ABL1、PLXNA1对翼状胬肉具有重要作用。

结论：miR-486-3p可能通过SLIT(神经导向因子Slit)/Robo(回旋引导受体)和SEMA3A(神经导向因子Semaphorin 3A)/PLXNA1(丛蛋白受体 A1)等Axon guidance通路致翼状胬肉的新生血管异常，从而参与翼状胬肉的发生、发展。]]> 2021/5/20 16:38:35 36true 目的：探讨重组人生长激素(rHGH)对兔角膜上皮损伤早期的修复作用。

方法：选取32只健康雄性新西兰兔制作双眼角膜上皮损伤模型，随机选取1眼滴无菌生理盐水作为对照组，另1眼滴20nmol/L重组人生长激素作为rHGH组，分别于造模前、造模后24、48、72h采用荧光素钠染色法观察角膜上皮愈合情况，采用Cochet-Bonnet角膜知觉测量仪测量检查中央角膜敏感度，同时收集各时间点泪液检测炎症因子的表达。

结果：造模后48h对照组和rHGH组角膜上皮愈合率分别为62.52%±6.73%和79.62%±10.62%(P<0.05)，造模后72h分别为90.56%±9.57%和98.43%±3.65%(P<0.05)。造模后48h，对照组和rHGH组中央角膜敏感度分别为3.22±0.42、4.22±0.26cm(P<0.05)。造模后各时间点两组泪液TNF-α和IL-1α表达均较造模前增加，且对照组均高于rHGH组。造模后24、48h，两组泪液MMP-9表达均较造模前增加，且造模后48h对照组高于rHGH组(均P<0.05)。造模后24、48h两组泪液IL-21表达均较造模前增加(P<0.05)。造模后各时间点两组泪液IL-17α、Leptin表达与造模前相比及两组之间比较均无差异(P>0.05)。

结论：重组人生长激素有利于兔角膜上皮损伤早期修复。]]> 2021/5/20 16:38:36 35true 2021/4/21 21:12:00 34true 2021/4/21 21:12:00 33true 2021/3/25 20:05:42 32true 目的：探索枸杞多糖(LBP)对细菌脂多糖(LPS)诱导的人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞的炎性反应的影响及其可能介导的信号通路。

方法：通过LPS刺激体外培养的ARPE-19细胞构建炎性反应模型。将细胞随机分为5组，空白组使用完全培养基培养，LPS组给予含10μg/mL LPS的完全培养基刺激24h，低、中、高浓度LBP组分别给予0.1、0.5、1mg/mL LBP完全培养基孵育24h后给予含10μg/mL LPS的完全培养基刺激24h。应用CCK-8观察细胞存活率、实时荧光定量PCR检测相关炎性因子的mRNA表达量及Western-blot检测NF-κB/MAPK信号通路相关磷酸化蛋白表达量的变化。

结果：与正常细胞相比，LPS刺激后，ARPE-19的存活率下降。同时，随着外源性LBP浓度增加，ARPE-19的细胞存活率升高，且细胞内炎性因子IL-1β、IL-6和MCP-1的表达量降低，并伴随NF-κB/MAPK通路的相关磷酸化蛋白(p-p65、p-IκBα、p-JNK、p-ERK及p-p38)的表达下降。

结论：枸杞多糖通过抑制胞内炎性因子及NF-κB/MAPK通路相关因子的磷酸化，从而阻止LPS诱导人视网膜色素上皮细胞产生的炎性反应。]]> 2021/2/24 14:14:51 31true 目的：通过体外分离及培养泪腺上皮细胞，建立干眼细胞模型，分析相关炎症因子，为进一步探究干眼治疗的有效药物奠定基础。

方法：体外分离培养兔泪腺上皮细胞，并采用细胞增殖实验和免疫荧光实验对原代细胞活性和纯度进行鉴定。根据脂多糖(LPS)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的IC₅₀值，采用两者的0.5倍IC₅₀刺激兔泪腺上皮细胞，构建干眼细胞模型即LPS组和TNF-α组，并通过细胞增殖实验、ELISA和流式方法对比两种构建干眼细胞模型的相关生物学特征。

结果：兔泪腺上皮原代细胞培养12h后细胞基本贴壁，48h可见细胞形态舒展，呈长三角形。兔泪腺上皮原代细胞活性为92%以上，标志角化蛋白(Pan-cytoeratin)阳性率>90%，符合实验要求。LPS和TNF-α 12h的IC₅₀分别为20μg/mL、4.996ng/mL，采用LPS(10μg/mL)和TNF-α(2.5ng/mL)干预细胞12h后：两组细胞凋亡率明显高于空白对照组(P<0.01)，组间比较，TNF-α组细胞凋亡率高于LPS组(P<0.01)； 两组细胞上清液中IL-1β和IL-6的含量均明显高于空白对照组(P<0.01)，组间比较，TNF-α组IL-1β和IL-6的含量明显高于LPS组(P<0.01)。提示TNF-α模拟干眼的炎症反应效果优于LPS。

结论：本研究成功建立了一种细胞纯度较高、相对简便、快速，模型稳定的兔干眼细胞模型，为兔泪腺上皮细胞功能及干眼的基础研究提供了更稳定的体外实验模型。]]> 2021/1/19 16:56:24 30true 目的：研究电子烟对小鼠视网膜组织及超微结构的影响以及可能的相关机制。

方法：将18只8周龄雄性c57BL小鼠随机分为对照组(6只)，0mg尼古丁组(6只)和12mg尼古丁组(6只)，分别用HE染色观察视网膜各层结构的改变，在透射电子显微镜下观察视网膜色素上皮(RPE)细胞超微结构的改变，通过免疫荧光染色观察视网膜中Tuj1、8-OHdG的表达情况。

结果：与对照组相比，实验组(0mg和12mg尼古丁组)视网膜全层、视神经纤维层和内丛状层厚度均显著减少(P<0.01)，但实验组间均无明显差异(P>0.05)。RPE细胞顶部仅见零星微绒毛，残存微绒毛长度变短。实验组中节细胞层、视神经纤维层和内丛状层可观察到Tuj1表达减少，但是神经节细胞数目无显著变化(P>0.05)。0mg和12mg尼古丁组中节细胞层、内核层内观察到8-OHdG表达增加。

结论：电子烟可对小鼠视网膜造成损伤，其损伤可能是由氧化应激反应造成的。]]> 2021/1/19 16:56:24 29true 目的：探索阿昔洛韦(ACV)对体外培养人眼Tenon囊成纤维细胞(HTFs)的增殖和凋亡的影响以及作用机制。

方法：将HTFs分为ACV处理组和空白组； CCK8检测不同浓度梯度下的细胞增殖速率，划痕实验检测HTFs迁移能力，流式细胞术检测HTFs凋亡以及细胞周期。

结果：与空白组相比，ACV处理组(终浓度分别为1.125、2.25、3.375、4.5mmol/L)HTFs增殖速率显著降低(P<0.05)，且呈浓度依赖性。4.5mmol/L ACV处理组划痕细胞迁移率显著降低(P<0.05)，细胞凋亡率显著增加(P=0.0005)，细胞周期G0/G1期峰值升高(P=0.0011)，S期下降(P=0.0006)，细胞周期被阻滞在G0/G1期。

结论：阿昔洛韦可以通过阻滞HTFs周期促进细胞凋亡，抑制HTFs的增殖和迁移。]]> 2020/12/22 18:57:45 28true 方法：将72只3周龄C57BL/6J小鼠随机分为对照组1、模型组1、干预组1、对照组2、模型组2及干预组2，每组12只小鼠，前三组实验进行3wk，后三组实验进行6wk，除对照组1和对照组2外，所有小鼠均用半透明眼罩遮盖右眼诱导形觉剥夺性近视动物模型，干预组1在造模同时而干预组2则在实验3wk后灌胃驻景丸加减方混悬液0.546g/(kg·d)(0.1mL/d)，其余组小鼠灌胃等量生理盐水0.1mL/d，实验前后均测眼轴，实验结束时取小鼠视网膜行HE染色用于观察视网膜各层厚度改变，免疫组织化学(IHC)和western blotting(WB)用于检测Bcl-2和Caspase3蛋白的表达。

结果：在实验结束时模型组1的眼轴比对照组1显著增加(P<0.01)，干预组1的眼轴显著低于模型组1(P<0.01)，模型组2的眼轴比对照组2显著增加(P<0.01)，干预组2的眼轴明显低于模型组2(P<0.01)； 模型组1的NFL和ONL的厚度比对照组1显著变薄(P<0.01)，模型组1的INL厚度比对照组1显著变薄(P<0.05)，干预组1的NFL、INL和ONL厚度较模型组1显著增加(P<0.05)； 模型组2的NFL、INL和ONL的厚度比对照组1显著变薄(P<0.01)； IHC检测显示Bcl-2蛋白平均光密度模型组1显著低于对照组1(P<0.05)，干预组1显著高于模型组1(P<0.01)，模型组2显著低于对照组2(P<0.01)，干预组2显著高于模型组2(P<0.01)； Caspase3蛋白平均光密度模型组1显著高于对照组1(P<0.01)，干预组1显著低于模型组1(P<0.01)，模型组2显著高于对照组2(P<0.05)，干预组2显著低于模型组2(P<0.01)； WB检测证明，Bcl-2的蛋白相对表达水平模型组1显著低于对照组1(P<0.01)，干预组1显著高于模型组1(P<0.01)，模型组2显著低于对照组2(P<0.01)，干预组2显著高于模型组2(P<0.01)； Caspase3的蛋白相对表达水平模型组1显著高于对照组1(P<0.01)，干预组1显著低于模型组1(P<0.01)，干预组2显著低于模型组2(P<0.05)。

结论：驻景丸加减方可通过调控凋亡相关蛋白Bcl-2和Caspase3的表达，减轻近视形成过程中及已形成近视小鼠视网膜细胞凋亡，从而起到干预形觉剥夺近视小鼠视网膜厚度变薄的作用。]]> 2021/11/22 20:59:15 27true 2021/10/22 21:57:36 26true 目的：探究年龄对水合氯醛诱导的小鼠急性可逆性晶状体混浊及Na⁺-K⁺-ATP酶表达的影响。

方法：青年(3月龄)和老年(24月龄)C57BL/6小鼠各12只，4%水合氯醛(400mg/kg)腹腔注射诱导急性可逆性晶状体混浊。在注射后10、20、30、45、60、90、120、150min分别应用裂隙灯观察晶状体混浊程度，根据晶状体混浊评价系统记录混浊程度分级情况并拍照。苏木素-伊红(HE)染色观察晶状体病理改变，免疫组织化学染色检测晶状体Na⁺-K⁺-ATP酶表达。

结果：水合氯醛注射后两组小鼠晶状体混浊和消退过程相似，但青年组小鼠晶状体混浊出现早、持续时间略长，混浊厚重，呈乳白色； 老年组小鼠晶状体混浊出现晚，持续时间略短，混浊轻薄，呈薄雾状。HE染色显示水合氯醛注射后晶状体上皮细胞(LECs)下皮质聚集大量水泡，浅层晶状体纤维细胞结构紊乱。免疫组织化学染色显示LECs及纤维Na⁺-K⁺-ATP酶的表达呈现阳性，水合氯醛注射前青年组和老年组小鼠LECs中Na⁺-K⁺-ATP酶表达较弱，注射后45min LECs中Na⁺-K⁺-ATP酶的表达上调，且老年组小鼠LECs的Na⁺-K⁺-ATP酶上调更为显著。

结论：年龄影响水合氯醛诱导小鼠急性可逆性晶状体混浊，Na⁺-K⁺-ATP酶参与水合氯醛诱导的晶状体混浊。]]> 2021/9/16 22:17:07 25true 目的：观察原代培养的结膜松弛症(CCH)球结膜成纤维细胞生长状况及形态变化，确定最佳传代时间以获得稳定、一致的CCH球结膜成纤维细胞。

方法：采用组织块贴壁法获得CCH原代球结膜成纤维细胞，胰蛋白酶差速消化法进行成纤维细胞纯化，倒置显微镜下观察并记录不同时期成纤维细胞的生长状况及形态变化，免疫荧光细胞化学染色行成纤维细胞鉴定。

结果：CCH结膜组织贴壁24h即可见少量细胞从组织块周围爬出，第2～7d为细胞生长对数期，细胞生长快、增殖旺盛，轮廓清晰，分布均匀，数目增多，细胞核清晰； 第9～15d细胞生长进入平台期，组织块逐渐老化失去活性，细胞增长缓慢，排列疏松，体积变大，形状扁平，细胞浆内见大量颗粒状物质和小泡产生，部分细胞从培养瓶底脱落，细胞之间出现较大空隙。传代纯化后细胞的大小、形态基本一致，经鉴定为成纤维细胞，呈长梭形、扁平星状或多突的纺锤形，中间宽大，有卵圆形细胞核，两头相对细小，伴向外伸出2～3个长短不一的细长突起。

结论：采用组织块贴壁法可成功获得原代CCH球结膜成纤维细胞，当细胞生长至第8d时行消化、传代可获得稳定、一致的CCH球结膜成纤维细胞。]]> 2022/9/2 14:23:08 24true 目的：研究K-115对人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)增殖和迁移的影响，并探讨其相关作用机制，为青光眼术后抗瘢痕治疗提供新思路。

方法：选取2018-09/2019-09于河北省人民医院行青光眼手术患者的Tenon囊组织，采用组织块法进行HTFs原代培养，应用转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导HTFs模拟青光眼滤过性手术后的细胞活化模型，并采用K -115处理细胞。将细胞分为4组：对照组采用溶剂二甲基亚砜(DMSO)处理； TGF-β1组采用10μg/L TGF-β1处理24h； TGF-β1+5 K-115组采用5μmol/L K-115预处理2h后加入10μg/L TGF-β1处理24h； TGF-β1+10 K-115组采用10μmol/L K-115预处理2h后加入10μg/L TGF-β1处理24h。通过细胞增殖实验观察细胞的增殖能力； 划痕试验检测细胞的迁移能力； 透射电子显微镜观察细胞内自噬小体的形成； Hoechst 33342/PI染色观察细胞凋亡情况。

结果：细胞增殖实验结果提示K-115可以抑制TGF-β1诱导的HTFs增殖； 划痕试验提示K-115可以抑制TGF-β1诱导的HTFs迁移； 透射电子显微镜结果显示K-115可以增强TGF-β1诱导的HTFs自噬。Hoechst 33342/PI染色提示K-115并未诱导细胞凋亡。

结论：K-115可能是通过增加HTFs自噬而非诱导凋亡机制调控TGF-β1诱导的HTFs增殖及迁移能力。]]> 2022/9/2 14:23:08 23true 目的：探讨基质金属蛋白酶(MMPs)抑制剂AG3340对高糖(HG)培养状态下人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19细胞)迁移和侵袭能力的影响及作用机制。

方法：将体外培养的ARPE-19细胞分为4组，其中对照组(Control组)用含5.6mmol/L葡萄糖的DMEM/F12培养基培养； HG组用含30mmol/L葡萄糖的DMEM/F12培养基培养； HG+AG3340组用AG3340预处理细胞12h后，再用含30mmol/L葡萄糖的DMEM/F12培养基继续培养； 甘露醇(MA)组用含5.6mmol/L葡萄糖和24.4mmol/L甘露醇的DMEM/F12培养基培养作为渗透压对照组。采用划痕实验检测细胞的迁移能力，Transwell小室实验检测细胞的侵袭能力，Western blot法检测MMP-9、MMP-2、纤连蛋白(Fibronectin)及胶原蛋白(Collagen)Ⅳ的相对表达水平。

结果：划痕实验结果显示，划痕24、48h后HG组细胞迁移率均较Control组明显增加(均P<0.001)，采用AG3340预处理后细胞迁移率均较HG组降低(均P<0.01)。Transwell小室实验结果显示，HG组细胞侵袭数目较Control组明显增加(P<0.001)，采用AG3340预处理后细胞侵袭数目较HG组减少(P<0.01)。Western blot检测结果显示，HG组细胞中MMP-9和MMP-2相对表达量均较Control组增加，Fibronectin和Collagen Ⅳ相对表达量均较Control组减少(均P<0.001)，采用AG3340预处理后细胞中MMP-9和MMP-2蛋白相对表达量均较HG组降低，Fibronectin和Collagen Ⅳ相对表达量均较HG组增加(均P<0.05)。

结论：高糖环境诱导ARPE-19细胞迁移和侵袭能力增强，AG3340则可以部分逆转该作用，该过程可能与AG3340抑制细胞内MMP-9和MMP-2的表达，稳定细胞外基质组分有关。]]> 2022/7/27 16:29:02 22true 目的：探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)凋亡的影响及其机制。

方法：体外培养ARPE-19，分别采用0、40、80、160μg/mL EGCG处理。处理预定时间后分别用hoechst 33258染色法检测细胞凋亡形态学变化； 流式细胞仪检测细胞凋亡率； 实时荧光定量RT-PCR和Western blotting检测细胞凋亡相关因子B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、BCL2-Associated X的蛋白质(Bax)、胱天蛋白酶-3(caspase-3)和p53的表达。

结果：hoechst 33258染色结果发现ARPE-19随着EGCG药物浓度的增加，凋亡细胞数量逐渐增多，可见明显的凋亡小体； 流式细胞仪结果显示随着EGCG药物浓度的升高，凋亡率逐渐增高，40、80、160μg/mL凋亡率分别为4.95%±0.071%、11.75%±0.075%和21.25%±0.919%与对照组(2.8%±1.556%)相比有差异(P<0.01)，呈现出药物浓度依赖性； 实时荧光定量PCR和Western blot结果表明EGCG能明显上调凋亡促进因子Bax、caspase-3和p53的mRNA和蛋白表达，同时下调凋亡抑制因子bcl-2的表达，均呈现浓度依赖性。

结论：EGCG能明显诱导ARPE-19发生凋亡，其机制与抑制bcl-2的表达，增强Bax、caspase-3和p53的表达有关。]]> 2022/7/27 16:29:02 21true 方法：选取8周大小的雄性C57BL/6J小鼠36只，随机分为6组：空白对照组(未做任何处理)、ONI 1d组(视神经损伤后1d取材)、ONI 3d组(视神经损伤后3d取材)、ONI 5d组(视神经损伤后5d取材)、ONI 7d组(视神经损伤后7d取材)、ONI 14d组(视神经损伤后14d取材)。分组后通过视神经夹持的方法制作小鼠视神经损伤模型，利用RT-qPCR与Western-blot检测各组小鼠视网膜中TLR-9与MyD88的mRNA和蛋白水平。

结果：ONI 1d组视网膜中TLR-9与MyD88的mRNA和蛋白水平与空白对照组比较无差异(P>0.05)； ONI 3d、ONI 5d、ONI 7d、ONI 14d组视网膜中TLR-9与MyD88的mRNA和蛋白水平与空白对照组比较均明显增加(P<0.01)。与空白对照组比较视网膜中TLR-9与MyD88的mRNA和蛋白水平在小鼠ONI 3d开始升高(P<0.01)，ONI 5d达到峰值(P<0.001)，ONI 7d开始逐渐下降(P<0.01)。

结论：小鼠视神经损伤能够激活视网膜中TLR-9与MyD88表达，TLR-9与MyD88可能在视神经损伤的进程中起重要作用。]]> 2022/5/30 15:27:43 20true 方法：选取青紫蓝兔48只经制作眼球穿通伤及玻璃体腔内注射0.3mL富含血小板血浆的方法制备TPVR动物模型，随机分为4组(n=12)，其中对照组玻璃体腔注入0.1mL生理盐水； TA组玻璃体腔注入0.1mL(1mg/mL)曲安奈德； ART组玻璃体腔注入0.1mL(20μg/mL)青蒿琥酯； LU组玻璃体腔注入0.1mL(10μg/mL)木犀草素。术后1、2、3、4wk通过眼底照相和眼部B超观察玻璃体及视网膜增生情况，术后28d采用Western Blot法检测各组兔眼玻璃体液中α-SMA和VIM蛋白表达水平，并经视网膜HE染色观察各组视网膜组织结构情况。

结果：术后28d，TA组、ART组和LU组兔眼TPVR分级均显著低于对照组(P<0.05)，且TA组兔眼TPVR分级均显著低于ART组和LU组(P<0.05)。术后28d，TA组、ART组和LU组兔眼玻璃体液中α-SMA和VIM蛋白的表达水平均显著低于对照组(P<0.01)。HE染色结果显示，对照组兔眼视网膜各层排列紊乱，严重扭曲或局部断裂，各层结构不清晰，前膜明显增厚，视网膜明显脱离； LU组兔眼视网膜各层排列轻微扭曲，视网膜前可见炎性渗出，视网膜浅层脱离； ART组兔眼视网膜结构清晰，轻度水肿，可见浅层脱离； TA组兔眼视网膜各层结构清晰，排列尚整齐，局部可见视网膜褶皱，无视网膜脱离。

结论：玻璃体腔内注射曲安奈德、青蒿琥酯及木犀草素均对TPVR具有防治作用，其中曲安奈德效果最明显。]]> 2022/5/30 15:27:43 19true 方法：用双荧光素酶表达报告系统探讨miR-223-3p对Rbpj基因表达的调控作用。将24只雌性Lewis大鼠随机分为EAU模型组、正常对照组(NC组)和空白对照组(BC组)，每组8只。EAU模型组注射含光感受器间维生素A结合蛋白(IRBP)、结核菌素和完全弗氏佐剂的乳糜液以诱导葡萄膜炎，BC组注射等体积的不含IRBP多肽的乳糜液，NC组注射等体积的无菌生理盐水。免疫后12d，无菌分离三组大鼠的脾脏、淋巴结和眼组织，实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测miR-223-3p和Rbpj基因的表达水平； 酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测Rbpj、IFN-γ、IL-17蛋白的表达水平； 流式细胞仪检测三组大鼠不同组织中Th1和Th17细胞的表达水平。

结果：双荧光素酶检测结果证实Rbpj是miR-223-3p调控的靶基因。免疫后12d，相比于NC组，EAU模型组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中miR-223-3p相对表达水平分别为0.33±0.29、0.11±0.12、0.18±0.11，均呈下调表达(均P<0.05)； Rbpj mRNA水平均呈上调表达，分别为3.00±0.06、1.52±0.12、3.01±0.34(均P<0.05)； BC组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中miR-223-3p和Rbpj mRNA水平与NC组相比均无差异(P>0.05)。ELISA检测结果发现，免疫后12d的EAU模型组大鼠各组织中Rbpj、IFN-γ、IL-17蛋白表达水平均明显高于NC组(均P<0.05)，BC组大鼠各组织中Rbpj、IFN-γ、IL-17蛋白表达水平与NC组相比均无差异(P>0.05)。流式细胞仪检测结果显示，免疫后12d，EAU模型组各组织的Th1和Th17细胞比例均显著高于NC组(均P<0.05)。BC组与NC组各组织Th1和Th17细胞比例无明显变化(均P>0.05)。

结论：miR-223-3p可负调控Notch信号通路转录因子Rbpj的表达。EAU大鼠中miR-223-3p的下调表达可升高Rbpj基因和蛋白的表达水平，促进Th1和Th17细胞的分化以及提高相关分子IFN-γ和IL-17的表达水平，进而影响葡萄膜炎的发生发展。]]> 2022/4/24 18:49:23 18true 方法：选取健康清洁级新西兰白兔15只，采用自身对照，以兔右眼为实验眼，左眼为对照眼。实验眼使用FS粘贴的双层角膜基质透镜作为移植材料行板层角膜移植手术，对照眼不进行人工干预。分别于术后7、14、28d使用手持裂隙灯观察双眼角膜情况，并进行生物相容性评分，同时取双眼角膜行HE染色进行组织病理学检测，观察角膜恢复情况。

结果：裂隙灯观察结果显示，至角膜移植术后28d，实验眼角膜上皮生长情况良好，角膜透明度基本恢复，水肿程度减轻，新生血管生长至角膜缘后未加重，未见上皮、内皮排斥线等排斥反应； 对照眼角膜透明，角膜上皮光滑。生物相容性评分结果显示，角膜移植术后实验眼角膜植片水肿程度逐渐减轻，透明度逐渐恢复，排斥反应较小，角膜植片的生物相容性较好； 至术后28d，实验眼和对照眼角膜透明度、水肿程度及新生血管生长程度均无差异(P>0.01)。组织病理学检测结果显示，至角膜移植术后28d，实验眼植片表面有4～5层角膜上皮细胞覆盖，角膜胶原排列整齐、规则，植片内未见明显炎性细胞浸润，双片透镜间分界消失，层间FS被机体完全吸收，植片与植床融合，未见明显分界。

结论：使用FS粘贴的双层角膜基质透镜作为植片行板层角膜移植术后恢复较好，排斥反应较小，生物相容性较好，可用于板层角膜移植。]]> 2022/4/24 18:49:23 17true 方法：合成姜黄素/壳聚糖-脱氧胆酸纳米粒并分析其性能。将负载荧光染料异硫氰酸荧光素的壳聚糖-脱氧胆酸及姜黄素/壳聚糖-脱氧胆酸作用于hRPE细胞24h后，于倒置荧光显微镜下观察避光培养1、3、5d后二者与hRPE细胞的相互关系。

结果：通过将姜黄素与壳聚糖-脱氧胆酸混合制成负载药的壳聚糖衍生物纳米粒为淡黄色； 药物从纳米粒中的释放在96h后达到平衡，累积释放药物量为31.6%。异硫氰酸/壳聚糖-脱氧胆酸与hRPE细胞作用1d后，壳聚糖-脱氧胆酸纳米粒大部分仍位于近细胞膜的部位； 作用3d后，纳米粒逐渐向细胞核会聚，且大部分位于细胞核周围； 作用5d后，可看到壳聚糖-脱氧胆酸纳米粒已进入细胞核，且纳米粒可能在细胞内溶酶体的作用下有部分降解。姜黄素/壳聚糖-脱氧胆酸纳米粒和hRPE细胞作用的关系与壳聚糖-脱氧胆酸大致相同。

结论：通过壳聚糖-脱氧胆酸包载的姜黄素纳米粒能持续释放出姜黄素，具有较持久的缓释功能。]]> 2022/2/24 14:17:20 16true 方法：采用高糖诱导HRVECs建立细胞损伤模型(高糖组)，实验分组：高糖+达格列净低剂量组(1ng/L)、高糖+达格列净中剂量组(5ng/L)、高糖+达格列净高剂量组(10ng/L)、高糖+达格列净高剂量+pcDNA组、高糖+达格列净高剂量+pcDNA-FOXO4组、正常糖组(5.5mmol/L D-葡萄糖)、高糖+si-NC组、高糖+si-FOXO4组； 采用流式细胞术检测细胞凋亡率； 根据试剂盒检测SOD、MDA的水平； 采用Western blot法检测FOXO4蛋白表达量。

结果：与正常糖组比较，高糖组细胞凋亡率升高，MDA的水平升高，FOXO4蛋白水平升高，SOD的水平降低(均P<0.05)； 与高糖组比较，高糖+达格列净中剂量组、达格列净高剂量组细胞凋亡率降低，MDA的水平降低，FOXO4蛋白水平降低，SOD的水平升高(均P<0.05)； 与高糖+达格列净高剂量+pcDNA组比较，高糖+达格列净高剂量+pcDNA-FOXO4组细胞凋亡率升高，MDA的水平升高，SOD的水平降低(均P<0.05)。

结论：达格列净可通过下调FOXO4而抑制高糖诱导的HRVECs氧化应激及抑制细胞凋亡从而减轻细胞损伤。]]> 2022/2/24 14:17:21 15true 方法：体外培养ARPE-19细胞，将细胞分为对照组(正常培养基培养)、加药物组(PTX)。不同浓度PTX(0.005、0.05、0.5、5mg/L)处理ARPE-19细胞12、24、36、48、72h，CCK8法检测不同浓度PTX不同时间点对ARPE-19细胞增殖的影响； 流式细胞术检测不同浓度PTX不同时间点对ARPE-19细胞凋亡的影响及周期阻滞作用； 免疫荧光观察细胞形态变化； Western blot检测凋亡相关蛋白表达及屏障功能相关蛋白表达； 通过测量细胞跨上皮电阻检测药物对细胞屏障的影响。

结果：PTX使ARPE-19细胞的增殖能力降低，0.005mg/L PTX处理36h，细胞增殖开始受影响； 同时，PTX加速细胞凋亡且与时间、药物浓度呈依赖性，流式检测细胞周期可明显得出细胞被阻滞于G2-M期。0.05mg/L PTX处理24h后，细胞形态发生明显改变，正常细胞呈梭形或不规则形，加药物组中，细胞数相对减少且形态趋于圆形； 0.05mg/L PTX破坏视网膜屏障功能，药物处理后细胞跨上皮电阻显著降低且紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的表达较对照组显著降低(P<0.05)。Cleaved-caspase-3、Bax的表达量较对照组显著增加，Bcl-2的表达量较对照显著降低(P<0.05)。

结论：PTX对ARPE-19细胞的增殖、凋亡，且依赖与时间及浓度； 此外，PTX对ARPE-19细胞周期及形态均产生影响。同时PTX可破坏视网膜的屏障功能，提示抗肿瘤药物存在对视网膜潜在的毒性作用。]]> 2022/1/27 16:19:50 14true 方法：通过500mOsm/L浓度渗透压作用于HCECs制造干眼细胞模型。空白组：正常条件培养的角膜上皮细胞； 模型组：模型细胞加入10%空白血清； 西药组：模型细胞加入0.3%玻璃酸钠滴眼液； 杞参方高剂量组：模型细胞加入15%杞参方高剂量含药血清； 杞参方中剂量组：模型细胞加入15%杞参方中剂量含药血清：杞参方低剂量组：模型细胞加入15%杞参方低剂量含药血清。CCK-8法检测不同药物干预对HCECs存活率的影响； ELISA法检测各组细胞外液炎性因子TNF-α、IL-6的表达； 免疫细胞化学法检测各组HCECs凋亡因子caspase-1与AQP5的蛋白表达变化； Western blotting法检测各组HCECs的JNK1、p-JNK1、AQP5表达情况。

结果：与空白组相比，各组HCECs存活率均显著减少(均P<0.01)，各组细胞外液炎症因子TNF-α、IL-6及HCECs中caspase-1、p-JNK1、AQP5蛋白表达水平均显著增高(均P<0.01)； 与模型组相比，各用药组HCECs存活率均显著增加(均P<0.01)，各用药组的细胞外液中TNF-α、IL-6及HCECs中AQP5、p-JNK1蛋白表达水平及西药组及杞参方高中剂量组caspase-1、AQP5蛋白表达均减少(均P<0.05)； 与西药组相比，杞参方高剂量组HCECs存活率显著增加(P<0.01)，杞参方各剂量组的TNF-α、IL-6表达水平均减少(均P<0.05)，杞参方高剂量组caspase-1及杞参方高、中剂量组的AQP5蛋白表达水平减少(均P<0.05)。Western blotting法检测HCECs的JNK1蛋白表达各组比较无差异(P>0.05)。

结论：杞参方颗粒可降低高渗诱导HCECs的JNK1的磷酸化和AQP5的蛋白表达，降低细胞外液炎症因子TNF -α、IL-6和HCECs凋亡因子caspase-1的表达，最终有效抑制炎症反应和细胞凋亡。]]> 2021/12/21 20:43:50 13true 目的：制备一种叶酸-磁双靶、载阿霉素(ADM)相变型脂质体纳米粒(FA-PFH-Fe₃O₄@ADM)，观察其对视网膜母细胞瘤Y79细胞的寻靶能力及体外超声/光声/磁共振三模态成像能力。

方法：采用双乳化法制备FA-PFH-Fe₃O₄@ADM纳米粒，检测其基本特性及细胞安全性，观察纳米粒在808nm激光下的升温现象及相变情况。将对数生长期的Y79细胞进行分组，非靶向组及单磁靶组加入PFH-Fe₃O₄@ADM纳米粒(0.625mg/mL)，单叶酸靶组及叶酸-磁双靶组加入FA-PFH-Fe₃O₄@ADM纳米粒(0.625mg/mL)，并于单磁靶组和叶酸-磁双靶组的孔板侧放约4T磁铁1枚，评估纳米粒对Y79细胞的寻靶能力。此外，观察FA-PFH-Fe₃O₄@ADM纳米粒体外超声/光声/磁共振三模态成像能力。

结果：成功制备的FA-PFH-Fe₃O₄@ADM纳米粒呈分布均匀、大小均一的球形结构，平均粒径为338.6±2.20nm，成功装载ADM和Fe₃O₄，包封率分别为(41.76±4.12)%、(59.06±13.63)%，具有良好的顺磁性能，且对Y79细胞无明显的生物毒性。叶酸-磁双靶组吞噬率[(86.19±0.55)%]高于单叶酸靶[(43.36±5.91)%]和单磁靶组[(28.58±3.23)%](P<0.05)。激光作用下，FA-PFH-Fe₃O₄@ADM纳米粒能迅速升温并发生相变，且可以增强超声及光声成像，T₂模式下可对磁共振成像进行负性增强。

结论：本研究成功制备的FA-PFH-Fe₃O₄@ADM纳米粒不仅对视网膜母细胞瘤Y79细胞具有较好的靶向性，还能实现体外超声/光声/磁共振三模态成像。]]> 2022/11/29 14:58:51 12true 目的：研究水蛭提取液对视网膜母细胞瘤细胞(WERI-RB-1细胞)表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响及相关分子机制。

方法：将体外培养的WERI-RB-1细胞分为对照组、0.04U/mL水蛭提取液组、0.08U/mL水蛭提取液组，对照组采用完全培养基培养48h，水蛭提取液组分别采用含0.04、0.08U/mL含药培养基培养48h。采用ELISA法检测各组细胞培养基上清液中VEGF表达水平； 采用RT-PCR法检测各组细胞缺氧诱导因子-1a(HIF-1a)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA相对表达水平； 采用Western Blot法检测各组细胞HIF-1a、MMP-9、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、人磷酸化蛋白激酶(p-AKT)相对表达水平。

结果：与对照组比较，水蛭提取液组细胞培养基上清液中VEGF表达均降低(P<0.05)，0.04、0.08U/mL水蛭提取液对VEGF表达抑制率分别为32.43%、38.92%。与对照组比较，水蛭提取液组细胞HIF-1a和MMP-9 mRNA相对表达水平均明显降低(P<0.05)，0.04、0.08U/mL水蛭提取液对HIF-1a mRNA表达抑制率分别为27.64%、24.75%，对MMP-9 mRNA表达抑制率分别为43.97%、51.48%。与对照组比较，水蛭提取液组细胞HIF-1a、MMP-9、PI3K、p-AKT蛋白相对表达水平均明显降低(P<0.05)，0.04、0.08U/mL水蛭提取液对HIF-1a蛋白表达抑制率分别为55.81%、43.85%，对MMP-9蛋白表达抑制率分别为39.49%、47.23%，对PI3K蛋白表达抑制率分别为33.27%、29.83%，对p-AKT蛋白表达抑制率分别为52.07%、30.21%。

结论：水蛭提取液可能通过VEGF/PI3K/AKT通路及HIF-1a、MMP-9因子抑制WERI-RB-1细胞VEGF的表达。]]> 2022/11/29 14:58:51 11true 目的：分析补体系统(CS)及其经典途径在泪腺良性淋巴上皮病变(LGBLEL)发病机制中的作用。

方法：采集LGBLEL患者和眼眶海绵状血管瘤(CH)患者的病变组织标本，使用蛋白质组学方法分析差异蛋白，而后采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学染色(IHC)和蛋白质印迹法(Western Blotting)验证CS信号通路中差异蛋白表达的变化，明确其在LGBLEL发病机制中的作用。

结果：蛋白质组学分析结果表明，相对于眼眶CH患者，LGBLEL患者病变泪腺组织中CS信号通路重要蛋白C3、C5、C9、C1q等表达均发生改变； RT-PCR检测结果显示，与眼眶CH患者相比，LGBLEL患者病变泪腺组织中C1qA、C5、C9 mRNA表达升高； 免疫组织化学染色结果显示，与眼眶CH患者相比，LGBLEL患者病变泪腺组织中C1qA、C3、C5、C9表达明显增多； Western Blotting检测结果显示，与眼眶CH患者相比，LGBLEL患者病变泪腺组织中C1qA、C3、C9蛋白表达水平明显升高。

结论：CS参与LGBLEL的发病机制，其经典途径可能是其发挥作用的途径之一。]]> 2022/10/28 16:28:10 10true 目的：采用不同方法构建乳鼠过敏性结膜炎免疫耐受模型，观察生命早期环境因素对过敏性结膜炎的影响。

方法：Balb/c乳鼠50只随机分为空白对照组、卵清蛋白(OVA)+皮下注射组、OVA+雾化吸入组、OVA+灌胃组、豚草花粉(RW)+皮下注射组、RW+雾化吸入组、RW+灌胃组、屋尘螨(HDM)+皮下注射组、HDM+雾化吸入组、HDM+灌胃组(n=5只/组)。除空白对照组外，各处理组乳鼠分别诱导免疫耐受，成年后再予以相应抗原。通过眼前段照相观察眼表情况，RT-qPCR法检测结膜RANTES、IL-17 mRNA相对表达水平，并通过ELISA法检测血清IL-17浓度。

结果：与空白对照组相比，结膜IL-17 mRNA相对表达水平在RW+灌胃组增高最为显著，RW+皮下注射组增高程度最低(均P<0.05)； 结膜RANTES mRNA相对表达水平在RW+灌胃组增高最为显著(P<0.001)。与空白对照组相比，除OVA+雾化吸入组和RW+皮下注射组外，其他处理组小鼠血清IL-17浓度增高(P<0.05)。

结论：小鼠生命早期皮下注射诱导过敏性结膜炎免疫耐受状态最佳。]]> 2022/9/22 16:19:01 9true 2023/6/21 14:36:09 8true 目的：探索氧化损伤状态下人晶状体上皮细胞(SRA01/04)的蛋白表达变化，以期为年龄相关性白内障(ARC)发病机制的研究提供新的蛋白靶点。

方法：将SRA01/04细胞分为实验组和对照组，实验组即细胞通过紫外线(UVB)照射以构建细胞氧化损伤模型，照射时长为10min； 对照组即细胞未经任何处理。应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术对这两组细胞进行蛋白组测序，以差异倍数>1.2且p<0.05的标准筛选差异表达蛋白(DEPs)，并通过基因本体(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)数据库分别对上调和下调显著性前50的DEPs进行功能富集分析，利用Pathway commons构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络。

结果：本研究共筛选出552个DEPs。相比于对照组，实验组中上调的DEPs有176个，包括HMGB1、USP1等，下调的DEPs有376个，包括POLR2A、POLR2B等。GO和KEGG富集分析显示上调和下调显著性前50的DEPs参与了多种重要的生物学过程和信号通路。PPI网络提示氧化损伤修复(ODR)相关蛋白在UVB诱导的氧化损伤中可能起关键作用。

结论：UVB照射SRA01/04细胞可致多种蛋白，尤其是ODR相关蛋白的表达发生改变，这些研究结果为深入探索ARC发病机制以及研究与治疗靶点相关的蛋白质或通路提供了细胞层面的参考。]]> 2023/3/30 16:29:49 7true 2023/3/2 16:43:33 6true 2023/3/2 16:43:34 5true 目的：探索小鼠视网膜色素变性(RP)模型视网膜内质网应激免疫组织化学(IHC)染色抗体的最适浓度，为研究RP发病机制及干预措施提供相应的指标检测方法。

方法：给予清洁级健康雄性C57BL/6J小鼠腹腔注射N-甲基-N-亚硝基脲(MNU，60mg/kg)制备RP小鼠模型，造模后第7d行视网膜电图(ERG)检测和苏木精-伊红(HE)染色验证造模成功，摘取眼球并采用IHC染色法检测视网膜内质网应激相关蛋白(IRE1、ATF6、PERK、GRP78、Caspase-12)表达情况。

结果：IRE1、ATF6、PERK、GRP78、Caspase-12蛋白均在RP小鼠视网膜呈阳性表达，IRE1抗体浓度为1：1000、ATF6抗体浓度为1：500和1：1000(此抗体两种浓度阳性表达无差异，P>0.05)、PERK抗体浓度为1：1500、GRP78抗体浓度为1：200、Caspase-12抗体浓度为1：100时，阳性表达强度适宜，且与各自其余抗体浓度相应蛋白阳性表达均有差异(P<0.05)。

结论：内质网应激相关蛋白抗体浓度IRE1为1：1000、ATF6为1：500和1：1000、PERK为1：1500、GRP78为1：200、Caspase-12为1：100时，其在小鼠RP模型视网膜IHC染色阳性表达程度较适宜。]]> 2023/1/4 15:06:19 4true 2023/10/24 9:37:18 3true 目的：探索大鼠角膜移植术后玻璃体腔内注射FasL抑制剂对角膜细胞凋亡，角膜Fas、FasL表达，全血和颈部淋巴结中Treg数量及排斥反应指数的影响。

方法：将24只SD大鼠24眼行穿透性角膜移植术，术后随机分为玻璃体腔内注射PBS组(12只12眼)、FasL抑制剂组(12只12眼)，每周记录角膜排斥反应指数，术后1、3、5wk取全血、颈部淋巴结检测Treg数量，取角膜组织测Fas、FasL表达及凋亡细胞数量。

结果：FasL抑制剂组角膜Fas、FasL表达较PBS组明显下降(均P<0.05)； FasL抑制剂组角膜细胞凋亡较PBS组明显减少，FasL抑制剂组术后5wk凋亡最少； 术后3wk开始FasL抑制剂组Treg数量较PBS组明显升高(均P<0.05)，FasL 抑制剂组角膜移植排斥反应评分明显低于PBS组(均P<0.05)。

结论：大鼠角膜移植术后玻璃体腔内注射FasL抑制剂可减少角膜各层细胞凋亡，增加全血、颈部淋巴结中Treg的数量，减轻排斥反应。]]> 2023/9/19 10:01:15 2true 目的：探讨缺氧条件下Wnt/β-catenin通路在晶状体上皮细胞上皮-间充质转化(EMT)中的作用，分析Dickkopf-1(DKK-1)的表达对晶状体上皮细胞EMT的影响。

方法：将体外培养人晶状体上皮细胞(HLEB3细胞)分为正常氧培养组(加入含10% FBS的DMEM培养液)和缺氧培养组(加入含100μmol/L CoCl₂溶液的培养液进行缺氧处理6、12、24、48h)。利用免疫荧光染色法检测Wnt3a和DKK-1蛋白的表达及β-catenin蛋白的表达和定位； 利用qRT-PCR法检测DKK-1 mRNA的表达。

结果：免疫荧光染色结果显示，随着缺氧时间的延长，HLEB3细胞中Wnt3a和DKK-1蛋白表达水平明显上调，β-catenin蛋白在细胞核内积聚逐渐增多。qRT-PCR检测结果显示，与正常氧培养组相比较，缺氧培养6h组细胞中DKK-1 mRNA无显著差异(P>0.05)，而缺氧培养12、24、48h组细胞中DKK-1 mRNA表达明显增加(P<0.001)。

结论：缺氧可以激活晶状体上皮细胞Wnt/β-catenin通路，并诱导Dickkopf-1的表达，参与调控Wnt/β-catenin通路，影响EMT进程。]]> 2023/9/19 10:01:16 1true